郭学金 作品数:5 被引量:5 H指数:1 供职机构: 青岛农业大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
两株不同致病力H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列分析 被引量:5 2015年 为了找到H9N2亚型禽流感病毒毒株致病力增强的分子线索,对致病力存在明显差异的2株H9N2亚型禽流感病毒进行了全基因组序列测定和分析。遗传进化分析表明,2株H9N2亚型禽流感病毒发生了基因重配,内部基因来源具有多样性。氨基酸序列分析表明,强致病力毒株A/chicken/Shandong/818/2010和A/chicken/Shandong/196/2011在HA受体结合位点、NA唾液酸结合位点和潜在糖基化位点处存在显著差异,SD/818在PA蛋白55位氨基酸和336位氨基酸等重要功能位点处出现了与致病力增强有关的突变,这种致病力增强的分子机制需要进一步探究。 刘琳琳 张毅 郭学金 范丹丹 朱梅胜 王守春 徐守振 王建琳 毕玉海 尹燕博关键词:H9N2亚型禽流感病毒 致病力 全基因 遗传进化 鸡Ⅰ型IFN及TLR-3和TLR-7实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:1 2016年 为检测鸡抗病毒相关基因在病毒感染过程中的动态变化规律,研究建立了鸡IFN-a、IFN-β、TLR-3和TLR-7的实时荧光定量RT-PCR的检测方法。根据GenBank提供的鸡IFN-α、IFN-β、FLR-3和TLR-7参考序列设计了相应的特异引物,用常规RT-PCR方法从鸡脾脏总RNA中扩增得到鸡相应基因。将其cDNA分别克隆到pMD19-T载体中进行测序鉴定,采用SYBR Green I染料法,建立标准曲线并分析其溶解曲线。结果表明,这4种基因的检测灵敏度可高达46 copies/μL,且具有良好的特异性和重复性。此检测方法的建立为动态定量检测及研究鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7基因的表达变化提供了有效的手段。 曹志伟 孙忠晟 郭学金 王建琳 尹燕博关键词:IFN-Α IFN-Β 比格犬β-防御素cBD1基因的原核表达与鉴定 2014年 为获得比格犬β-防御素cBD1基因的表达产物,根据GenBank中登录的犬β-防御素基因cBD1(canis familiarisβ-defensin-like peptide 1)的序列设计引物,提取比格犬睾丸组织总RNA,利用PCR扩增cBD1基因,然后将其克隆至pET-32a(+)载体,构建原核表达质粒pET-32a-cBD1,通过PCR、酶切鉴定和测序确认,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导和His-Ni-resin纯化目的蛋白。经SDS-PAGE检测,获得了约28ku的表达产物,与预期大小的β-防御素cBD1的分子质量相一致。Westernblot分析表明,表达产物与抗His标签鼠单克隆抗体发生反应,显示重组蛋白获得了表达。结果表明,成功表达的cBD1为新型抗菌制剂的研制奠定了试验基础。 冯培祥 潘福星 毕玉敏 郭学金 陈欣 杨莉 徐守振 王建琳 郭妍妍 尹燕博关键词:比格犬 Β-防御素 原核表达 1998年~2012年鸡源H9N2亚型禽流感病毒NS基因的分子演化规律分析 2013年 本研究对1998年~2012年分离自我国的32株H9N2亚型禽流感病毒的NS基因进行了克隆和序列测定,并对这些序列进行了系统分析。进化分析表明,在我国流行的H9N2亚型禽流感病毒的NS基因主要属于等位基因A群的BJ/94分支,而属于G1分支的毒株很少被分离到;我国H9N2流行株不断演化出新的亚分支,2000年之前的毒株主要属于Y280亚分支,2007年之后F/98亚分支的毒株逐渐演化为优势谱系。对毒株氨基酸序列的分析表明,部分H9N2亚型禽流感病毒的NS蛋白具有高致病性毒株的分子特征。 郭学金 张毅 王守春 毕玉海 郭妍妍 刘琳琳 尹燕博关键词:H9N2亚型禽流感病毒 NS基因 分子特征 不同致病力H9N2亚型禽流感病毒全基因序列分析及一株病毒感染SPF鸡后部分器官主要细胞因子含量变化测定 郭学金文献传递