李宝金
- 作品数：2 被引量：23H指数：2
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人类视网膜血管内皮细胞的培养与鉴定被引量：21
- 2005年
- 目的建立人视网膜血管内皮细胞培养的简便方法.方法胰蛋白酶消化供角膜移植术后留下的眼球,获得新鲜视网膜血管,用5%胎牛血清的人内皮细胞培养基培养(HE-SFM BGM),添加生长因子和胰岛素-转铁蛋白-硒添加物,并用纤维连接蛋白促进内皮细胞贴壁.第Ⅷ因子相关抗原鉴定内皮细胞.结果内皮细胞第1 d贴壁,第6 d形成克隆,第15 d细胞融合.传至7～8代转化为成纤维细胞.第Ⅷ因子相关抗原鉴定纯净度达95%.结论利用5%胎牛血清的人内皮细胞培养基,添加生长因子和胰岛素-转铁蛋白-硒添加物,并用纤维连接蛋白包被培养瓶,能简单有效地培养人视网膜血管内皮细胞.
- 李斌唐仕波张革陈剑虹李宝金
- 关键词：视网膜内皮细胞
- 体外转染人发状分裂相关增强子-1基因重塑视网膜新生血管的研究被引量：2
- 2005年
- 目的探讨体外转染人发状分裂相关增强子1(HESR-1)基因至视网膜血管内皮细胞并重塑视网膜新生血管的可行性。方法将HESR-1克隆至pcDNA3.1+载体内,组成pcDNA3.1+HESR-1重组质粒,原代培养人视网膜血管内皮细胞,实验中加入10ng血管内皮生长因子(VEGF)刺激内皮细胞生长,模拟体内新生血管内皮细胞激活状态,以脂质体转染pcDNA3.1+HESR-1重组质粒至培养的细胞内,应用免疫组织化学法检测血管内皮生长因子(VEGF)第2受体(KDR)和紧密连接蛋白(occludin)表达的阳性率,采用免疫印迹法分析HESR-1对occludin表达的调控作用,体外建立视网膜血管模型,检测HESR-1对血管通透性的影响。结果HESR-1基因成功转染至血管内皮细胞,KDR表达阳性率下降,occludin表达增强。重塑的体外血管样结构通过HESR-1的作用能降低血管通透性。结论HESR-1基因能下调KDR的表达,增强occludin的表达,减少血管渗漏,达到重塑视网膜新生血管的目的;可为视网膜新生血管的治疗提供新的思路和方法。(中华眼科杂志,2005,41:1027-1032)
- 唐仕波李斌张革陈剑虹李宝金
- 关键词：转录因子视网膜新生血管化
