洪小伟
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：浙江大学宁波理工学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 一种与抗生素调控基因afsk高度同源的新基因——Spy1的克隆被引量：1
- 2009年
- 普那霉素是由始旋链霉菌产生的一种链阳性菌素类抗生素.目前国外对普那霉素的基因工程研究甚少,国内尚属空白,这阻碍了利用基因工程的方法来提高普那霉素产量的发展.本文通过对普那霉素产生菌——始旋链霉菌柯斯基因组文库的构建和菌落原位杂交,筛选出了与普那霉素高产密切相关的新基因所在的柯斯质粒,并通过酶切分析和Southern杂交确定了该基因所在的酶切片段,对酶切片段进行亚克隆测序,获得了与天蓝色链霉菌中抗生素调控基因afsk同源新基因的全长克隆,该新基因包含有1个2 127 bp的开放阅读框(ORF),编码708个氨基酸的蛋白,命名为Spy1.对该新基因的生物信息学初步分析表明,该基因编码的是丝/苏氨酸蛋白激酶.
- 洪小伟金志华金庆超郑喜黄柯梅乐和
- 关键词：普那霉素SOUTHERN杂交
- 新型基因敲除技术筛选普那霉素单组分突变株
- 金庆超张丽靖尹华立洪小伟李宁慧金志华
- 抗生素的质量控制不仅对人类用药安全具有重要意义,对抗生素的生产和研发更具有不可估量的价值.微生物所产抗生素多是由多种组分组成的,不同组分通常具有不同的生物学活性或毒性作用.如何提高多组分抗生素中有效成分的含量是保证其临床...
- 关键词：
- 关键词：普那霉素抗生素
- 谷氨酰胺转胺酶基因的融合表达被引量：3
- 2010年
- 运用基因工程手段在大肠杆菌中高效表达谷氨酰胺转胺酶基因。以茂原链霉菌基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到一条长为1224bp的谷氨酰胺转胺酶基因片段,成功构建原核表达载体pGEX-TGase,并转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组菌BL21/pGEX-TGase。重组菌经IPTG诱导产生GST-TGase融合蛋白,并对表达条件进行了优化,应用亲和层析方法纯化融合蛋白,对纯化产物进行SDS-PAGE电泳分析,结果显示目的蛋白获得了较高水平的表达。
- 黄柯金志华金庆超洪小伟郑喜
- 关键词：谷氨酰胺转胺酶融合蛋白
