罗树红
- 作品数：109 被引量：219H指数：9
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 编码弓形虫ROP1蛋白基因的体外扩增、克隆及在E.coli中的表达被引量：11
- 1999年
- 目的构建弓形虫棒状体蛋白（ＲＯＰ１）基因重组质粒并在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达。方法用ＲＨ株接种小鼠，收集腹水，纯化速殖子，抽提基因组ＤＮＡ；据ＲＯＰ１基因序列设计合成一对引物，将上、下游引物分别引入ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ酶切位点，用ＰＣＲ技术从ＲＨ株基因组ＤＮＡ中扩增编码ＲＯＰ１的基因片段，插入ｐＢＶ２２０质粒，转化大肠杆菌ＤＨ５α感受态细胞，于氨苄阳性ＬＢ培养平板上筛选阳性克隆，酶切鉴定；经温度诱导在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及免疫印迹分析。结果ＲＯＰ１基因体外扩增产物大小与预期值相符，约７５６ｂｐ；构建成功ｐＢＶ２２０－ＲＯＰ１重组质粒；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫印迹显示特异蛋白条带的分子量约４３ｋＤ，表达产量约占菌体蛋白１３．２３％。结论从弓形虫基因组ＤＮＡ中获取ＲＯＰ１基因，并成功构建ｐＢＶ２２０－ＲＯＰ１重组质粒，诱导表达ＲＯＰ１非融合蛋白，为进一步分离纯化、用于对弓形虫侵入机制及免疫特性的研究做好准备。
- 郭虹陈观今刘彦文郑焕钦罗树红
- 关键词：弓形体基因克隆基因重组
- 人酪氨酸蛋白激酶Lyn的真核表达、纯化及鉴定被引量：1
- 2016年
- [目的]构建含人酪氨酸蛋白激酶Lyn基因的载体并进行真核表达、纯化和研究其对细胞增殖的影响。[方法]提取人Hela细胞总RNA,用RT-PCR方法获得Lyn基因并克隆至pcDNA3.1(-)载体。经双酶切、PCR和测序方法鉴定后,将重组质粒瞬时转染HEK 293T细胞表达目的蛋白,应用组氨酸标签镍离子螯合磁珠纯化融合蛋白,通过Western Blot检测蛋白的表达及纯化,并用CCK-8法检测过表达Lyn后细胞增殖能力的变化。[结果]成功构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)-Lyn并进行瞬时表达和蛋白纯化,CCK-8法检测过表达Lyn的HEK 293T细胞的增殖能力显著性下降(P<0.01)。[结论]Lyn在HEK 293T细胞中成功瞬时表达及纯化,并可以使细胞的增殖能力受到明显抑制,为稳定表达和深入研究其生物学功能及作用机制奠定基础。
- 张佳凤郝文波熊玉锋徐岚庄斯慧罗树红
- 关键词：真核表达蛋白纯化细胞增殖
- 疟疾疫苗及其保护性研究进展
- 1996年
- 疟疾疫苗及其保护性研究进展罗树红综述，余新炳，陈观今审核据ＷＨＯ最新统计［１］；疟疾流行于１４０个国家和地区，全世界约４０％的人口受到威胁，年发病人数３－５亿，死亡人数１５０－２７０万，其中７０％以上是由Ｐ。ｆ所引起，其主要原因是由于疟原虫抗药性和蚊...
- 罗树红
- 关键词：疟疾疫苗
- 恶性疟原虫疫苗研究──Ⅸ．主要裂殖子表面蛋白1C端类表皮生长因子1的体外扩增及克隆被引量：2
- 1996年
- 恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白１（ＭＳＰ１）在其分子Ｃ－端ＭＰＳ－１１９具有两个类ＥＧＦ结构，其中类ＥＧＦ－１为特异性抗体抑制疟原虫侵入红细胞的靶位之一。本文通过酚－氯仿抽提，乙醇沉淀法提取恶性疟原虫（ＦＣＣ－１ＨＮ株）基因组ＤＮＡ，再用ＰＣＲ扩增类ＥＧＦ－１基因，经酶切纯化后插入质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（＋）中，转化大肠杆菌ＤＨ５ａ，经ＰＣＲ筛选及双酶切鉴定，筛选出含类ＥＧＦ－１基因的阳性克隆子。
- 李学荣余新炳罗树红徐劲朱佩娴
- 关键词：裂殖子表面蛋白疟疾疫苗
- 恶性疟原虫传播阻断抗原的化学拼接与克隆
- 1997年
- 采用缺口填补法将恶性疟原虫有性期Pfs230和Pfs48／45抗原中的2个T细胞表位，3个B细胞表位以及人白介素-Ⅰ中的一个T细胞激活位点按预设方案，拼接成复合多价基因PfSI。复合基因全长147bP，编码43肽复合抗原，经分离、纯化后，插入质粒pcDNA3的多克隆位点，构建重组载体pcDNA3／PfSI。再将重组载体转化大肠杆菌JM109，用氨苄青霉素和PCR扩增法筛选阳性克隆，最后用限制性内切酶对阳性克隆进行鉴定。复合基因PfSI拼接、克隆的成功为在体外高效表达恶性疟原虫传播阻断抗原创造了条件。
- 罗树红余新炳徐劲陈观今
- 关键词：疟原虫恶性疟原虫克隆
- 一种弓形虫蛋白TgVP1单克隆抗体杂交瘤1D7及单克隆抗体
- 本发明公开了一种弓形虫蛋白TgVP1单克隆抗体杂交瘤1D7及单克隆抗体。本发明所述弓形虫蛋白TgVP1单克隆抗体杂交瘤1D7于2014年12月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:C2014230...
- 郝文波罗树红肖斌
- 文献传递
- 一种羊口疮病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒
- 本发明公开了一种羊口疮病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒，属于病毒的分子生物学检测技术领域。本发明的羊口疮病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒包括SEQ ID NO：1～2所示核苷酸序列的一对引物和SEQ ID NO：3所示核...
- 杜红延罗树红郝文波李明
- 文献传递
- 羊口疮病毒作为免疫调节剂在疾病治疗中的研究进展被引量：4
- 2017年
- 羊口疮病毒(ORFV),也称接触传染性脓疱皮炎病毒,为痘病毒科脊索动物痘病毒亚科副痘病毒属中的成员,是世界各地绵羊和山羊的常见病原体。ORFV可通过多种不同的策略来影响免疫细胞,进而操控宿主的免疫应答。灭活的ORFV具有免疫调节作用,可作为预防和治疗的免疫调节剂,用于感染性疾病、慢性病毒病、肿瘤、肝纤维化等的治疗。我们对ORFV在临床前期或临床治疗中的研究进展进行简要综述。
- 陈达香陈瑜郝文波肖斌罗树红
- 关键词：羊口疮病毒免疫调节疾病
- 转乙型肝炎病毒x基因肝癌细胞株的建立被引量：11
- 2000年
- 目的 建立表达转乙型肝炎病毒x基因 (HBx)的人肝癌细胞株 ,为研究HBx基因与肝癌生物学行为间的关系提供模型。方法 以聚合酶链反应 (PCR)法从 3.2kb乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组中扩增HBx基因 ,亚克隆至逆转录病毒载体 ,磷酸钙共沉淀法将其导入包装细胞系 ,以含病毒的培养上清感染人肝癌细胞系QGY770 1 ,新霉素 (G41 8)筛选 ,PCR与反转录PCR (RT PCR)鉴定。结果 PCR法从HBV基因组扩增出 51 8bp片段 ,序列分析证实其中含HBx基因全编码序列 ;用逆转录病毒将HBx基因转导QGY770 1细胞系 ,G41 8筛选 4～ 6周后出现阳性克隆株QGY/HBx ,PCR法从其基因组中鉴定出全长HBx基因整合 ,RT PCR证实细胞有HBxmRNA的稳定表达。
- 闵军陈积圣刘彦文罗树红余新炳
- 关键词：肝细胞癌乙型肝炎病毒X基因
- 恶性疟原虫海南分离株(FCC1/HN)裂殖子表面蛋白2(MSA2)真核表达载体的构建被引量：1
- 2000年
- 目的构建恶性疟原虫海南分离株（FCC1／HN）裂殖子表面蛋白MSA2的真核表达质粒pcDNA3／MSA2，为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定基础。方法采用PCR技术对FCC1／HN基因组DNAMSA2基因进行扩增，扩增产物经纯化后用BamHI和EcoRI双酶切，然后走向克隆入真核表达质粒pcDNA3，连接产物转化大肠杆菌TG1，再用相同的内切酸酶切和PCR扩增对重组子进行鉴定。结果筛选出的重组子为编码PCC1／HCMSA2基因片段的重组质粒pcDNA3／MSA2。结论编码FCC1／HNMSA2基因片段真该表达质粒pcDNA3／MSA2的构建，为疟疾核酸疫苗及蛋白疫苗的研制奠定基础。
- 刘彦文余新炳徐劲罗树红方建民张静
- 关键词：恶性疟原虫聚合酶链反应克隆疟疾疫苗
