高荣
- 作品数：150 被引量：469H指数：12
- 供职机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 猪圆环病毒核酸疫苗pcDNA-PCV-ORF2-ISS的构建及分子佐剂联合免疫研究被引量：9
- 2009年
- 用PCR方法扩增猪圆环病毒PCVwhn株编码CAP蛋白的基因ORF2,同时人工合成一段CpG序列,并设计上下游引物,进行扩增,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建新型核酸疫苗(pcDNA-PCV-ORF2-ISS),并进行了酶切和测序鉴定。用构建的pcDNA-PCV-ORF2-ISS质粒以及pcDNA-PCV-ORF2与5种细胞因子分子佐剂质粒(IL-6/4、IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ真核表达质粒)联合对仔猪进行免疫试验。免疫后用间接ELISA法测定猪圆环病毒Ⅱ型特异性抗体lgG,用流式细胞仪测定猪血液CD3+、CD4+和CD8+T细胞亚类的数量。结果显示,成功构建含CpG免疫刺激序列的猪圆环病毒Ⅱ型核酸疫苗;pcDNA-PCV-ORF2-ISS在仔猪免疫实验能诱导细胞免疫并产生特异性抗体(P<0.05);用5种细胞因子分子佐剂质粒与pcDNA-PCV-ORF2疫苗同时免疫能显著提高DNA疫苗的免疫效果(P<0.05)。分子佐剂免疫增强效果次序为:IL-6、CpG、IL-6/4、IL-2、IL-4和IFNγ-,表明IL-6和CpG最佳。
- 张建远王红宁陈锦锐高荣黄勇罗昊陈建林郑敏
- 乌金猪、青峪猪和成华猪免疫器官与组织Toll样受体和抗菌肽基因表达比较研究被引量：2
- 2018年
- Toll样受体(TLRs)和抗菌肽是机体天然免疫系统的重要组成部分,是抵御外界有害微生物或病毒入侵的重要屏障。乌金猪、青峪猪、成华猪是中国优良地方猪种,具有繁殖力高、抗病耐逆性强等优点。本实验比较了8月龄乌金猪、青峪猪、成华猪与约克夏猪的消化道、呼吸道局部免疫组织和全身免疫器官的先天免疫特点,采用实时荧光定量PCR技术检测TLRs(TLR1、TLR2、TLR4、TLR7、TLR9)和抗菌肽(p BD-1、PR-39)基因在4种猪的胸腺、脾脏、扁桃体、肠系膜淋巴结和肺门淋巴结中的表达差异。结果显示,成华猪胸腺中TLR7、PR-39,脾脏中TLR4、TLR7,肠系膜淋巴结中TLR4、TLR9,肺门淋巴结中TLR1、TLR4、TLR7、TLR9 mRNA表达水平显著高于其他猪种(P <0. 05);乌金猪胸腺中TLR1、TLR9,扁桃体中TLR1、TLR2、TLR4、TLR7、TLR9、p BD-1,肠系膜淋巴结中TLR7 mRNA表达水平显著高于其他猪种(P <0. 05);青峪猪扁桃体和肠系膜淋巴结中PR-39 mRNA表达水平显著高于其他猪种(P <0. 05)。这些结果为进一步利用优良地方猪种杂交育种和筛选抗病分子标记提供了新的线索。
- 张敬梅顾以韧李江淩陈晓晖曾凯吕学斌高荣
- 关键词：抗菌肽基因基因表达
- 藏猪IL-12重组质粒增强PCV2疫苗免疫佐剂的制备方法及应用
- 本发明公开了藏猪IL‑12及其重组质粒在制备PCV2疫苗免疫佐剂中的应用。本发明提供了本发明提供的一种蛋白质，由IL‑12蛋白P40亚基、2A、TPA和IL‑12蛋白P35亚基组成；所述2A的氨基酸序列为序列2第324‑...
- 高荣肖永乐方鹏飞宋婷玉邱文英陈祎李金海王泽洲吕学斌李江凌龚文波
- 文献传递
- 抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用
- 本发明公开了抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用。本发明所提供的抗菌肽融合细胞因子CAMPILs为如下A1)、A2)或A3)：A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质；A2)将序列表中序列1所示的氨...
- 高荣万小平陈骞王泽洲胡立博黎凌陈建林吕学斌李江凌
- 文献传递
- 猪囊尾蚴抗原基因Ts11的克隆及其在大肠杆菌的表达被引量：5
- 2001年
- PCR扩增重组噬菌体λTs11克隆的cDNA片段 ,与pUC18连接 ,得到的重组子用以测序 ,并进行同源性比较分析 ;将该片段克隆到原核表达载体pGEX 1λT中 ,免疫印迹筛选得到能正确表达该片段的重组子 ;制备该重组子在大肠杆菌中的表达产物 ,进行浓度梯度SDS PAGE和West ernblotting分析。结果表明Ts11cDNA片段为 52 2bp ,编码含 139个氨基酸残基的多肽 ,在Gen Bank和EMBL数据库均未发现同源序列。重组质粒在大肠杆菌中表达的融合蛋白分子量为 4 1KD ,能与兔抗猪囊尾蚴囊液血清产生很强的免疫反应。这些结果证实分离到一个新的编码具较强免疫原性猪囊尾蚴抗原的cDNA克隆。
- 沈斌高荣孟民杰王克非魏竹波刘世贵
- 关键词：囊尾蚴克隆核酸疫苗
- PCR-DGGE技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落多样性
- 本文采用PCR-DGGE指纹图谱技术研究荣昌猪、长白、杜洛克猪肠道微生物群落的多样性，进行了不同品种间肠道微生物群落差异比较。通过提取猪粪样总DNA，进行16S rDNA的V3区扩增及DoGE电泳分析。结果表明，在DGG...
- 曾志光王红宁高荣唐俊妮管仲兵
- 关键词：猪病防治PCR-DGGE技术
- 文献传递
- 猪囊尾蚴抗原基因TS11的真核表达研究被引量：2
- 2003年
- 将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因的 m RNA;其蛋白表达产物能为兔抗猪囊虫高免血清所识别 ,在转染真核细胞 2 4 h后 ,即可检测到正确表达的猪囊尾蚴抗原蛋白。这些为深入研制猪囊虫的 DNA疫苗奠定了可靠的基础。
- 沈翼高荣沈斌武梅孟民杰唐漫书李江凌郑勇刘崑魏竹波王克非刘世贵
- 关键词：猪囊尾蚴抗原基因真核表达人畜共患病
- 猪白细胞介素-6基因的原核表达及其活性研究被引量：12
- 2002年
- 用DNA重组技术 ,将已克隆的猪IL - 6cDNA片段插入pGEX 1λT质粒 ,转化大肠杆菌 ,以BamHI和PstI酶切鉴定重组子 ,以IPTG诱导融合蛋白表达 ,并作RT PCR及SDS PAGE分析表达情况 ,从聚丙烯酰胺制备凝胶中回收融合蛋白 ,用MTT法测定重组蛋白刺激小鼠脾淋巴母细胞增殖反应的活性 ,并免疫家兔制备高免血清 ,得到高效表达猪IL 6的质粒pGPIL 6 ,RT PCR确证 pGPIL 6在大肠杆菌中能正确转录 ,经SDS PAGE分析表达蛋白分子量为 4 9kD ,融合蛋白具有较高的促小鼠淋巴细胞增殖反应活性 ,以此免疫家兔 ,可制备滴度为 1∶12 80 0
- 唐漫书高荣孟民杰武梅李江凌龙章富沈翼沈斌刘世贵
- 关键词：原核表达DNA重组基因表达融合蛋白
- 纳米颗粒包裹CpG序列对猪副伤寒疫苗接种小鼠免疫应答的影响被引量：5
- 2005年
- 本实验制备聚乙交酯丙交酯(PLG)纳米颗粒,比较了阳离子PLG纳米颗粒和脂质体作为包装分子包裹pUC18-CpG质粒对猪副伤寒疫苗接种小鼠体液IgG和特异抗体滴度、脾脏淋巴细胞增殖和白细胞介素-2诱生活性的影响。实验结果发现:与裸pUC18-CpG质粒接种小鼠比较,阳离子纳米颗粒包裹pUC18-CpG质粒能显著提高免疫小鼠IgG含量和特异抗沙门氏菌抗体滴度,增强淋巴细胞增殖活性及白细胞介素-2的诱生活性;同阳离子脂质体作为包装分子的细胞和体液免疫佐剂效应相似或较强。证明阳离子PLG纳米颗粒包装能显著提高裸CpG质粒的免疫增强活性。
- 武梅石林刘世贵李江凌吴凯源王丽焕沈翼刘昆郑勇张新申高荣
- 关键词：小鼠CPG序列免疫应答CPG序列疫苗接种副伤寒免疫应答
- 融合抗菌肽MAPWA和PGBD-2抑制猪繁殖呼吸综合病毒体外增殖效应的研究
- 引言PRRS是由猪繁殖与呼吸综合病毒(PRRSV)变异毒株引起的猪急性高致死性传染病,引起流产、早产、死产、木乃伊胎、弱仔等,死亡率可达50%以上。给养猪业带来严重威胁。目前还没有特效治疗药物。因此,开发和研制新型药物增...
- 白光明万小平杨璐一周英顺高荣
