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梁兆端

作品数：1 被引量：1H指数：1
供职机构：中山大学中山医学院免疫学教研室更多>>
发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇调控蛋白
  • 1篇双链
  • 1篇双链RNA
  • 1篇亲和
  • 1篇固有免疫
  • 1篇PKR
  • 1篇串联亲和纯化
  • 1篇纯化

机构

  • 1篇中山大学

作者

  • 1篇谢炯
  • 1篇吴思宇
  • 1篇黄曦
  • 1篇李玉叶
  • 1篇何军芳
  • 1篇梁兆端
  • 1篇吴敏昊
  • 1篇张萍

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
固有免疫调控蛋白PKR串联亲和纯化系统的建立及应用被引量：1
2011年
目的构建固有免疫调控蛋白——双链RNA（dsRNA）调控的蛋白激酶（PKR）的串联亲和纯化系统（TAP），初步研究PKR蛋白功能，以用于与PKR相互作用的新蛋白的鉴定与功能分析。方法通过PCR扩增PKR目的基因，克隆至真核表达载体pcTAP—A中。将重组质粒pcTAP-PKR通过脂质体法转染PKR稳定沉默（PKRkd）的HeLa细胞，并检测PKR对固有免疫信号通路之一，即促分裂素原活化蛋白激酶（MAPK）激活的调控；最后利用串联亲和纯化试剂盒纯化分离与PKR相互作用的蛋白，验证PKR蛋白复合物的纯化情况。结果将重组质粒pcTAP-PKR转染PKRkd HeLa细胞后，24h后即可检测到PKR融合蛋白，相对分子质量约为75×10^3，其表达量随着转染时间的增加而减少；PKR的过表达可发生自我磷酸化，并引起了MAPK信号通路的激活；Westernblot结果显示，小规模TAP纯化试验成功分离纯化了PKR蛋白。结论成功建立了一个PKR表达和串联亲和纯化系统，并证明PKR具有调控MAPK信号通路活性，为今后鉴定与PKR相互作用的蛋白研究奠定了基础。
李玉叶梁兆端吴思宇谢炯何军芳吴敏昊黄曦张萍
关键词：双链RNA亲和纯化
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