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牛肺泡巨噬细胞微小RNA的克隆与鉴定被引量：8: 2009年; MicroRNA（mi RNA）是一类长19-26个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,其异常表达将会导致生理的异常和疾病的产生。为了研究mi RNAs在牛肺泡巨噬细胞抗菌机制中的作用,构建了牛肺泡巨噬细胞mi RNAcDNA文库,从438个克隆中筛选出22个mi RNAs,其中有19个mi RNAs在牛的mi RBase数据库中没有发现,但是有8个mi RNAs与人和（或）鼠中的序列完全同源,因此,将它们命名为Bta-mi R-141、Bta-mi R-187、Bta-mi R-191、Bta-mi R-448、Bta-mi R-589、Bta-mi R-873、Bta-mi R-463和Bta-mi R-562;另外有11个mi RNAs在所有mi R-Base数据库中都没有发现,有待进一步研究。这些数据为研究mi RNAs调控牛肺泡巨噬细胞抗菌机制奠定了基础。; 徐广贤张艳贾浩周萍王玉炯; 关键词：MICRORNA 克隆

牛结核分枝杆菌PstS3基因克隆与序列分析被引量：1: 2010年; 以牛结核分枝杆菌(Mycobacterium bovis)基因组DNA为模板,克隆PstS3基因,并进行序列测定,然后利用生物信息学软件对其序列进行分析.结果显示,PstS3基因全长1 113 bp,编码370个氨基酸,与GenBank所发表的人结核分枝杆菌PstS3基因的核苷酸同源性为99.82%,氨基酸同源性为99.4%,有1处位点发生有义突变.; 周晶贾浩徐广贤王玉炯; 关键词：牛结核分枝杆菌

牛肺泡巨噬细胞微小RNA的克隆与鉴定: MicroRNA是一类长约22个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,可调节与其序列互补的mRNA的表达,普遍存在于高等生物界,在不同物种间具有高度的保守性,其表达具有高度组织特异性、保守性和时序性,能通过与靶基因mRN...; 徐广贤王玉炯李勇李敏张艳李娟贾浩; 文献传递

牛结核分枝杆菌MPB70蛋白分泌性载体的构建与蛋白表达被引量：2: 2010年; 为了研究牛结核病新型诊断抗原,试验根据GenBank中Mycobacterium bovis基因序列设计1对引物,将牛结核分枝杆菌MPB70基因构建到pET22b(+)原核表达载体上,将重组载体转到E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导获得高效表达,并进行SDS-PAGE和Westen-blot分析。结果表明:MPB70蛋白以可溶形式在细胞周质中表达,有部分蛋白以包涵体形式在细胞质中表达,其分子质量约为30ku,蛋白表达量占菌体总蛋白的20%;重组MPB70蛋白可与牛分枝杆菌阳性血清发生特异性反应。说明重组MPB70蛋白能够作为诊断抗原。; 贾浩周晶徐广贤李娟张艳许涛王玉炯; 关键词：牛结核分枝杆菌 MPB70 WESTERN-BLOT

牛肺泡巨噬细胞微小RNA的克隆与鉴定: MicroRNA(miRNA)是一类长约19.26个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,miRNA表达具有严格的时间和组织特异性,其异常表达将会导致生理的异常和疾病的产生。为了研究miRNAs在牛肺泡巨噬细胞抗菌机制中...; 徐广贤张艳李娟贾浩王玉炯; 关键词：组织特异性抗菌机制; 文献传递

牛分枝杆菌溶血磷脂酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达: 2010年; 为研究牛分枝杆菌(M.bovis)溶血磷脂酶基因在致病机理中的作用,本研究构建了表达M.bovis的溶血酶(LIP)基因的重组质粒pET30a-LIP,经IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,SDS-PAGE分析表明,重组蛋白表达量占菌体总蛋白的20%;该蛋白经电洗脱纯化后,纯度达95%以上;免疫印迹实验表明,原核表达的蛋白可与兔抗牛分枝杆菌多克隆抗体结合,具特异的免疫反应性。; 徐广贤周晶李娟贾浩王玉炯; 关键词：牛分枝杆菌原核表达免疫印迹蛋白纯化

结核分枝杆菌Rv0183蛋白对肺泡巨噬细胞(RAW264.7)生物学效应的研究: 结核分枝杆菌是典型的胞内寄生菌，其磷脂代谢途径在结核分枝杆菌的各种代谢途径中具有重要的作用，结核分枝杆菌Rv0183主要与结核分枝杆菌的磷脂代谢有关。结核分枝杆菌脂类含量占细胞壁干重的60％，并且有大量的分枝菌酸包围在肽...; 贾浩; 关键词：结核分枝杆菌炎性反应生物学效应流式细胞术; 文献传递

牛肺泡巨噬细胞微小RNA的克隆与鉴定: MicroRNA(miRNA)是一类长约19-26个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,miRNA表达具有严格的时间和组织特异性,其异常表达将会导致生理的异常和疾病的产生。为了研究miRNAs在牛肺泡巨噬细胞抗菌机制中...; 徐广贤张艳李娟贾浩王玉炯; 关键词：MICRORNA 克隆; 文献传递

牛结核分枝杆菌溶血磷脂酶真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达: 2010年; 为了研究牛结核分枝杆菌溶血磷脂酶基因(Lip)的生物学特性及其功能,试验构建了Lip-pEGFP融合基因的真核表达载体,利用脂质体(lipofectamine2000)将其转染到Hela细胞中,用荧光显微镜检测GFP在细胞中的表达情况。结果显示,重组Lip-pEGFP载体在Hela细胞中获得了高效表达,且能够稳定传代,为进一步研究Lip的生物学功能及其在牛结核分枝杆菌中的作用奠定了基础。; 贾浩徐广贤周萍张艳王玉炯; 关键词：牛结核分枝杆菌溶血磷脂酶 HELA细胞

microRNA对肿瘤细胞增殖与分化的调控被引量：6: 2009年; microRNA(miRNA)是一种长度约为22核苷酸(nt)的非编码RNA,其主要通过碱基互补与靶mRNA的3’端非翻译区(3’UTR)结合,导致靶mRNA降解或抑制蛋白质的合成,在转录后水平调节基因的表达。miRNA突变、缺失或表达水平的异常会导致生理的异常与疾病的发生,与人类肿瘤疾病密切相关,它具有类似于癌基因或抑癌基因的作用,可参与肿瘤细胞的增殖、分化和细胞凋亡等调控过程。miRNA在肿瘤诊断和治疗方面具有广阔的应用前景。; 张艳徐广贤贾浩李娟王玉炯; 关键词：MICRORNA 癌症癌基因抑癌基因

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贾浩