胡思顺
- 作品数：96 被引量：177H指数：8
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划湖北省自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 禽流感病毒HA1蛋白的原核表达及其免疫原性的初步研究
- 2007年
- 从H9N2亚型禽流感病毒感染的鸡胚尿囊液中提取病毒RNA,RT-PCR克隆全长血凝素(He-magglutinin,HA)基因,并进一步克隆HA的主要抗原区HA1基因。将HA1克隆到原核表达载体pGEX-KG,与谷胱苷肽(GST)融合表达,表达的融合蛋白GST-HA1以包涵体形式存在。包涵体经变性、复性处理,Western blot分析表明,表达蛋白具有良好的免疫学活性。ELISA检测发现,GST-HA1只能与H9亚型禽流感病毒抗体发生反应,而与H5和H7亚型禽流感病毒抗体无交叉反应。进一步将纯化的融合蛋白与佐剂混合后免疫Balb/c小鼠,免疫小鼠体内产生了较高滴度的特异性抗体。制备的HA1蛋白特异性强,具有良好的免疫原性,为禽流感病毒的鉴别诊断和禽流感疫苗开发奠定了基础。
- 吴仁蔚张万坡胡思顺肖运财毕丁仁
- 关键词：禽流感病毒原核表达
- 鸡毒支原体对达氟沙星的耐药判定标准试验方法
- 本发明公开了鸡毒支原体对达氟沙星的耐药判定标准试验方法，包括以下步骤：制定达氟沙星对鸡毒支原体的野生型临界值、药效学临界值、制定达氟沙星对鸡毒支原体给药方案、制定达氟沙星对鸡毒支原体的临床临界值以及通过CLSI敏感性折点...
- 袁宗辉郝海红王淑歌黄安雄毕丁仁胡思顺王玉莲黄玲利王旭彭大鹏陈冬梅陶燕飞潘源虎谢书宇程古月瞿玮谷宇锋房诗薇戴新予黄啸郭金丽于耕涛
- 文献传递
- 一株不依赖NAD生长的副鸡禽杆菌的分离与鉴定被引量：4
- 2018年
- 为研究湖北省内鸡传染性鼻炎病原菌的特性,本研究从湖北恩施某地鸡场疑似传染性鼻炎的病鸡样品中分离获得一株疑似副鸡禽杆菌(APG)的病原菌。通过细菌的分离培养、形态观察、生化试验、革兰氏染色、动物回归试验和PCR等方法对其进行鉴定。结果显示,分离的病原菌具有APG的形态特征和生化特性;16S rRNA序列比对分析与已报道的APG相应序列同源性高于98%;另外,利用特异PCR,分别检测到p250,pA14和pYMH5等3种质粒的特异基因片段;通过培养试验,该分离株能在无NAD的TSB(含鸡血清)中生长。这是国内首次发现无需NAD且同时存在3种质粒的APG。这一的发现警示国内的APG流行情况复杂,应引起畜牧兽医工作者的注意。
- 马洪梅牛家强张海燕刘洋洋胡思顺许青荣李自力刘梅毕丁仁
- 关键词：副鸡禽杆菌NAD质粒
- 一种鸡禽流感疫苗免疫与病毒野毒感染的胶体金免疫层析快速鉴别诊断试剂盒及应用
- 本发明属于动物免疫技术领域，具体涉及一种鸡禽流感疫苗免疫与病毒野毒感染的胶体金免疫层析快速鉴别诊断试剂盒及其应用。该试剂盒包含盒体、设在盒体内的酶标板、试纸条和样品稀释液。其中的试纸条是由样品垫、吸收垫、涂覆有金标记抗鸡...
- 毕丁仁胡思顺郑兴华王喜亮张万坡肖运才刘梅李自力石德时许青荣金秀娥
- 文献传递
- 禽流感病毒单克隆抗体的制备及其抗蛋白抗原的分析被引量：2
- 2007年
- 以纯化的H9N2亚型禽流感病毒为抗原，免疫BALB／c小鼠，细胞融合后，经间接ELISA和血凝抑制试验（HI）筛选，获得了8株能稳定分泌抗禽流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。特异性试验证明，8株杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水的特异ELISA抗体效价可达113．2×10^3～1：5．1×10^4，其中2株HI效价达2^12。8株单抗与H5亚型血凝素分型抗原不发生血凝，与减蛋综合征（EDS-76）病毒、传染性支气管炎病毒（IBV）、新城疫病毒（NDV）均不反应。亚类鉴定证实，除1C7单抗为IgG2b外，其他7株均为IgG1亚类。Western blotting试验分析初步表明。8株单抗至少针对纯化病毒粒子3种不同的蛋白抗原，其中3株针对核蛋白（NP）．2株针对基质蛋白M1，2株针对血凝紊HA／HA1。对感染细胞的Western blotting分析结果与纯化病毒结果基本一致，其中1株朱明显沉淀纯化病毒粒子蛋白的单抗可以与感染细胞的M2蛋白多肽反应。
- 吴仁蔚肖运才胡思顺李自力石德时许青荣毕丁仁
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒单克隆抗体
- 鸡毒支原体和滑液囊支原体四重PCR检测方法的建立被引量：1
- 2023年
- 为建立区分MG弱毒疫苗株F株和非F株以及滑液囊支原体的方法,试验通过分析NCBI上公布的MG和MS基因序列,优选合适的基因序列设计合成了MG弱毒疫苗株F株特异性引物、非F株MG通用引物、MG通用引物以及MS通用引物,各引物扩增条带大小分别为750、585、279和421bp,建立了可以区分MG弱毒疫苗株F株与非F株以及滑液囊支原体的PCR检测方法。结果显示:各引物的特异性或通用性良好,检测限度可以达到100fg/μL。研究表明,该试验建立的四重PCR检测方法可用于MG弱毒疫苗株F株与非F株的鉴别诊断以及滑液囊支原体的检测,为该病的净化提供技术支持。
- 刘洋洋白红英胡思顺毕丁仁李自力周祖涛
- 关键词：鸡毒支原体滑液囊支原体
- 泰万菌素对鸡胚中鸡滑液支原体的抑制研究被引量：2
- 2018年
- 为了解泰万菌素对鸡滑液支原体(MS)垂直传播的抑制作用,我们测定泰万菌素对MS-HB1株的最低抑菌浓度(MIC)。结果显示,泰万菌素对MS-HB1株的MIC为0.008μg/m L。然后将MS接种5日龄SPF鸡胚,3日后分别接种10MIC和50MIC泰万菌素,作用3日和5日后分别检测鸡胚中的MS。结果泰万菌素作用3日对鸡胚中MS的抑制率分别为30%和41.7%,与对照组相比差异不显著(P>0.05);作用5日对鸡胚中MS的抑制率分别为54.5%和70%,与对照组相比差异显著(P<0.05)。结果表明,泰万菌素对鸡胚中的MS有抑制作用,且作用时间对抑制效果影响较大。
- 韩相敏文丽高俊锋马晶晶吴碧清赖志胡思顺
- 关键词：SPF鸡胚
- 禽流感病毒ELISA检测方法的建立及诊断试剂盒的研制与应用
- 本研究以禽流感病毒(AIV)湖北分离株(H9N2亚型)提纯物为免疫原,获得了鸡抗AIV和兔抗AIV抗体,用琼脂扩散法测得效价分别为1:32和1:16.以纯化的鸡抗AIV IgG为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体,建...
- 肖运才李自力胡思顺石德时许青荣程峰刘梅毕丁仁王桂枝
- 关键词：禽流感病毒诊断试剂盒ELISA检测方法
- 文献传递
- 一种基于重组蛋白rsPgp3的家畜衣原体抗体的间接ELISA检测方法及试剂盒
- 本发明属于生物医药检测技术领域，尤其涉及一种基于重组蛋白rsPgp3(rsPGP3)的家畜衣原体抗体的间接ELISA检测方法及试剂盒。本发明通过基因克隆表达技术，获取家畜衣原体rsPgp3。以rsPgp3为包被抗原建立起...
- 胡思顺周文胡长敏舒晓倩袁李圣兰李自力刘梅
- 文献传递
- 滑液囊支原体和鸡毒支原体的四重PCR检测试剂盒
- 本发明公开了一种同时检测滑液囊支原体（MS）和鸡毒支原体（MG）的四重PCR检测试剂盒，包括4对特异性引物，该引物具有高度的保守性和特异性，在一次PCR反应中鉴定滑液囊支原体和鸡毒支原体的同时，还可进一步区分出鸡毒支原体...
- 胡思顺刘洋洋周文李自力毕丁仁彭伏虎许青荣周祖涛刘梅
- 文献传递
