赵嘉将
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：重庆市应用基础研究项目重庆市科委基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HBsAg和GM-CSF融合表达质粒的构建被引量：1
- 2003年
- 目的 :构建乙肝HBsAg和GM -CSF的融合表达质粒 ,借助GM -CSF的免疫佐剂作用 ,提高乙型肝炎DNA疫苗的免疫效果。方法 :用PCR方法分别从 pEcob6和 pCD -hGM -CSF中扩增出基因S和GM -CSF ,克隆到真核表达质粒pcD NA3.1(+)中 ,构建pcDNA3.1-S及融合表达质粒 pcDNA3.1-GM -CSF -S ,然后以重组质粒转染真核细胞 ,研究重组质粒体外表达。结果 :经酶切鉴定及DNA序列证实重组质粒构建正确 ,细胞转染试验表明重组质粒能在COS - 7及HepG - 2内表达。结论 :乙肝HBsAg和GM -CSF的融合表达质粒构建成功 ,重组质粒能在真核细胞内表达。
- 卿玉玲赵嘉将任红
- 关键词：乙型肝炎质粒构建
- 乙型肝炎表面抗原与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子融合表达质粒诱导小鼠特异性免疫应答被引量：3
- 2003年
- 目的 观察乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM CSF)融合表达质粒诱导特异性免疫应答的效果。方法 以HBsAg与GM-CSF融合表达质粒DNA免疫BALB/C小鼠,用酶链免疫吸附方法检测质粒诱导BALB/C小鼠产生抗HBs及脾细胞经HBsAg体外刺激后分泌白细胞介素(IL)-2、4及γ干扰素(IFNγ)的水平;并用^(21)Cr释放法检测HHsAg特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。结果 各组小鼠加强免疫后血清抗体水平(P/N值)A组(PcDNA3.1-S)16.1+20.3,B组(PcDNA3.1 GM-CSF-S)28.3±19.7,F组(重组酵母乙型肝炎疫苗)29.5±21.5,C组(PcDNA3.1S-GM-CSF)0.3±0.0,D组(PcDNA3.1—S+PcDNA3.1-GM-CSF)4.5+5.9,E组(PcDNA3.1—GM-CSF)0.9±1.2,G组(PcDNA3.1)及H组(PBS)为阴性(F-4.176,P<0.01);IL-2分泌水平A组(26.6±1.9)、B组(56.0±2.2)、C组(4.3±1.2)、D组(33.5±1.7)、F组(3.5+1.4)、F组(7.5±2.0)、G组(1.5±0.7),H组未检测到IL-2分泌(F=31.188,P<0.01);IFN-γ分泌水平A组(64.0±7.5)、B组(139.0±17.0)、C组(11.0±5.0)、D组(53.0±9.5)、E组(9.0±3.0)、F组(13.0±2.0)、G组(8.0±2.0,P(0.05),H组未检测到IFN—γ泌(F=31.796,P<0.01);HBsAg特异性CTL活性,效靶比为30:1及10:1时各组音有差异有显著性(F值分别为26.891。
- 卿玉玲凌宁赵嘉将彭明利许红梅任红
- 关键词：乙型肝炎表面抗原粒细胞巨噬细胞集落刺激因子小鼠免疫应答
- 乙型肝炎表面抗原与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子融合表达质粒免疫乙型肝炎病毒转基因小鼠的研究被引量：4
- 2004年
- 目的 研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的融合表达质粒免疫乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠及其病毒清除作用。方法 将小鼠随机分为8组,分别注射以下质粒:A组pcDNA3.1-S 100μg;B组:pcDNA3.1-GM-CSF-S 100μg;C组:pcDNA3.1-S-GM-CSF 100μg;D组:pcDNA3.1-S 50μg+pcDNA3.1-GM-CSF 50μg;E组:pcDNA3.1-GM-CSF 100μg;F组:重组酵母乙型肝炎疫苗1μg;G组:pcDNA3.1 100μg;H组:磷酸盐缓冲液(PBS)100μl。于质粒注射前4d肌肉注射0.25％bupivacaine溶液100μl,诱导骨骼肌细胞变性。以HBsAg和GM-CSF的融合乙型肝炎表达质粒免疫HBV转基因小鼠,检测HBV转基因小鼠血清HBsAg表达水平及肝细胞HBsAg的表达,检测脾细胞白细胞介素(IL)-2、IL-4及γ干扰素(IFN-γ)的分泌水平及淋巴细胞增殖情况,并进行肝组织学检查。结果 质粒加强免疫4周后血清HBsAg检测结果A组为28.28±15.32、B组为10.77±9.18、C组为44.16±8.30、D组为21.93±13.28、E组48.04±3.60、F组为38.3±11.66、G组为47.03±3.96、H组为51.46±4.70,F=11.262,P<0.01,其中B组血清HBsAg滴度显著低于其余各组。IL-2分泌水平(pg/ml)A组为25.5±7.5、B组为48.5±11.3、C组为4.0±2.5、D组为38.0±8.5、E组为3.7±2.1、F组为6.5±23.
- 卿玉玲赵嘉将任红
- 关键词：乙型肝炎表面抗原粒细胞巨噬细胞集落刺激因子乙型肝炎病毒转基因小鼠
- 乙型肝炎HBsAg和GM-CSF融合表达质粒的构建及表达被引量：10
- 2003年
- 目的 构建乙型肝炎HBsAg和GM CSF的融合表达质粒 ,借助GM CSF的免疫佐剂作用 ,提高乙型肝炎DNA疫苗的免疫效果。方法 用PCR方法及分子克隆技术构建融合表达质粒pcDNA3.1 S GM CSF和pcDNA3.1 GM CSF S ,并以重组质粒转染真核细胞 ,研究重组质粒体外表达。结果 经酶切鉴定及DNA序列证实重组质粒构建正确 ,细胞转染试验表明重组质粒能在COS 7及HepG 2内表达。结论 乙型肝炎HBsAg和GM CSF的融合表达质粒构建成功 。
- 卿玉玲赵嘉将任红
- 关键词：乙型肝炎HBSAGGM-CSF
