杨志远 作品数:29 被引量:58 H指数:4 供职机构: 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 北京市农林科学院青年基金 北京市农林科学院科技创新能力建设专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
吉林省某地区牛赤羽病的诊断 2024年 【目的】2022年吉林省某地区发现牛赤羽病疑似病例,为明确病因,对发病牛群进行诊断。【方法】对该牛场进行流行病学调查、临床症状分析,再通过实验室组织病理学观察和血清学检测等方法进行综合诊断,将发病死亡胎牛的组织病料和发病母牛胎盘组织研磨液分别接种Vero细胞、SPF鸡胚和乳鼠鼠脑进行病毒分离。【结果】发病母牛主要表现为流产、产死胎,胎儿先天性畸形。流行病学统计当地母牛空怀率为29%,母牛产死胎、产畸形牛的发病率为24%,感染后的母牛可正常怀孕分娩犊牛。分娩的畸形牛关节弯曲、视力障碍,部分犊牛因脑发育异常表现为神经反应迟缓;死亡胎牛出现了积水性无脑的典型病变,表现为头部畸形、脑组织发育不成型和大量脑积水,符合赤羽病的临床特征。畸形犊牛的脑组织病理学检查可见神经元发生嗜酸性坏死,小胶质细胞吞噬坏死神经元,淋巴细胞、单核细胞围裹在血管周围形成“管套”,为典型的非化脓性脑炎,符合赤羽病发病牛脑组织的病变特点。在发病死亡胎牛和母牛胎盘的组织匀浆上清和细胞培养物上清中均未检测到病毒核酸,分析可能与赤羽病病毒血症持续期短有关。发病母牛和犊牛的血清赤羽病ELISA抗体检测结果均为阳性。【结论】诊断该地区母牛异常流产、死产和犊牛畸形为赤羽病,本研究结果为赤羽病的诊断和防控提供了试验数据和参考资料。 杨宝琳 马秀山 林健 王玉珍 王金玲 赵际成 刘月焕 杨志远关键词:赤羽病 鸭坦布苏病毒病卵巢病变标准的判定 被引量:4 2016年 【目的】了解产蛋鸭感染鸭坦布苏病毒后卵巢病变产生的进程和卵巢病变规律,为采用产蛋鸭卵巢病理变化检查法进行疫苗效力检验提供依据。【方法】70只260日龄产蛋樱桃谷鸭,以0.5m L/只(含100DID50)的剂量经胸部肌肉接种鸭坦布苏病毒(HB株)强毒。观察试验鸭的临床症状,统计每日产蛋数和采食量。攻毒后2 d,每只鸭经翅静脉采血,分离血清,经卵黄囊途径接种5枚6日龄SPF鸡胚,每胚0.1m L。接种后置37℃条件下继续孵化,24 h死亡鸡胚弃去。采用RT-PCR方法测定24—72 h死亡鸡胚的DTMUV核酸,将1/5或以上鸡胚死亡且DTMUV核酸阳性的鸭判为DTMUV感染鸭。攻毒后4—10 d,每日剖杀10只鸭,观察和分析生殖系统病变。统计病变率,检查输卵管内是否有蛋,卵泡是否变形、出血和破裂,依据病变率和病变,确定检查内容和病变卵巢的判定时间和标准。【结果】(1)攻毒后3、4、5、6 d,鸭几乎不采食,产蛋数明显下降。攻毒后7 d,鸭精神状况好转;攻毒后8 d,采食量开始回升。(2)70只鸭中,除1只鸭的病毒分离结果为阴性外,其余69只鸭的病毒分离结果均为阳性,病毒分离阳性率为98.6%(69/70)。(3)攻毒后4—10 d,共64只产蛋期鸭的生殖器官可以判定。(4)攻毒后4、5、6、7、8、9和10 d,卵巢病变率分别为66.7%(6/9)、100%(10/10)、100%(10/10)、100%(9/9)、100%(9/9)、100%(9/9)和100%(8/8)。(5)除攻毒后4 d有2只鸭输卵管中有蛋外,其余62只鸭输卵管中均无蛋,无蛋率为96.9%(62/64)。(6)攻毒后4—10 d,96.9%(62/64)鸭的卵泡变形,96.9%(62/64)鸭的卵泡出血,95.3%(61/64)鸭的卵泡变形和出血,34.4%(22/64)卵泡破裂。【结论】(1)确定卵巢病理变化检查时间为攻毒后7—8 d;(2)具有变形或出血病变之一,判病变卵泡。输卵管内无蛋且有3个及以上病变卵泡,判为病变卵巢。 林健 杨志远 何平有 段会娟 邹立宏 杨保收 赵际成 潘洁 王小蕾 刘立新 刘月焕关键词:卵巢 病理变化 禽腺病毒4型人工感染SPF鸡动态病理学观察 被引量:4 2018年 为了深入研究禽腺病毒4型的致病机理,以34日龄SPF鸡人工感染禽腺病毒4型建立了禽腺病毒感染病理模型,并在感染后第1~10天剖杀试验鸡,采集胸腺、心、肝、腺胃、脾、肾,采用常规病理学方法和免疫组织化学方法研究其在感染SPF鸡体内的动态病理变化规律。结果表明,34日龄SPF鸡经口服途径感染禽腺病毒4型,成功建立了人工感染动物模型。感染后第3天鸡出现临床症状,第4~6天为死亡高峰期,第7天后病鸡开始恢复,发病率75%,死亡率67.8%。攻毒后第5天病鸡肝脏病变最重,病变肝细胞内可见嗜碱性、嗜酸性的包涵体,免疫组织化学染色可见攻毒后第5天鸡的肝细胞、脾脏网状细胞和肾小管上皮细胞中出现棕黄色阳性颗粒。 吴烨挺 杨志远 林健 赵际成 王小蕾 段会娟 齐志涛 潘洁 刘月焕 刘立新关键词:动态病理学 鸭坦布苏病毒病灭活疫苗(HB株)母源抗体的消长规律 被引量:7 2016年 【目的】评价鸭坦布苏病毒病灭活疫苗母源抗体的效力,制定疫苗的最小免疫日龄。【方法】随机采集鸭坦布苏病毒病灭活疫苗(HB株)二免后135日樱桃谷种鸭的种蛋孵化,随机取5、7、10和15日龄免疫种鸭后裔雏鸭10只和相对应日龄非免疫种鸭后裔雏鸭5只,采血,分离血清,测定母源抗体,并以0.1m L/羽(含100DID_(50))的剂量经腿部肌肉攻毒。观察雏鸭攻毒后的临床表现(采食量、粪便、精神和死亡情况),观察至攻毒后10d。攻毒后2d经颈静脉采血,分离血清进行病毒分离。每份血清接种5枚6日龄SPF鸡胚,0.1m L/枚,37℃孵化,24h以内死亡鸡胚视为非特异死亡,孵化至168h。只要有1枚及以上鸡胚死亡则判该鸭感染。计算母源抗体雏鸭组的攻毒保护率和无母源抗体组的发病率。攻毒后5d,分别称量雏鸭的体重,计算平均日增重。对成对样本进行T检验,分析母源抗体对雏鸭增重的影响。通过试验鸭中和抗体、增重变化和病毒分离的方法评价母源抗体的效力。【结果】(1)1日龄雏鸭的母源抗体阳性率最高,1、5、7、10和15日龄雏鸭的母源抗体阳性率分别为56.1%(37/66)、40%(4/10)、50%(5/10)、30%(3/10)和0%(0/10),5—7日龄抗体阳性率处于平台期,15日龄时母源抗体降低至全阴性;(2)攻毒后对照鸭表现精神沉郁(20/20)、仰翻和侧翻等神经症状(6/20)及死亡(2/20),有母源抗体的雏鸭临床症状明显轻于对照组。(3)5、7、10和15日龄免疫种蛋孵化雏鸭攻毒后5d平均增重115.5、142.8、177.8和162.2g。5、7、10和15日龄非免疫种蛋孵化雏鸭攻毒后5d平均增重54.5、91.0、165.0和118.8g。(4)5、7、10和15日龄免疫种蛋孵化雏鸭的攻毒保护率分别为50%(5/10)、60%(6/10)、20%(2/10)和0%(0/10);5、7、10和15日龄非免疫种蛋孵化雏鸭的发病率均为100%。(5)5和7日龄雏鸭平均增重和攻毒保护率最高,分别为50%(5/10)和60%(6/10),10和15日龄雏鸭的母源抗体尽管� 韩春华 赵际成 段会娟 林健 杨志远 谢佳 潘洁 王小蕾 刘立新 刘月焕关键词:母源抗体 鸭出血性卵巢炎病毒血症研究 被引量:3 2014年 【目的】阐明鸭出血性卵巢炎病毒(DHOV-HB株)感染鸭后的病毒血症,为深入了解鸭出血性卵巢炎的发病机理、诊断和疫苗研究提供依据。【方法】24只250日龄北京鸭芯片标记后分别经口感染100倍稀释的DHOV-HB株(3×104ELD50),并设空白对照组15只,同等条件下分别在隔离器内饲养,逐日观察10日,各组每日经翅静脉采集10只鸭血液(尽可能采集同一只鸭血液),用于病毒分离和抗体测定。将攻毒后1—10 d的血清样本经卵黄囊途径接种6日龄SPF鸡胚,每份血清以0.1 m L/胚的剂量接种5枚SPF鸡胚,鸡胚接种后置于37℃条件下继续孵化,每日定时照胚2次,及时收获并统计24—168 h之内死亡的鸡胚,死亡鸡胚胚体经剪碎,研磨,离心后采用RT-PCR的方法检测病毒核酸,有1枚及1枚以上死亡鸡胚,且DHOV病毒核酸检测阳性,即将该鸭判为病毒分离阳性。同时采用中和试验测定攻毒后4—10 d的血清抗体,每个血清稀释度接种5枚SPF鸡胚。鸡胚接种途径及特异性死亡的判定方法同上。判定标准如下:血清原液保护80%(4/5)以上的鸡胚判为抗体阳性,保护20%—60%(1/5—3/5)的鸡胚判为抗体可疑,不保护鸡胚(0/5)判为抗体阴性。【结果】试验鸭感染DHOV后的病毒血症和免疫反应密切相关。感染后1—3 d,病毒血症出现并达到高峰,病毒分离均100%(10/10)阳性;4—6 d病毒分离率开始下降,分别为90%(9/10)、70%(7/10)和30%(3/10)阳性;7—10日血清中不再存在病毒,均为阴性(0/10)。中和试验结果表明攻毒后4 d,血清中病毒分离率下降的同时血清中即可能存在较低滴度的抗体,鸡胚死亡时间延后,此时抗体100%(10/10)阴性;攻毒后6 d的血清抗体80%(8/10)阴性,20%(2/10)可疑;攻毒后7 d 70%(7/10)阳性,10%(1/10)阴性,20%(2/10)可疑;攻毒后9 d 90%(9/10)阳性,10%(1/10)可疑;攻毒后10 d 100%(10/10)阳性。空白对照组血清病毒分离(1—10 d)和抗体检测(4—10 d)均为阴性。【结论】(1) 谢佳 韩春华 林健 段会娟 杨志远 赵际成 潘洁 刘月焕关键词:病毒血症 新发鸽腺病毒A型感染的病理变化 被引量:1 2023年 近年来,我国信鸽和肉鸽养殖业发展迅猛,已经成为我国继鸡、鸭、鹅之后的第四大家禽产业。鸽腺病毒(pigeon adenovirus,PiAdV)是鸽群中常见的一种病原,国际病毒分类委员会(International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV)将鸽腺病毒分为PiAdV-A和PiAdV-B。2022年1月起,我国新疆、河北、北京等地区的信鸽公棚以及肉鸽养殖场暴发了一种以鸽肝组织弥漫性坏死和突然死亡为特征的新型鸽腺病毒病。该病在肉鸽场传播缓慢,持续时间长,发病种鸽消瘦、突然死亡,病程长达3个月,累计死亡率15%,给养鸽业造成了严重的经济损失。在信鸽公棚,主要是5-6月龄信鸽发病,病程较短,表现为采食量下降,死亡率10%-13%,严重影响信鸽的比赛成绩。经病理剖检、组织病理学、电镜观察和病原核酸检测等方法综合诊断为鸽腺病毒A型感染。 杨志远 周雨婷 林健 黄程 高洁 段会娟 程水生 赵际成 罗伟珏 刘月焕关键词:组织病理学 种鸽 家禽产业 信鸽 养鸽业 腺病毒 一株H3N8亚型马流感病毒的鉴定及HA基因序列分析 被引量:3 2018年 2016年4月北京某马场出现马流感疑似疫情,为确诊病原,从发病马群中采集鼻拭子接种鸡胚分离病毒,并进行血凝试验和血凝抑制试验、基因测序和BLAST比对分析。结果表明,从鼻拭子中分离到1株马流感病毒,命名为A/equine/Beijing/2016。血凝试验、血凝抑制试验及测序结果表明,该分离株为H3N8亚型。对分离株的HA基因进行遗传进化分析,表明该分离株属于H3N8亚型美洲谱系的佛罗里达Ⅱ群。对该分离株及国内近年来的马流感病毒分离株的HA氨基酸序列进行分析,发现该分离株相比于OIE推荐的疫苗候选株出现了一个重要的抗原漂移。马流感病毒HA基因的不断变异,提示有必要加强对国内马流感病毒的流行病学监测。 王小蕾 段会娟 杨志远 刘立新 赵际成 潘洁 刘月焕 林健关键词:HA基因 两种佐剂在H9N2亚型禽流感灭活疫苗中的效果比较 被引量:2 2020年 为提高H9N2亚型禽流感灭活疫苗的免疫效力,拟从Carbigen和Marcol-52两种佐剂中选择一种适合的疫苗佐剂。利用两种佐剂分别制备H9N2亚型禽流感灭活疫苗,通过SPF鸡免疫后7、14、21、24 d的抗体水平、黏膜系统SIgA含量及攻毒保护率三个方面,对Carbigen和Marcol-52佐剂进行探讨。结果显示,Carbigen佐剂和Marcol-52佐剂疫苗均可以刺激机体产生呼吸道黏膜SIgA和血清抗体。在免疫后第7天至第21天,Carbigen佐剂疫苗组血清抗体水平均高于Marcol-52佐剂疫苗组;Carbigen佐剂疫苗组SIgA产生早于Marcol-52,在第14天Carbigen佐剂疫苗组SIgA含量明显高于Marcol-52佐剂疫苗组(P<0.05),产生SIgA主要部位位于气管叉和肺脏;Carbigen佐剂疫苗组攻毒后的保护率高于Marcol-52佐剂疫苗组。Carbigen佐剂配置的疫苗可刺激接种动物快速产生免疫应答反应,其效果优于Marcol-52佐剂,有望成为H9N2灭活疫苗的候选佐剂。 齐志涛 程慧敏 杨志远 林健 王小蕾 刘立新 赵际成 潘洁 段会娟关键词:禽流感 H9N2 灭活疫苗 SIGA 鸽副黏病毒灭活疫苗候选株aYQ的生物学特性研究 被引量:2 2019年 评价鸽副黏病毒(PPMV)致弱毒株aYQ的生物学特性,为研制鸽副黏病毒灭活疫苗奠定基础。将PPMV aYQ株经SPF鸡胚连续传代,建立种子批。测定各代次毒种的血凝效价(HA)和鸡胚半数感染量(EID50),并进行纯净性检验;测定毒种鸡胚最小致死量的平均死亡时间(MDT)、1日龄鸡脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI);测定毒种对鸡胚和鸽的毒力、遗传稳定性和抗原相关性。PPMV aYQ株经SPF鸡胚传代至F10,HA效价为1∶256~1∶512,病毒含量为10-8.5 EID50/0.1mL~10-8.9 EID50/0.1mL,毒种各代次均无细菌、霉菌、支原体以及外源病毒污染;PPMV aYQ株的ICPI和IVPI结果均为0,MDT测定结果大于120h;以103倍稀释的PPMV aYQ株病毒液接种10日龄SPF鸡胚96h无死亡,无眼观病变。以106EID50/羽的剂量人工感染鸽,未见异常症状;PPMV aYQ株各代次F基因均未发生基因突变,F蛋白裂解位点氨基酸序列均为-112GRQGRL 117-;交叉血凝抑制试验和交叉中和试验结果表明,PPMV aYQ株与NDV La Sota株间存在明显的抗原性差异。鸽副黏病毒弱毒株aYQ能够在SPF鸡胚上稳定传代,且生物学特性稳定,免疫原性良好,可以作为鸽源副黏病毒灭活疫苗的毒种。 赵文奇 杨志远 林健 陈光华 杨龙峰 赵际成 段会娟 丁国杰 马会籽 王小蕾 刘立新 田方杰 潘洁 程水生 孙晔 蒋桃珍 刘月焕关键词:疫苗 毒种 生物学特性 鸡对鸭出血性卵巢炎病毒(黄病毒)易感性的研究 目的为了解鸡对鸭出血性卵巢炎病毒(黄病毒)的易感性及发病特点。方法以每只约10个ELD的剂量经滴鼻、口服或肌肉注射途径分别感染30只21日龄雏鸡、18只175日龄SPF鸡、15只300日龄SPF产蛋鸡及8只70日龄樱桃谷... 林健 韩春华 刘月焕 杨志远 赵际成 段会娟 谢佳 潘洁关键词:黄病毒 易感性 文献传递