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PCR—RFLP技术用于脓肿分枝杆菌群鉴定的初步研究被引量：5: 2011年; 目的探讨PCR—RFLP分子鉴定技术对脓肿分枝杆菌群鉴定的应用价值。方法收集2009--2010年在福建省肺科医院、北京市朝阳区疾病预防控制中心、北京解放军总医院抗酸染色阳性菌株46株。根据2004年分枝杆菌检验手册临床检验常分离菌鉴定程序，用DNA直接测序方法为对照，以hsp65（441bp）和rpoB（380bp）基因的特异片段为分子标识，采用PCR—RFLP对脓肿分枝杆菌群临床分离菌株进行菌种鉴定。结果接种L-J、PNB和TCH培养基，鉴定为结核分枝杆菌30株，非结核分枝杆菌16株。其中10株非结核分枝杆菌的培养特性和主要生化反应同脓肿分枝杆菌（ATCC19977）结果一致。经hsp65PCR—RFLP鉴定，9株菌株的指纹图谱为235和200bp（BstEⅡ）／145、70、60、55、50和40bp（HaeⅢ），1株菌株的指纹图谱为235和200bp（BstEⅡ）／200、70、60和50bp（Haem）。经rpoBPCR—RFLP鉴定，10株临床菌株的指纹图谱是105、95和80bp（Msp Ⅰ）／130、100bp和90bp（HaeⅢ）。DNA测序分析，9株分离株与脓肿分枝杆菌群脓肿亚种hsp65和rpoB基因序列匹配度均为100％；1株分离株与脓肿分枝杆菌群马赛分枝杆菌亚种hsp65和rpoB基因序列匹配度均为100％。结论PCR—RFLP是一种快速、有效鉴定脓肿分枝杆菌的方法，且hsp65PCR—RFLP的答定效果优于moBPCR—RFLP。; 李艳冰张媛媛李晓亮赵秀芹万康林刘文恩; 关键词：分枝杆菌属细菌蛋白质类聚合酶链反应细菌分型技术

一株马鼻疽诺卡菌临床分离株的鉴定被引量：2: 2011年; 目的应用基因测序分析进行诺卡菌(Nocardia farcinica)鉴定。方法将临床分离菌株BJ7菌株与诺卡菌标准参照菌株AY756551和结核分枝杆菌H37Rv接种L-J、PNB/TCH鉴别培养基。用生长良好的培养物提取全基因组DNA。设计引物,对rpoB、16S rDNA基因片段进行PCR扩增,对其PCR产物进行测序和网上同源性比对。结果 PNB/TCH鉴别培养基鉴定BJ7为非结核分枝杆菌,进化树中BJ7 16S rDNA序列亲缘关系与诺卡菌标准参照菌株AY756551比较相近,且16S rDNA和rpoBDNA序列与马鼻疽诺卡菌同源性极高,分别达到100%和99%。结论从结核病患者分离的菌株BJ7为马鼻疽诺卡菌。DNA测序分析能够快速、简便、准确地鉴定诺卡菌。; 李晓亮张媛媛赵平赵秀芹陈祥焦新安万康林; 关键词：非结核分枝杆菌菌种鉴定测序分析

马赛分枝杆菌肺病一例并文献复习被引量：3: 2011年; 目的分析马赛分枝杆菌肺病的临床特征，探讨其鉴别诊断方法。方法分析患者的临床表现及实验室检测结果，对其临床分离菌株进行细菌学检查和分子生物学鉴定，采用PCR扩增rpoB和hsp65基因片段和双向DNA测序，并与美国国立生物技术信息中心（NCBI）数据库比对进行菌种鉴定。结果患者女，72岁，体质瘦弱，因反复出现呼吸道症状而入院，既往多次治疗无效。该病例的临床分离菌株经细菌学检查和分子生物学鉴定确定为马赛分枝杆菌，rpoB和hsp65基因片段测序结果与NCBI数据库马赛分枝杆菌相应片段的同源性分别为100％和99％，结合临床表现确诊为马赛分枝杆菌肺病。药敏试验结果显示该菌株对多种药物耐药，根据药敏试验结果和患者的身体条件确定治疗方案，采用静脉滴注头孢西丁和口服阿米卡星治疗有效。结论马赛分枝杆菌肺病多发于免疫功能低下人群，其临床和影像学表现与结核病相似，通过实验室细菌学检测和菌种鉴定，可以对二者进行鉴别。; 王涛张媛媛秦雪冰李晓亮赵秀芹刘志广万康林; 关键词：分枝杆菌感染分枝杆菌

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李晓亮

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