赵亮
- 作品数:5 被引量:24H指数:3
- 供职机构:哈尔滨医科大学附属第三医院更多>>
- 发文基金:黑龙江省卫生厅科研项目黑龙江省“十五”科技攻关项目哈尔滨市青年科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- eIF-4E腺病毒载体构建及对乳腺癌MCF-7细胞转移能力的影响被引量:2
- 2008年
- 目的:构建乳腺癌真核细胞起始因子——4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF-4E)基因重组腺病毒载体,并观察其对乳腺癌细胞MCF-7转移能力的影响。方法:应用基因重组技术将eIF-4E基因构建于腺病毒载体pAD-X,转染293包装细胞得到高滴度重组腺病毒,并用real-time PCR进行eIF-4E基因表达的验证。将重组腺病毒pAD-eIF-4E感染MCF-7细胞,应用siRNA封闭eIF-4E后通过transwell小室法观察其对细胞侵袭和运动能力的影响。结果:酶切结果与预期相符,real-time PCR可检测到转染后MCF-7细胞有eIF-4E基因过表达。且病毒转染后transwell小室可见,与eIF-4E过表达组相比较,eIF-4E siRNA封闭组MCF-7细胞的侵袭和运动能力均受到显著的抑制(均为p<0.01)。结论:重组eIF-4E腺病毒载体正确构建,抑制eIF-4E的表达,对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭和运动都有抑制作用。
- 张国强潘薇赵亮庞达
- 关键词:EIF-4E重组腺病毒乳腺癌MCF-7细胞
- RNA干扰技术沉默Stat3基因对胃癌细胞SGC7901生物学行为影响的实验研究被引量:7
- 2008年
- 目的:构建Stat3-siRNA表达载体,探讨转染Stat3-siRNA表达载体阻断人胃癌细胞系SGC7901的Stat3信号传导通路对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用RNAi技术,构建Stat3-siRNA表达载体,稳定转染胃癌细胞系SGC7901,利用Real-time PCR、Western Blot、MTT、流式细胞技术等方法分别检测Stat3基因mRNA和蛋白表达及细胞增殖和凋亡的变化情况。结果:成功构建Stat3-siRNA表达载体,经测序验证无误。Western Blot及Real-time PCR结果显示:Stat3基因的表达水平均下降,其中以SGC7901-siRNA3干扰效果最明显,差异具有显著性(P<0.05)。MTT法结果显示:稳定转染SGC7901细胞后,细胞的增殖能力明显下降,与对照组相比差别显著(P<0.05)。流式细胞技术显示:Stat3-siRNA3实验组较对照组出现了明显的细胞凋亡,在G1期前出现的亚二倍峰即为凋亡峰。结论:Stat3基因的RNAi重组体可以有效的抑制Stat3基因的表达,RNA干扰技术沉默Stat3基因能够抑制胃癌细胞的生长,促进其凋亡。
- 赵亮赵家宏孙凌宇于旸刘锋张岂凡张玉宝董新舒傅松滨崔滨滨
- 关键词:STAT3RNA干扰
- 应用RNA干扰技术抑制人胃癌细胞环氧合酶-2基因的表达研究
- 2007年
- 目的研究应用RNA干扰技术进行抑制胃癌SGC-7901细胞COX-2的表达研究。方法依据siRNA设计原则,针对人COX-2的mRNA序列,设计并合成3条21bp的双链RNA,瞬时转染人胃癌细胞SGC-7901,Western印迹t验证基因沉默效率以筛选合适的siRNA序列;根据筛选出的有效序列,合成编码短发卡RNA的双链寡核苷酸,定向克隆到含有U6RNA聚合酶Ⅲ启动子的pSilencer^TM2.1-U6neo真核表达载体,稳定转染胃癌细胞SGC-7901中,经G418筛选,获得克隆细胞。结果筛选出一条有效的干扰序列,位于291—311bp,成功构建表达载体,COX-2在蛋白水平的表达明显被抑制。结论利用化学合成siRNA进行初筛,再构建shRNA表达载体,可快速实现目的基因的表达抑制。
- 孙凌宇赵亮薛英威赵育桢白静傅松滨张岂凡
- 关键词:胃癌环氧合酶-2RNA干扰基因治疗
- 乳腺癌原发灶与转移灶CD44v6表达的对比研究被引量:11
- 2004年
- 赵亮张玉宝张殿忠
- 关键词:乳腺癌CD44基因原发灶转移灶聚合酶链反应
- 胰十二指肠切除术后肠内与肠外营养支持的疗效研究被引量:4
- 2012年
- 目的探究胰腺癌病人胰十二指肠切除术后肠内营养(EN)支持的重要作用。方法 将40例胰十二指肠切除术后的胰腺癌患者随机分成两组,每组20例。分别接受肠内营养支持和肠外营养(PN)支持,比较分析两组病人营养指标、炎性反应指标和并发症发生率等。结果经术后9天治疗两组病人营养指标比较无统计学意义,EN组肠道蠕动恢复较早,且并发症、炎性反应指标及治疗费用显著低于PN组(P〈0.05)。结论在胰十二指肠切除术后,EN支持可减少并发症,有利于胰腺癌患者康复。
- 展超徐海涛赵亮孙建民董巍孙程明金宇张玉宝
- 关键词:胰十二指肠切除术肠内营养肠外营养