梅高尚
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：集美大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划福建省科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 坛紫菜孢子体世代及配子体世代间microRNA差异表达谱的初步研究
- 梅高尚
- 坛紫菜叶状体RNA提取方法的改良与比较
- 2010年
- 为提取高质量的坛紫菜叶状体总RNA,对常用的几种植物RNA提取方法(CTAB法、SDS法、异硫氰酸胍法)按照去除多糖、多酚的方法进行了改良,并对分离的总RNA根据吸光值、电泳图谱及RT-PCR检测等结果与两种试剂盒(离心柱试剂盒法,RNAiso法)的提取结果进行了比较。结果表明,SDS法、异硫氰酸胍法和RNAiso法3种方法提取的RNA纯度低,质量差,部分RNA已经发生了降解。而改良CTAB法和离心柱试剂盒法提取的总RNA质量可靠,完整性好,纯度高,并且成功去除了可能影响逆转录酶活性的物质,可以进一步应用于cDNA文库构建,基因表达分析等后续实验,但这两种方法各有优缺点,应根据实际情况选用合适方法进行坛紫菜叶状体总RNA的分离。
- 谢潮添梅高尚陈昌生纪德华
- 关键词：坛紫菜叶状体RNA提取
- 坛紫菜核糖体蛋白S15a基因的克隆及高温胁迫表达分析被引量：4
- 2012年
- 坛紫菜栽培中经常遭遇高温胁迫危害而产生烂菜现象,为研究坛紫菜在高温胁迫条件下的分子应答机制,分离并克隆高温胁迫应答的相关基因,应用引物退火控制（ACP）技术对耐高温型纯系Z-61叶状体在高温胁迫条件下的差异表达基因进行筛选时,获得一条在高温胁迫条件下表达水平显著降低的基因片段,通过5′-RACE技术获得了它的全长,命名为Phrps15a（GenBank登录号：JN991055.1）。该基因序列全长676 bp,包含一个390 bp的开放阅读框编码130个氨基酸的核糖体S15a蛋白（PhRPS15a）,蛋白分子式为C664H1066N188O180S7,由3条螺旋、7个片层及8个环状连接组成,与多个物种的RPS15a蛋白具有较高的序列一致性（78%~80%）。系统进化分析表明,动物、高等植物、绿藻和坛紫菜PhRPS15a蛋白均享有独立的进化分支,但坛紫菜PhRPS15a蛋白与团藻和莱茵衣藻的亲缘关系更近。实时荧光定量PCR分析结果表明,Phrps15a基因的表达水平与高温胁迫密切相关,在高温胁迫条件下,Phrps15a基因的表达水平极显著下调。
- 梅高尚纪德华李兵徐燕陈昌生谢潮添
- 关键词：坛紫菜高温胁迫克隆
