贺震
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：南华大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 小鼠PDZ9的克隆及亚细胞定位分析
- 目的：克隆小鼠基因PDZ9并构建pEGFP-C1载体进行亚细胞定位分析。方法：利用RT-PCR技术扩增小鼠基因PDZ9开放阅读框序列。将目的基因片段插入pGEM-T载体中,经双酶切和测序鉴定后,定向克隆至荧光表达载体pE...
- 姚峰刘鑫王宗保吴端生陈春芳贺震余坚谭翔文
- 关键词：基因克隆亚细胞定位动物模型
- 文献传递
- 艾溴利平对高糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及蛋白激酶B表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察艾溴利平对高糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡和蛋白激酶B(PKB)磷酸化的影响,并探讨其分子机制。方法应用终浓度为33.3 mmol·L-1葡萄糖诱导内皮细胞HUVEC-12细胞株高糖模型,实验分为正常对照组、高糖模型组、艾溴利平组和抑制剂组,Hoechst33258染色及AnnexinV和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测PKB总蛋白、PKB苏氨酸308(PKB-Thr308)及PKB丝氨酸473(PKB-Ser473)的磷酸化水平。结果高糖模型组内皮细胞凋亡指数(AI)增加为(14.07±s 0.25)%,高于正常对照组(P<0.01),艾溴利平8μmo·lL-1组AI降至(5.42±0.13)%,与高糖模型组相比有非常显著差异(P<0.01),抑制剂组AI增加至(12.00±0.10)%。低浓度艾溴利平(2、4、8μmo·lL-1)短时间(6、12、24、48 h)增加PKB磷酸化(P<0.01);而阻断PKB活性可显著抑制艾溴利平的抗凋亡作用。结论艾溴利平能抑制高糖引起的人脐静脉内皮细胞凋亡,可能与信号分子PKB的激活有关。
- 肖国华王宗保余坚高天舒梅红霞贺震
- 关键词：动脉粥样硬化蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶内皮细胞凋亡
- 一个新的睾丸特异表达小鼠基因电子克隆与序列分析被引量：1
- 2010年
- 目的电子克隆小鼠睾丸组织特异表达新的基因。方法运用"数据库消减杂交"筛选出一个在小鼠睾丸中特异表达的新基因(GI:223462116)。结果序列分析显示该cDNA长1 428 bp,有一个801 bp的开放阅读框,编码266个氨基酸,该蛋白质明显的含有4个亲水性区域,2个疏水性区域。结论所克隆的cDNA序列为小鼠的一个新基因。
- 姚峰周军媚陈春芳贺震刘鑫
- 关键词：电子克隆
- 小鼠睾丸基因PDZD9的克隆及亚细胞定位分析被引量：1
- 2012年
- 目的克隆小鼠睾丸基因PDZD9并构建pEGFP-C1-PDZD9重组载体进行亚细胞定位分析。方法提取小鼠睾丸RNA,利用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术从小鼠睾丸cDNA中分离PDZD9基因。将PDZD9基因定向克隆至带有绿色荧光报告基因的真核表达载体pEGFP-C1。利用阳离子聚合物方法转染COS7细胞,荧光显微镜下观察其亚细胞定位。结果小鼠睾丸基因PDZD9克隆成功,成功构建真核表达载体pEGFP-C1-PDZD9,亚细胞分析表明该蛋白定位于细胞核和细胞质中,主要分布在细胞核中。结论成功克隆了小鼠睾丸基因PDZD9,并初步分析了其在细胞中的定位情况,为下一步对PDZD9的功能研究奠定了基础。
- 周军媚姚峰刘鑫王宗保吴端生陈春芳贺震余坚
- 关键词：克隆转染亚细胞定位
