李若馨
- 作品数：16 被引量：143H指数：6
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- 反义hTERT体外抑制白血病细胞增殖的研究被引量：1
- 2004年
- 目的研究反义hTERT基因对白血病细胞体外增殖的抑制作用。方法体外通过SuperFect将已构建好的正、反义hTERT真核表达载体转染HL60白血病细胞,再经过G418及PCR筛选鉴定分别转入了正、反义hTERT载体的抗性克隆细胞HL60-s和HL60-as。随后运用实时荧光定量RT-PCR技术及TRAP-银染法对各组细胞内源性hTERT mRNA的表达情况及端粒酶的活性进行检测。同时还采用MTT法、双层软琼脂克隆形成试验、流式细胞术观察和分析反义hTERT对白血病细胞体外生长增殖活力的影响及是否能诱导瘤细胞的凋亡。结果与空白对照、正义hTERT组相比,反义hTERT能显著地降低HL60细胞内源性hTERT mRNA的表达(P<0.01)和下调端粒酶活性。当各组细胞传至第25代后,与HL60、HL60-s比较,HL60-as细胞的生长速度和集落形成能力明显地减慢和降低,同时伴有凋亡率的显著增加。结论反义hTERT在体外能抑制白血病细胞的生长增殖能力,其潜在、广谱的抗肿瘤作用的分子生物学机制可能是首先通过抑制和下调hTERT表达(端粒酶活性)而最终引发瘤细胞衰亡的途径来实现的。
- 孙来保李成荣文剑明王国兵张萌杨军李若馨
- 关键词：反义HTERT白血病细胞增殖分子生物学
- 反义hTERT体外诱导肺癌细胞凋亡的研究被引量：2
- 2005年
- 目的研究反义hTERT基因体外诱导肺癌细胞凋亡。方法体外通过SuperFect(QIAGEN)转染正、反义hTERT真核表达载体至人肺腺癌细胞株GLC82,再经过G418及PCR筛选鉴定获得分别转入了正、反义hTERT载体的抗性克隆细胞GLC82s和GLC82as。然后采用MTT法、双层软琼脂克隆形成试验、流式细胞术观察和分析了反义hTERT对肺癌细胞体外生长增殖活力的影响及是否能诱导瘤细胞的凋亡;同时还运用实时荧光定量RTPCR技术及TRAP银染法对各组细胞内源性hTERTmRNA的表达情况及端粒酶的活性进行了检测。结果当各组细胞传至第25代后,与GLC82、GLC82s比较,GLC82as细胞的生长速度和集落形成能力明显地减慢和降低,同时伴有凋亡率的显著增加;与空白对照、正义hTERT组相比,反义hTERT能显著地降低GLC82细胞内源性hTERTmRNA的表达(P<0.01)和下调端粒酶活性。结论反义hTERT体外确实能明显地诱导肺癌细胞的凋亡及抑制瘤细胞的生长增殖能力。
- 尹为华马雅余光银李若馨孙来保
- 关键词：反义HTERT肺癌细胞凋亡流式细胞术逆转录聚合酶链反应
- 反义hTERT基因对白血病细胞端粒酶表达及活性的抑制作用被引量：10
- 2004年
- 目的 探讨反义hTERT基因体外对白血病细胞端粒酶基因表达及其活性的抑制作用。方法 采用基因重组技术设计并构建了针对端粒酶活性蛋白催化亚单位mRNA的 5′端序列的反义pcDNA hTERT真核表达载体 ,通过SuperFect(QIAGEN)将其瞬时转染人早幼粒白血病细胞株HL60 及人红白血病细胞株K562 ,并运用流式细胞术测定其细胞凋亡与细胞周期的变化 ,同时运用实时荧光定量逆转录 聚合酶链反应方法对其端粒酶蛋白催化亚单位基因的表达水平进行了检测 ,端粒酶活性的检测则采用了非放射性TRAP 银染法。结果 成功地构建了反义pcDNA hTERT真核表达载体 ,并将其转染至K562 和HL60 白血病细胞株。结果与空载体组、空白组相比 ,反义 pcDNA hTERT组体外显示出明显有效地抑制端粒酶的基因表达及其活性的作用 ;在细胞凋亡与细胞周期方面 ,反义组能引起细胞周期左移 ,增殖分裂能力降低 ,同时伴有细胞凋亡数的增加。结论 研究构建的反义hTERT基因体外确实能明显有效地下调白血病细胞端粒酶的基因表达及其活性 。
- 孙来保李成荣文剑明王国兵张萌杨军李若馨
- 关键词：反义HTERT白血病细胞端粒酶酶表达真核表达载体
- 甘露糖结合凝集素基因54号密码子多态性与川崎病易感性的研究被引量：25
- 2004年
- 目的 探讨甘露糖结合凝集素 (MBL)基因第 5 4号密码子多态性与中国汉族儿童川崎病的易感性和临床表型的关系。方法 应用聚合酶链反应 限制性内切酶片段长度多态性分析 ,对16 0例中国汉族健康儿童及 95例川崎病患儿的MBL基因多态性进行检测。结果 ( 1)中国汉族健康儿童MBL基因多态性分布与文献报道的香港华人及高加索人种接近 ,无统计学差异。( 2 )川崎病患儿GAC等位基因频率高于健康对照组 ( 0 2 5 8vs 0 138,P <0 0 1) ,而GGC等位基因频率低于健康对照组 ( 0 74 2vs 0 86 2 ,P <0 0 1)。GAC型等位基因与中国汉族儿童川崎病密切相关 [OR =2 18,95 %CI(OR值的 95 %置信区间 )为 1 38～ 3 4 4 ,P <0 0 5 ]。 ( 3)在川崎病患儿中 ,GAC型等位基因携带者其病史有前驱感染史者多于GGC纯合子 (P <0 0 1)。结论 川崎病发病受遗传背景的影响 ,与MBL第 5
- 杨军李成荣李永柏黄惠君李若馨王国兵
- 关键词：甘露糖凝集素基因川崎病易感性临床表型
- 甘露糖结合蛋白基因多态性与川崎病相关性的研究被引量：9
- 2003年
- 目的 探讨甘露糖结合蛋白 (MBP)基因第 5 4号密码子GGC→GAC变异与川崎病 (KD)的关系。方法 采用PCR RFLP法对中国汉族 16 0例健康儿童及 95例川崎病患儿的MBP基因多态性进行检测。结果 中国汉族健康儿童MBP基因多态性分布与文献报道的中国香港地区华人及丹麦高加索人群无统计学差异。川崎病患儿MBP基因GGC/GAC基因型频率明显高于健康对照组 (45 2 %vs 2 5 0 % ,P <0 0 5 ) ,而GGC/GGC基因型频率显著低于健康对照组 (5 1 6 %vs 73 8% ,P <0 0 5 )。川崎病患儿GAC等位基因频率明显高于健康对照组(2 5 8%vs 13 8% ,P <0 0 5 ) ,而GGC等位基因频率明显低于健康对照组 (74 2 %vs 86 2 % ,P <0 0 5 )。结论 川崎病发病受遗传背景影响 ,与MBP第 5 4号密码子基因多态性密切相关。
- 杨军李成荣李永柏李若馨黄惠君
- 关键词：川崎病甘露糖结合蛋白基因多态性KD儿童
- 三七总皂苷对痴呆模型大鼠大脑皮质内神经递质含量的影响被引量：23
- 2004年
- 目的 :观察三七总皂苷 (PNS)对痴呆模型大鼠大脑皮质内去甲肾上腺素 (NE)、多巴胺 (DA)和 5 羟色胺 (5 HT)含量的影响。方法 :以鹅膏蕈氨酸注入大鼠Meynert基底核建立痴呆模型。 30只实验大鼠随机分为NS组 ;5 0mg·kg-1PNS组和 10 0mg·kg-1PNS组。采用高效液相电化学法测定NE ,DA和 5 HT含量。结果 :10 0mg·kg-1PNS组中 3种递质的含量均高于 5 0mg·kg-1PNS组 (P <0 0 5 ) ,而 5 0mg·kg-1PNS组又高于NS组 (P <0 0 5 )。结论 :PNS能够提高痴呆模型大鼠大脑皮质内NE ,DA和5
- 郭长杰伍杰雄李若馨
- 关键词：三七总皂苷大脑皮质神经递质
- 他巴唑引起严重弥漫性关节炎1例被引量：4
- 2003年
- 陈淑丽孙平李若馨袁泉廖建湘陈蔚雷旻唐辉英李成荣
- 关键词：他巴唑药物不良反应小儿抗甲状腺药物
- 肿瘤坏死因子α和白细胞介素10基因启动子区多态性与川崎病的相关性研究被引量：35
- 2003年
- 目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF 浕)和白细胞介素 10 (IL 10 )基因启动子区多态性与中国汉族儿童川崎病的易感性和临床表型的关系。方法 应用聚合酶链反应 限制性内切酶片段长度多态性分析 (PCR RFLP)方法检测TNF 浕和ＩＬ 10基因启动子区 4个多态性位点 ,对 96例川崎病患儿及 16 0例正常对照儿童进行相关性分析。结果 (1)中国汉族健康儿童TNF 浕基因 30 8(A/G)位点等位基因频率与日本人和美国白人正常人群相近 ;而IL 10基因 10 82 (G/A)、 819(C/T)、 5 92 (A/C) 3个位点等位基因频率与英国正常人群差异有显著性 (P均 <0 .0 1) ;(2 )TNF 浕基因 30 8位点等位基因频率在川崎病组和健康对照组间差异无显著性 ;IL 10 10 82、 819、 5 92的 3个位点等位基因频率和单体型在两组之间比较差异亦无显著性 ;(3)临床表型分析发现 ,TNF α 30 8A基因型在静脉注射免疫球蛋白 (IVIG)非敏感型川崎病患者中的发生频率高于TNF α 30 8G基因型 ,比较差异有显著性 (6 7%vs5 % ,χc2 =90 4 8,P <0 0 1) ,前者发生静脉注射用IVIG非敏感型川崎病的相对危险度 (RR)是后者的4 2 2 5倍 (RR 95 %CI=15 81～ 112 88,P <0 0 1)。IL 10 10 82A/ 819T/ 5 92A单体型在川崎病合并冠状动脉损伤患者中的发生频率高于Non
- 杨军李成荣李永柏李若馨孙来保黄惠君王国兵
- 关键词：肿瘤坏死因子Α白细胞介素10基因启动子川崎病粘膜皮肤淋巴结综合征
- 有机酸血症5例被引量：5
- 2006年
- 目的提高对遗传代谢病神经系统症状的认识。方法应用气相色谱-质谱联用仪(GC/MS)对5例病人的尿样本作有机酸分析,进行筛查诊断,对3例丙二酸血症(MMA)及2例丙酸血症(PA)作以确诊。确诊后接受相应饮食和药物治疗。结果治疗后5例有机酸血症患儿智力、运动发育情况均有改善。结论有机酸血症临床表现复杂,对于不明原因的酸中毒伴意识障碍、惊厥、发育迟滞等症状的病人,须警惕遗传代谢病。GC/MS尿有机酸分析是有机酸尿(血)症筛查与诊断的可靠方法。早诊断及早治疗对改善预后尤为关键。
- 陈黎陈淑丽李若馨肖志田付丹廖建湘
- 关键词：有机酸血症甲基丙二酸血症丙酸血症气相色谱质谱联用仪
- 三七总皂苷对痴呆大鼠模型学习记忆行为的影响及其机理探讨被引量：37
- 2004年
- 目的 :观察三七总皂苷 (PNS)对鹅膏蕈氨酸 (IBA)所致痴呆大鼠模型的学习记忆行为及海马内乙酰胆碱 (ACh)含量的影响。方法 :将IBA注入大鼠Meynert基底核 (NBM )中建立痴呆模型 ,以生理盐水为阴性对照物 ,通过Morris水迷宫观察PNS对其学习记忆能力的改变 ,并用分光光度法测定海马内ACh的含量。结果 :PNS能够改善痴呆模型大鼠的学习记忆能力 ,提高海马内ACh的含量。结论 :PNS对痴呆大鼠的学习记忆能力降低有较好的治疗作用 ,提高海马内ACh含量可能为其作用机理之一。
- 郭长杰伍杰雄李若馨
- 关键词：三七总皂苷痴呆学习记忆乙酰胆碱
