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猪链球菌的鉴定及其主要毒力基因的多重PCR检测被引量：9: 2009年; 通过革兰氏染色镜检、生化试验及PCR鉴定,对分离的猪源链球菌进行初步研究。同时根据猪链球菌主要毒力因子基因Sly、MRP、EF的核苷酸序列,设计并合成了3对特异性引物,通过体系和条件优化,建立多重PCR检测方法,对实验菌株及阴性对照菌株进行检测分析。结果从不同地区分离到的30株猪源链球菌中,确认16株为猪链球菌。多重PCR检测结果显示,Sly检出率为5/16,MRP检出率为4/16,EF检出率为2/16,阴性对照菌株毒力因子检测结果均为阴性。分析结果表明,该多重PCR体系可用于猪链球菌毒力相关因子Sly、MRP、EF的基因检测,特异性和敏感性较好。; 聂小想沈志强管宇李建亮逄媛崔言顺; 关键词：猪链球菌生化鉴定毒力因子多重PCR

产肠毒素性大肠杆菌F41与987P菌毛蛋白的串联表达被引量：6: 2008年; 根据GenBank中发表的E.coli F41、987P基因序列,分别设计合成一对引物。利用PCR技术,分别以大肠杆菌C83707的基因组和C83710的质粒为模板扩增F41、987P基因。通过分离、纯化、限制性核酸内切酶酶切、连接和转化,构建了含F41-987P串联表达载体的重组菌株BL21(DE3)/pETF41-987P。经酶切、PCR鉴定和DNA序列分析,证实了构建的重组质粒pETF41-987P中含有F41-987P融合基因,且基因序列和阅读框架均正确。经过SDS-PAGE分析,串联表达蛋白含量在30%左右,经Western blot检测,该串联表达蛋白能被大肠杆菌F41、987P阳性血清识别。反向间接血凝试验结果,F41效价为26～28,987P效价为28～210。说明F41-987P融合蛋白具有良好的抗原性。表明构建的重组菌株可以作为预防新生仔猪大肠杆菌性腹泻基因工程疫苗的候选菌株。; 逄媛沈志强崔言顺聂小想王金良郭广君李建亮; 关键词：大肠杆菌 F41

产肠毒素性大肠杆菌K88与K99菌毛蛋白的串联表达: 2009年; 根据GenBank中发表的E.coliK88、K99基因序列,分别设计合成1对引物。利用PCR技术,以大肠杆菌C83907和C83644的质粒为模板分别扩增不含信号肽的K88及K99基因。通过分离、纯化、限制性核酸内切酶酶切、连接和转化,构建了含K88-K99串联表达载体的重组菌株BL21(DE3)(pETK88CK99)。结果显示,经酶切、PCR鉴定和DNA序列分析,证实了构建的重组质粒pETK88CK99中含有K88K99融合基因,且基因序列和阅读框架均正确。经过SDS-PAGE分析,串联表达蛋白含量占菌体蛋白的40%左右,经Western blotting检测,该串联表达蛋白能被大肠杆菌K88、K99标准血清识别。结果表明,构建的重组菌株可以作为预防新生仔猪大肠杆菌性腹泻基因工程疫苗的候选菌株。; 逄媛崔言顺沈志强聂小想王金良郭广君李建亮; 关键词：大肠杆菌 K88 K99

禽流感基因工程疫苗的研究进展: 禽流感是由A型禽流感病毒引起的一种禽类(家禽和野禽)烈性传染病。每年给世界各国的养禽业造成巨大的经济损失。目前还没有特效药物用于禽流感的治疗，疫苗接种是控制禽流感发生和流行的主要手段。本文从核酸疫苗、重组活载体疫苗、亚单...; 王金良唐娜曲光刚魏凤颜丙峰逄媛管宇沈志强; 关键词：禽流感基因工程疫苗核酸疫苗; 文献传递

脉冲场凝胶电泳技术在猪链球菌分型中的应用被引量：6: 2008年; 脉冲场凝胶电泳是一种可用于分离20 kb至10 Mb大分子质量DNA的新型凝胶电泳技术。该法应用于猪链球菌的分子分型,通过观察电泳条带的差异,为确定菌株之间的亲缘关系,分析基因型和临床症状之间的关系等方面提供了可靠的技术手段。文章介绍了脉冲场凝胶电泳技术的应用状况及猪链球菌的分型现状,并阐述了该技术在猪链球菌分子分型研究方面的应用及发展前景。; 聂小想沈志强崔言顺逄媛管宇沈旭; 关键词：脉冲场凝胶电泳猪链球菌基因分型

产肠毒素性大肠杆菌K88与K99菌毛蛋白的串联表达: 产肠毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichiacoli,ETEC)是引发仔猪黄痢、白痢、水肿等疾病的重要病原。ETEC致病主要依靠菌毛的作用附着在仔猪肠壁上皮细胞上,然后大量繁殖,分泌肠毒素,最...; 逄媛沈志强聂小想王金良郭广君李建亮崔言顺; 文献传递

猪源产肠毒素性大肠杆菌K88、K99，987P、F41双基因串联表达的研究: 产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)是引起仔猪腹泻的主要病原菌，黏附素在ETEC的致病过程中起着重要作用。从动物ETEC中发现的粘附素抗原有K88、K99、987P、F41、F42、F165、F17和F18等。而猪源粘附素抗原...; 逄媛; 关键词：大肠杆菌仔猪腹泻基因工程疫苗; 文献传递

仔猪腹泻性大肠杆菌基因工程疫苗的研究进展被引量：6: 2007年; 逄媛沈志强崔言顺聂小想王金良郭广君; 关键词：产肠毒素性大肠杆菌仔猪腹泻基因工程疫苗养猪业发展仔猪成活率规模化猪场

产肠毒素性大肠杆菌F41与987P菌毛蛋白的串联表达: 产肠毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichiacoli,ETEC)是引发仔猪黄痢、白痢、水肿等疾病的重要病原。ETEC致病主要依靠菌毛的作用附着在仔猪肠壁上皮细胞上,然后大量繁殖,分泌肠毒素,最...; 逄媛沈志强崔言顺聂小想王金良郭广君李建亮; 文献传递

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逄媛