李杰 作品数:11 被引量:8 H指数:2 供职机构: 深圳市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 深圳市科技计划项目 深圳市基础研究计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 水利工程 更多>>
特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体及其构建方法和应用 本发明公开了一种特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体及其构建方法和应用,所述shRNA表达载体,包括表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点、启动子序列、可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列,所述的... 刘建军 蒋英芝 杨细飞 李杰 周丽镉对NRK肾细胞PKCα表达的影响及PKC抑制剂BisⅠ的生物学作用 2010年 目的:探讨不同浓度氯化镉(CdCl2)对NRK细胞内蛋白激酶Cα(PKCα)mRNA及其蛋白质表达的影响,以及PKC抑制剂Bisindolymalei mide I(Bis I)对镉染毒NRK细胞PKCαmRNA及蛋白质表达的生物学作用。方法:应用实时荧光定量PCR技术检测不同浓度(0、1.25、2.50、5.00、10.00μmol/L)CdCl2对NRK肾细胞处理6h与12h后PKCαmRNA表达的影响,同时用Western blot技术检测CdCl2对NRK肾细胞内PKCα蛋白质表达的影响。用PKC抑制剂Bis I预处理细胞后,用不同浓度CdCl2(0、2.50、5.00μmol/L)进行染毒,再检测PKCαmRNA及蛋白质的表达变化。结果:CdCl2浓度在1.25~10.00μmol/L范围内,可引起NRK肾细胞内PKCαmRNA及蛋白质表达水平升高,并呈时间_剂量_效应关系;PKC抑制剂Bis I能明显抑制镉引起的PKCαmRNA及蛋白质的表达。结论:CdCl2可以诱导NRK肾细胞内PKCαmRNA及蛋白质表达,PKC抑制剂Bis I具有一定程度抑制CdCl2对PKCα的诱作用,因此在抑制CdCl2对生物机体的伤害作用方面具有生物学意义。 周丽 李杰 刘建军 徐新云 杨淋清关键词:镉 蛋白激酶C抑制剂 三氯乙烯对L-02肝细胞活力及SET蛋白表达的影响 被引量:1 2012年 三氯乙烯(Trichloroethylene,TCE)是工业上广泛应用的一种有机溶剂,主要通过呼吸道和皮肤进入人体产生职业性危害,吸收后主要蓄积于肝脏、脑、心脏等器官。 李杰 王晓梅 刘建军 杨细飞 杨亮关键词:三氯乙烯 MTT法 蛋白印迹 SET在乳腺癌中的生物学作用 目的 探讨SET基因对乳腺癌细胞转移及侵袭的影响.方法 培养MDA-MB-231细胞,利用慢病毒介导的RNA干扰技术构建SET缺陷表达的乳腺癌细胞株;利用MTT吸光度与细胞数目之间的关系绘制细胞生长曲线,并利用公式计算细... 李杰 任晓虎 黄培武 洪文旭 杨细飞 刘建军关键词:乳腺癌 特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体及其构建方法和应用 本发明公开了一种特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体及其构建方法和应用,所述shRNA表达载体,包括表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点、启动子序列、可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列,所述的... 刘建军 蒋英芝 杨细飞 李杰 周丽文献传递 几类化学污染物毒性关键分子鉴别与功能分析及应用研究 刘建军 杨细飞 洪文旭 黄海燕 袁建辉 彭朝琼 张艳芳 庄志雄 王晓梅 周丽 任晓虎 黄新凤 刘威 申治国 李杰 化学污染物是一类人类活动中广泛接触的外源性化学物质,可通过环境暴露、饮食摄入等多种途径进入人体,危害人类健康,可导致严重的公共卫生问题。至今,大多数化学污染物的毒性作用机制尚不明确、特异性生物标志物不清及缺乏敏感的检测手...关键词:关键词:化学污染物 毒性机制 毒性检测 稳定干扰SET肝细胞株的生物学鉴定 2012年 目的:对稳定干扰SET(patient SE translocation)的肝细胞株进行生物学性状鉴定,为研究SET蛋白在肝细胞中的作用奠定基础。方法:培养人肝L-02细胞、慢病毒载体介导的稳定干扰(siRNA)SET L-02肝细胞及psiRNAc L-02肝细胞(空载体转染细胞),于倒置显微镜下观察细胞形态,利用MTT吸光度与细胞数目间关系绘制生长曲线,采用染色体畸变试验观察染色体有无结构异常,软琼脂克隆实验检测细胞的恶性转化。结果:与正常肝细胞比较,稳定干扰SET肝细胞及psiRNAc肝细胞的生长形态无明显变化,3组细胞的生长曲线趋于一致。染色体畸变分析表明SET基因沉默的人肝L-02细胞染色体结构与数目未发生明显改变。软琼脂克隆实验表明SET基因沉默的人肝L-02细胞未发生恶性转化。结论:SET siRNA的导入未引起细胞生物学特征的改变,遗传性状保持稳定,说明所构建的SE7基因沉默的人肝L-02细胞模型是稳定的,为后续的研究提供了工具细胞。 周丽 李杰 黄遂 杨细飞 刘建军关键词:三氯乙烯 生物学性状 细胞增殖 一例三氯乙烯药疹样皮炎患者不同发病时期血清蛋白质组分析 被引量:3 2014年 三氯乙烯(TCE)为工业上广泛使用的有机溶剂,由于工人的保护措施不当,易经呼吸道、消化道和皮肤吸收,引起职业性的三氯乙烯药疹样皮炎(OMLDT),严重损害患者的皮肤、肝脏、肾脏、胆、脾等器官,甚至使患者因多器官衰竭而死亡.该病的发病机制尚不明确,缺乏监测和诊断的生物学手段,易导致漏诊和误诊,且疗效不佳,后果严重,已成为我国职业卫生的新问题.血清中的蛋白质含量丰富,且很多蛋白质的变化与机体所处的状态息息相关,分析血清蛋白的变化对认识疾病演变过程,分离疾病特征标志和寻找药物靶点具有重要意义. 黄培武 任晓虎 洪文旭 杨细飞 张航 李杰 张艳芳 刘建军关键词:三氯乙烯药疹样皮炎 蛋白质组分析 血清蛋白 发病时期 多器官衰竭 皮肤吸收 利用免疫共沉淀技术验证SET与eEF1A1在人肝细胞内的相互作用 被引量:2 2010年 [目的]探讨SET与eEF1A1在人肝细胞内是否存在相互作用。[方法]以人L-02肝细胞为材料,在非变性条件下提取总蛋白,将鼠抗人SET、兔抗人eEF1A1抗体分别加到总蛋白提取物中,用偶联了琼脂糖珠的Protein A/G分离抗原抗体复合物,最后分别用兔抗人eEF1A1、鼠抗人SET抗体进行Western blotting检测。[结果]在用SET抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中检测到eEF1A1,同时在用eEF1A1抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中也检测到SET。[结论]SET与eEF1A1在人肝细胞内存在相互作用。 杨亮 杨细飞 张毅 刘建军 李杰关键词:SET 免疫共沉淀 相互作用 Verification of the Interaction between SET and eEF1A1 in Human Liver Cells by Co-immunoprecipitation 被引量:2 2010年 [Objective] The aim was to investigate the possible interaction between SET and eEF1A1 in human liver cells. [Method] Firstly the total proteins of human L-02 liver cells were extracted under non-denaturing conditions; then,mouse anti-human SET and rabbit anti-human eEF1A1 antibodies were used to perform the co-immunoprecipitation respectively; subsequently,the immunoprecipitations was correspondingly detected with rabbit anti-human eEF1A1 and mouse anti-human SET antibodies by Western Blot. [Result] EEF1A1 was detected in protein complex from the immunoprecipitations by using anti-SET antibody,and SET also was detected in immunoprecipitations by using anti-eEF1A1 antibody. [Conclusion] The interaction between SET and eEF1A1 in human liver cells was confirmed. 杨亮 杨细飞 张毅 刘建军 李杰关键词:SET IMMUNOPRECIPITATION INTERACTION