田丹
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省卫生厅科研项目黑龙江省博士后科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Ⅰ型人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白CD4结合位点修饰诱导小鼠体液免疫反应的实验研究
- 2015年
- 目的 探讨Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）包膜糖蛋白（Env） gp120的CD4结合位点（CD4BS）核心区第423、425和431位氨基酸三联突变ING/MKE对其诱导体液免疫反应的影响.方法 构建HIV-1原代毒株06044包膜gp120 ING/MKE三联突变表达载体pcT22-06044 gp120T-ING/MKE（gp120T-ING/MKE）,在体外转染的HEK293T细胞表达三聚化野生型gp120Twt蛋白和突变体gp120T-ING/MKE蛋白.免疫BALB/c小鼠后检测结合抗体、中和抗体和骨髓抗原特异性浆细胞.结果 获得真核表达载体gp120T-ING/MKE.转染后,在293T细胞培养上清中检测到了三聚化重组蛋白.末次免疫后14 d,gp120Twt和gp120T-ING/MKE免疫血清中结合抗体滴度都大于1∶1 000,但两组血清抗体滴度无显著差异.突变体组骨髓特异性浆细胞分泌水平和非特异浆细胞水平均低于野生型gp120免疫组.野生型和突变体免疫诱导血清抗体的中和活性均不强.结论 HIV-1包膜蛋白CD4结合区423、425和431位三联突变没有改善gp120蛋白的免疫原性.
- 郭彩霞王甲业于昊彤田丹庄敏凌虹
- 关键词：人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白免疫原性
- 原代HIV-1包膜糖蛋白修饰体诱导小鼠产生高滴度gp120抗体被引量：4
- 2011年
- 目的探索1型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）包膜糖蛋白修饰对包膜免疫原性的的影响。方法通过PCR扩增获得原代HIV-106044株包膜gp120基因及其突变体gp120／W427S基因，并构建gp120三聚体蛋白真核表达载体pcT—gp120和pcT—gp120／W427S，重组表达载体体外瞬时转染人胚肾HEK293T细胞，表达gp120三聚体蛋白。采取DNA初免-蛋白凝胶加强的策略免疫BALB／c小鼠，末次免疫后10d检测免疫血清中结合抗体的水平。结果获得真核表达载体pcT—gp120和pcT—gp120／W427S及gp120三聚体蛋白；末次免疫后10d，gp120免疫血清中结合抗体滴度大于1：1000，gp120／W427S免疫血清中结合抗体滴度大于1：10000，而且，gp120／W427S免疫组血清抗体结合活性显著高于gp120免疫组血清。结论HIV-1包膜第427位色氨酸突变为丝氨酸，改善了包膜的免疫原性，为包膜免疫原的设计和优化提供了新的线索。
- 凌虹王甲业王开利李妍陈文江杨丹田丹焦娜周海舟
- 关键词：GP120BALB/C小鼠
- Ⅰ型人类免疫缺陷病毒包膜gp120与乙型肝炎病毒表面抗原免疫原性比较被引量：1
- 2016年
- 目的 比较Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）及乙型肝炎病毒（HBV）包膜蛋白初次免疫及加强免疫后诱导产生抗体的规律,为提高HIV-1包膜蛋白诱导保护性抗体产生能力提供创新思路.方法 以10周龄雌性C57BL/6小鼠为动物模型,分别用HIV-1 06044毒株gp120三聚体（gp120T）、HBV表面抗原（HBsAg）蛋白与AddaVax佐剂免疫小鼠,背部皮下注射,共免疫3次,每次免疫间隔3周,第一、第二次免疫后7d和第三次免疫后3d、7d取血;第一次免疫后7d、第三次免疫后3d、7d取脾组织.用酶联免疫吸附实验（ELISA）及酶联免疫斑点实验（ELISpot）方法检测免疫小鼠血浆特异性结合抗体滴度及抗体分泌细胞（ASC）数量.结果 gp120T和HBsAg两种蛋白初次免疫后,动物均未产生明显的特异性抗体.两种蛋白加强免疫后特异性抗体水平明显升高,gp120T一次加强免疫及两次加强特异性抗体滴度逐渐升高,而HBsAg一次加强抗体滴度已经接近两次加强的水平.二次加强免疫后,gp120T和HBsAg免疫鼠脾脏特异性ASC数量差异不显著.结论 HIV-1包膜gp120T加强免疫诱导抗体水平达到高峰慢于HBsAg加强免疫,即加强免疫后gp120T诱导的回忆反应慢于HBsAg.
- 王明霞王甲业李妍陈文江田丹袁丽庄敏凌虹
- 关键词：GP120乙型肝炎病毒表面抗原
