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王俊伟

作品数:5 被引量:5H指数:2
供职机构:广东药学院生命科学与生物制药学院更多>>
发文基金:博士科研启动基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 4篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 5篇细胞
  • 2篇逆转
  • 2篇逆转录
  • 2篇逆转录病毒
  • 2篇重组腺病毒
  • 2篇转录
  • 2篇细胞作用
  • 2篇腺病
  • 2篇腺病毒
  • 2篇宫颈
  • 2篇宫颈癌
  • 2篇共表达
  • 2篇TCR
  • 2篇TCRVΒ
  • 2篇HELA细胞
  • 2篇病毒载体
  • 1篇真核
  • 1篇杀伤
  • 1篇受体
  • 1篇逆转录病毒载...

机构

  • 4篇广东药学院
  • 2篇深圳北京大学...
  • 1篇内蒙古医学院
  • 1篇广东药科大学

作者

  • 5篇王俊伟
  • 4篇牟艳芳
  • 4篇张巨峰
  • 3篇黄树林
  • 3篇张文峰
  • 2篇邵红伟
  • 2篇陈艳娜
  • 1篇张超
  • 1篇万峻
  • 1篇樊东升
  • 1篇卢彦欣

传媒

  • 3篇现代生物医学...
  • 1篇中国病理生理...

年份

  • 2篇2010
  • 3篇2008
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
人IL-12重组逆转录病毒载体在HeLa细胞中的表达
2010年
目的:包装携带人白细胞介素12(IL-12)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究。方法:携带IL-12的逆转录病毒重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装,G418筛选,在NIH3T3细胞进行病毒滴度测定。然后用病毒感染人宫颈癌细胞HeLa。PCR、RT-PCR方法检测IL-12基因在HeLa中的整合和表达情况。结果:重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装后收获病毒上清,感染HeLa细胞,检测发现IL-12基因整合到细胞基因组DNA中,并且能有效的转录。结论:成功包装了携带IL-12基因的逆转录病毒,该病毒能有效感染HeLa细胞,并使携带的基因IL-12在细胞中表达,为今后IL-12基因治疗宫颈癌的研究奠定基础。
张巨峰陈艳娜张文峰王俊伟牟艳芳黄树林
关键词:IL-12基因逆转录病毒宫颈癌
共表达TCRα12-2和TCRVβ7.1重组腺病毒载体的构建及其杀伤肝癌细胞作用的研究
目的:研究双表达TCRα12-2和TCRVβ7.1基因的重组腺病毒载体感染的PBMC对肝癌细胞的杀伤作用,为以后的TCR抗肿瘤研究奠定基础。 方法:主要包括三方面:一、腺病毒穿梭质粒pDC315-TCRα12-...
王俊伟
关键词:TCR重组腺病毒载体
文献传递
共表达TcRα12-2和TCRVβ7.1重组腺病毒载体的构建及其杀伤肝癌细胞作用的研究被引量:2
2008年
目的:构建共表达TCRα12-2和TCRVβ7.1重组腺病毒载体Ad.TCRα12.2-IRES-Vβ7.1,并研究其杀伤肝癌细胞的作用。方法:提取外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)总RNA,用RT-PCR的方法得到TCRα12-2基因。TCRVβ7.1基因由pCDN3.1-Vβ7.1扩增获得,将这两个基因以IRES相连克隆入腺病毒穿梭质粒pDC315中。穿梭质粒和腺病毒骨架质粒共转染HEK293细胞,包装出可同时表达TCRα12-2和TCRVβ7.1的重组腺病毒。然后提取病毒基因组DNA,对外源目的基因进行PCR鉴定;病毒感染宫颈癌细胞(HELA),48小时后提取细胞总RNA,通过RT-PCR鉴定目的基因表达;最后病毒感染PBMC,用流式细胞仪检测目的蛋白的表达。对鉴定正确的病毒进行大量扩增并测定滴度。用MTT比色法检测Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1感染的PBMC对肝癌细胞HEPG2和BEL-7402的杀伤作用。结果:从重组病毒基因组中扩增出目的基因TCRα12-2和TCRVβ7.1,RT-PCR和流式细胞仪检测表明目的基因可以有效的表达。Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1感染PBMC组对肿瘤细胞的杀伤率明显高于PBMC组和Ad-GFP感染组。结论:成功构建了双表达TCRα12-2和TCRVβ7.1基因的重组腺病毒载体Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1,且其感染后的PBMC可有效的杀伤肝癌细胞。
王俊伟张巨峰张文峰牟艳芳邵红伟黄树林
关键词:TCR
携带HSV-1TK基因的逆转录病毒载体构建及在HeLa细胞中的表达被引量:1
2010年
目的:构建携带单纯疱疹病毒脱氧胸腺嘧啶激酶基因(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究。方法:用限制性内切酶从质粒pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z-TK切下HSV-1TK cDNA序列,亚克隆入逆转录病毒载体pLXSN得到重组质粒pLXSN-TK,鉴定正确的阳性重组质粒经PA317细胞包装,G418筛选,在NIH3T3细胞进行病毒滴度测定。然后用病毒感染人宫颈癌细胞HeLa。PCR、RT-PCR和Western blotting方法检测HSV-1TK基因在HeLa中的整合和表达情况。结果:重组质粒pLXSN-TK经PA317细胞包装后收获病毒上清,感染HeLa细胞,检测发现HSV-1TK基因整合到细胞基因组DNA中,并且能有效的转录和翻译。结论:成功构建了逆转录病毒pLXSN-TK,该病毒能有效感染HeLa细胞,并使携带的治疗基因HSV-1TK在细胞中表达,为今后HSV-1TK基因治疗宫颈癌的研究奠定基础。
张巨峰樊东升张超卢彦欣王俊伟牟艳芳陈艳娜万峻
关键词:逆转录病毒宫颈癌
人TCA-12-2/TCB-7.1真核双表达载体的构建与表达被引量:2
2008年
目的:将T细胞抗原受体基因TCA-12-2和TCB-7.1共同构建在真核表达载体pDC315,用于哺乳动物细胞293转染研究。方法:将分离得到的淋巴细胞总RNA反转录合成cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到TCA-12-2基因;以实验室保存含TCB-7.1基因的质粒为模板,扩增得到TCB-7.1基因。随后酶切,连入载体pIRES2-AcGFP1,通过亚克隆连入载体pDC315,得到重组质粒pDC315-TCA-12-2-TCB-7.1。重组体质粒经酶切鉴定后,并对插入的TCA-12-2和TCB-7.1基因片段进行测序,将鉴定好的阳性重组质粒用脂质体介导转染293细胞,并通过RT-PCR和流式细胞仪检测TCA-12-2和TCB-7.1基因的表达情况。结果:TCA-12-2和TCB-7.1可以同时构建在载体pDC315上,RT-PCR和流式细胞仪检测发现TCA-12-2和TCB-7.1基因可以成功在293细胞上表达。结论:成功构建了含TCA-12-2和TCB-7.1基因的双表达载体。
张文峰张巨峰邵红伟王俊伟牟艳芳黄树林
关键词:受体抗原T细胞
共1页<1>
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