纪耀坤
- 作品数：21 被引量：25H指数：3
- 供职机构：商丘职业技术学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学理学环境科学与工程文化科学更多>>
- T_(1083)替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-TS的构建(摘要)(英文)被引量：2
- 2010年
- [目的]扩增烟草NtKRP基因尾部含T1083替换的片段,将其克隆入pGBKT7载体中。[方法]以pBI121KE质粒为模板进行PCR反应,将得到的PCR产物凝胶回收后等摩尔混合,取适量作为模板,得到含定点突变的尾部片段。将该PCR产物克隆入SmaI线性化的pUC19载体,构建含T1083替换的重组子pUC19Ts。通过蓝白斑筛选得到的重组子进行BamHI -SmaI双酶切鉴定,将筛选出的正确重组子送交联合基因测序。将pGBKT7和测序正确的pUC19Ts质粒均用BamHI -SmaI双酶切,分别回收1 320 bp的融合片段和7.3 kb的载体片段进行连接,转化并筛选得到重组子,任意挑取2个单菌培养后提取质粒进行BamHI -SmaI双酶切鉴定。[结果]成功构建了NtKRP尾部含T1083替换的BD融合质粒载体pGBKT7-TS。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。
- 纪耀坤张伟彬袁亮
- T_(1083)替换融合质粒载体pGBKT7-T_S转入酵母的自激活试验(摘要)(英文)被引量：3
- 2010年
- [目的]研究T1083替换融合质粒载体pGBKT7-Ts转入酵母的自激活实验,探讨其表达产物是否可作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[方法]将T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母后,进行自激活和蛋白表达毒性检测试验。pGBKT7-TS对报告基因自主激活的检测。将pGBKT7-TS质粒转染S.cerevisiae strainAH109和S.cerevisiaeY187菌株,同时分别转入pGBKT7作为对照,在SD-Trp平板上挑取转化菌落,悬于适量无菌水中,再分别接种于SD-Trp +X-α-gal、SD-Trp-His +X-α-gal、SD-Trp-Ade +X-α-gal和SD-Trp-Ade-His +X-α-gal平板。30℃培养2 ～3 d,观察各平板菌落颜色。确定含有pGBKT7-TS质粒的AH109和Y187酵母细胞内HIS、ADE、Mel1、LacZ报告基因的表达情况。pGBKT7-TS对酵母AH109和Y187的毒性检测、挑取大于2 mm的pGBKT7-TS转化的AH109克隆和pGBKT7-TS转化的Y187克隆各1个,分别接种于50 ml SD/-Trp+Kan(20μg/ml)培养基中,30℃、250 r/min培养16 h,检测OD600,若OD600<0.8,则DNA-BD可能有毒性;若OD600≥0.8,说明DNA-BD无毒性。[结果]转化pGBKT7-TS的酵母菌AH109在SD-Trp +X-α-gal平板和SD-Trp-His +X-α-gal平板上均可长出菌落,但在SD-Trp-Ade +X-α-gal平板和SD-Trp-Ade-His+X-α-gal平板上均无菌落生长,表明转入pGBKT7-TS后His报告基因有泄漏表达,但不能激活ADE和MELI报告基因。毒性检测试验中,重复2次,其OD600均大于0.8,说明DNA-BD融合蛋白对酵母AH109和Y187的生长无毒性,可以作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了试验基础。
- 袁亮纪耀坤张伟彬
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活作用
- 不同用量缓释肥对麦茬花生生长发育及养分利用的影响被引量：2
- 2022年
- 为了明确麦茬花生缓释肥适宜用量,设不施肥(CK)、普通化肥(CF)、缓释肥(SRF)、缓释肥减量10%(SRF0.9)和缓释肥减量20%(SRF0.8)5个处理,研究不同用量缓释肥对麦茬花生生长发育及养分利用的影响。结果表明:与施用等量普通化肥(CF)相比,缓释肥(SRF)可显著增加麦茬花生中后期叶片NR活性、根系活力、单株结果数、百果重、百仁重和出仁率,显著提高荚果和籽仁产量。缓释肥减量10%(SRF0.9)生长指标及产量表现均高于普通化肥(CF),但差异不显著。缓释肥减量20%(SRF0.8),各项生理生长指标及产量均低于普通化肥处理CF,但差异不显著。缓释肥可显著提高氮磷钾当季利用率、氮肥偏生产力、氮肥农学效率。夺取高产,可以优先选用缓释肥SRF的施肥量;减肥增效,可以优先选用缓释肥SRF0.9的施肥量。
- 纪耀坤郭振升田伟张慎举皇甫自起吴继华
- 关键词：缓释肥根系活力肥料利用率
- 开花期灌水对小麦减氮增效的潜力及氮高效利用机制研究
- 2022年
- 为了探明灌开花水对小麦减氮增效的潜力及氮高效利用机制,以商麦178为试验材料,试验采用二因素裂区设计,主区为灌水(W1表示灌拔节期和开花期水、W2表示灌拔节期水);副区为施氮量,设置施氮量为0kg/hm^(2)(N0,不施氮)、150kg/hm^(2)(N150,减氮40%)、200kg/hm^(2)(N200,减氮20%)、250kg/hm^(2)(N250)4个水平,研究灌水与施氮量对小麦氮素转运积累、净光合速率、冠层光截获和产量的影响。结果表明:开花后小麦植株和籽粒氮素积累不同时段差异明显,7d与14d的W2>W1,21~35d的W1显著增加更有利于氮素积累,而成熟期W1N200籽粒氮素积累量最多。开花后籽粒灌浆速率先升高后降低,14~21d达到峰值,之后逐渐下降。开花后灌浆速率与花后氮素积累变化趋势一致。W1N200的营养器官氮素转移量最多,进一步说明了水氮运筹对小麦增产的重要性。开花7~28d的旗叶净光合速率W1N200、W2N250显著高于其他处理,因此,旗叶净光合速率的高低可以作为判断灌水和施氮量对小麦增产作用机理的一项重要指标。开花0~28d均表现为W1N200最高,W2N250、W1N250次之,并随着时间推移灌水和施氮量对有效光截获影响逐渐增加,在28d时差值最大,因此,有效光截获可以作为反映灌水和施氮量对小麦增产作用机理的重要指标。W1和W2穗数与施氮量成正比,穗粒数变化不显著,W1千粒质量先增后降,W2处理呈现递增的情况;最终籽粒产量W1N200、W2N250表现最好,W1N200略高,其他各处理间差异均达到显著水平(P<005),商麦178在W1N200(减氮20%)处理下获得了最高产量,说明灌开花水能够提升氮肥利用效率,较常规施氮节约施氮20%的情况下提升产量,从而获得减氮增效的最大潜力。
- 纪耀坤孟自力高磊
- 关键词：开花期灌水小麦氮高效
- 轻度盐碱地改良菌剂的制备方法
- 本发明提供一种轻度盐碱地改良菌剂的制备方法，包括：S1、取厨余垃圾堆肥样品并培养、收集、稀释得悬浮菌液；S2、取悬浮菌液并涂布至初次筛选培养基上，保温振荡培养后，分离固氮菌并接种至培养基表面，得初步筛选菌种；S3、取初步...
- 袁亮张伟彬乔梅杨铭纪耀坤
- 文献传递
- 一种微生物复合菌剂及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种微生物复合菌剂，其制备原料由以下重量份数的组分组成：枯草芽孢杆菌发酵菌液30‑50份、蕈状芽孢杆菌发酵菌液20‑30份、珊瑚色诺卡式菌发酵菌液10‑20份、功能菌剂10‑20份、载体60‑80份。此外，本...
- 袁亮张伟彬乔梅梁娜纪耀坤刘传奇郭秀英董红霞刘素环赵耀东
- 文献传递
- 不同种类缓/控释肥料对麦套花生产量和品质的影响被引量：5
- 2021年
- 为了筛选适合麦套花生应用的缓/控释肥料,选用金正大控释掺混肥(处理1)、史丹利缓释肥料(处理2)、红四方缓释掺混肥料(处理3)、司尔特长效缓释肥(处理4)、土肥收控释肥(处理5)、心连心水触膜控释放复合肥(处理6)6种缓/控释肥料,同时设置史丹利普通复混肥(处理7)和对照(处理8,不施肥),在大田等量施肥条件下,研究不同种类缓/控释肥料对麦套花生产量和品质的影响。结果表明,随着生育时期的推进,麦套花生叶面积指数均呈现先升高后降低的变化趋势,且在结荚期(8月8日前后)达到峰值,其中以处理1、2较大,处理3、6次之。随着生育时期的推进,麦套花生干物质积累量均呈现逐渐上升的变化趋势,处理1—6干物质积累量均显著高于对照。处理1—6的荚果产量、籽仁产量、单株饱果数、百果质量、百仁质量和出仁率均高于处理7和对照,且以处理1和处理2表现较优,荚果产量和籽仁产量较处理7分别增加13.65%、12.66%和19.15%、17.79%,处理6、3次之。处理1—6的籽粒蛋白质、粗脂肪、油酸、可溶性糖含量和油酸/亚油酸均高于处理7和对照,其中处理1和处理2表现较优,较处理7分别增加9.59%、2.25%、6.77%、6.59%、11.08%和8.52%、2.11%、6.10%、6.08%、9.90%,处理6、3次之;对照籽仁亚油酸含量均高于其他处理,处理7次之,处理1最小。可见,与施用等量普通复混肥、不施肥相比,施用缓/控释复合肥可显著增加麦套花生收获期叶面积指数、干物质积累量,显著增加麦套花生单产,改善花生品质,且以处理1(金正大控释掺混肥)、处理2(史丹利缓释肥料)效果较好,其次为处理3(红四方缓释掺混肥料)、处理6(心连心水触膜控释放复合肥)。
- 纪耀坤郭振升田伟张慎举皇甫自起吴继华
- 关键词：麦套花生叶面积指数干物质
- 灰色综合评判法在夏大豆新品种评价中的应用被引量：2
- 2012年
- 应用灰色综合评判法,对2010年国家黄淮海夏大豆品种区试南B组试验结果进行分析,综合11个较为重要的性状指标,对16个参试品种的表现进行综合评估,为夏大豆新品种选育与合理利用提供一种新的较为全面的量化分析方法,弥补了经典鉴定方法的不足。
- 郭振升纪耀坤侯乐新
- 关键词：夏大豆
- T_(1083)替换融合质粒载体pGBKT7-T_S转入酵母的自激活实验被引量：1
- 2010年
- [目的]研究T1083替换融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母的自激活实验,探讨其表达产物是否可作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[方法]将T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母后,进行自激活和蛋白表达毒性检测试验。[结果]该片段表达产物无自激活特性且对酵母细胞无毒性,可以作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。
- 袁亮纪耀坤张伟彬
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活作用
- T_(1083)替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-Ts的构建
- 2010年
- [目的]构建T1083替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-Ts。[方法]以pBI121KE质粒为模板,通过重叠PCR扩增烟草NtKRP基因尾部含T1083替换的片段,将其克隆入pGBKT7载体。[结果]成功构建了T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-Ts。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。
- 纪耀坤张伟彬袁亮
