高誉珊
- 作品数：87 被引量：465H指数：12
- 供职机构：北京中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 比色法测定脑线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性应注意问题
- 许红吴海霞孙红梅高誉珊和欣王志永
- 靶向ezrin、radixin、moesin的siRNA慢病毒感染原代肺微血管内皮细胞促进流感病毒的复制被引量：4
- 2015年
- 目的构建分别靶向ezrin(E)、radixin(R)、moesin(M)的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞,观察其对E、R、M基因表达及流感病毒复制的影响。方法根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠E、R、M基因的siRNA序列,克隆入慢病毒表达质粒GV248,构建分别靶向E、R、M基因的慢病毒siRNA载体Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA,同时构建靶向无关序列的Lenti-control-siRNA;组织块法分离培养大鼠原代肺微血管内皮细胞(PMVEC);Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA转染原代大鼠PMVEC后,荧光定量PCR检测E、R、M的mRNA的表达,Western blot法检测ERM蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测ERM蛋白的分布;FM1流感病毒鼠肺适应株感染慢病毒转染的PMVEC后,荧光定量PCR检测慢病毒载体对流感病毒复制的影响。结果重组质粒经测序鉴定,Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-MsiRNA、Lenti-control-siRNA构建成功。慢病毒载体转染大鼠PMVEC,感染复数(MOI)为10时感染率达80%以上。Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA明显抑制PMVEC中E、R、M的转录及表达。流感病毒感染PMVEC中,慢病毒空载体及Lenti-control-siRNA抑制流感病毒的复制,而Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA增加PMVEC中流感病毒的mRNA水平。结论成功构建靶向ERM基因的慢病毒载体,证实其可稳定转染PMVEC特异高效地抑制E、R、M基因表达;慢病毒载体本身能抑制PMVEC中流感病毒复制,而靶向E、R、M的慢病毒siRNA却促进流感病毒的复制。
- 吴莹张淑静张晨月玄子男李姝玉高誉珊胡雨
- 关键词：小干扰RNAEZRINRADIXINMOESIN肺微血管内皮细胞
- 基于TMI技术大黄黄连泻心汤不同煎煮方法退热效应观察被引量：3
- 2020年
- 目的观察《伤寒论》大黄黄连泻心汤麻沸汤浸渍剂与常规煎煮剂的退热作用,从整体热效应角度探索其煎煮方法的科学内涵。方法将36只大鼠分为正常组、正常+浸渍组、正常+煎煮组、模型组、模型+浸渍组、模型+煎煮组,共6组;采用皮下注射干酵母法制备大鼠发热模型。浸渍组灌服大黄黄连泻心汤麻沸汤浸渍剂,煎煮组灌服大黄黄连泻心汤煎煮剂,其余两组灌服蒸馏水。应用红外热成像技术(Thermal Metabolic Imaging,TMI)测定并分析大鼠红外热成像图。结果给予大黄黄连泻心汤后,发热模型大鼠基础温度出现下降。与模型组相比,模型+浸渍组给药后1 h温度降低,差异有统计学意义(P<0.05),模型+煎煮组给药后2 h温度降低,差异具有统计学意义(P<0.05),煎煮组与浸渍组温度值给药后1 h差异具有统计学意义(P<0.01)。服用不同煎煮方法的大黄黄连泻心汤,正常大鼠温度变化存在部位差异。与正常+浸渍组相比,正常+煎煮组在胸部膻中穴区、中腹部中脘穴区、腹股沟部位差异具有统计学意义(P<0.05),在全身平均温度值差异具有统计学意义(P<0.01)。结论与煎煮剂相比,浸渍剂退热部位广泛且偏于中上腹;煎煮剂对发热模型大鼠降温作用更为显著,浸渍剂对正常大鼠体表温度作用更为显著。大黄黄连泻心汤不同煎煮方法的热效应差异证实了方药煎煮方法的重要性和科学性,有利于更好地发挥疗效。
- 刘芳宇吴葳刘心怡刘恒妤汤阳张淑静范啸天高誉珊郑丰杰
- 关键词：大黄黄连泻心汤红外热成像技术
- 泛素-蛋白酶体系统与帕金森病
- 帕金森病(PD)是常见的神经系统慢性退行性疾病,病变部位位于中脑黑质纹状体区。泛素-蛋白酶体系统(UPS)主要负责降解寿命较短的蛋白质,其功能减退是导致PD发病的重要机制之一。而如何安全增强UPS活性及确定泛素化部位的决...
- 王媛媛孙红梅韩琳张忠盖聪许红高誉珊张淑静郭振宇阚菲菲
- 关键词：泛素-蛋白酶体帕金森病
- 文献传递
- 宣肺中药对COPD模型大鼠肺组织NKA及VIP含量的影响被引量：8
- 2011年
- 目的:观察宣肺中药(加味桔梗汤)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织VIP、NKA的影响,从神经肽角度探讨其作用机制。方法:用随机数字表法将40只Wister大鼠分为为正常组、模型组、模型给药组及正常给药组;采用气管滴注脂多糖加熏香烟联合造模方法建立COPD大鼠模型。正常组、模型组灌胃蒸馏水,各给药组于第2-13d、15-28d以加味桔梗汤(桔梗、生甘草、紫苑、浙贝)灌胃。第29d处死大鼠,测定其肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、IL-1β含量及细胞分类计数,并检测其肺组织中VIP、NKA含量。结果与正常组相比,模型组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β含量及淋巴细胞计数均明显增高,同时伴有肺组织NKA含量明显升高,VIP含量有减少趋势;经加味桔梗汤干预后,BALF中TNF-α含量及淋巴细胞计数均明显降低,IL-1β含量表现出下降趋势,且肺组织中NKA含量显著降低,VIP含量虽有增高趋势;相关分析显示,肺组织中NKA、VIP含量变化与IL-1β含量及淋巴细胞计数变化显著相关。结论:加味桔梗汤对COPD模型大鼠气道炎症的改善作用,可能与调节肺内神经肽NKA、VIP含量有关。
- 王毅李宇航郑丰杰许红高誉珊孙燕徐云林峻生
- 关键词：神经肽
- 黄芪和当归各提取物优化配方对特发性肺纤维化小鼠生存状况及肺细胞新生相关基因表达水平的影响被引量：23
- 2017年
- 【目的】观察黄芪当归各提取物优化配方对特发性肺纤维化(IPF)小鼠生存状况、转化生长因子(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响,确定最佳治疗方案,并探讨其内在机理。【方法】选用SPF级ICR雄性小鼠105只,随机分为正常组、模型组、5个中药治疗组(即黄芪当归组分优化方1~5组)。模型组和治疗组于气管内注射博莱霉素(剂量为5 mg/kg)复制小鼠肺纤维化模型,在第21天时剪取小鼠肺组织,采用碱水解法检测羟脯氨酸(HYP)的含量;苏木素—伊红(HE)染色及Mallory氏染色,观察肺组织形态变化;聚合酶链反应(PCR)技术检测肺细胞新生相关基因转化生长因子(TGF)-β、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。【结果】HE染色及Mallory氏染色结果显示,5个中药治疗组较模型组肺纤维化程度均有所改善,其中优化方1组改善明显,肺泡结构恢复较好。治疗组小鼠的21 d死亡率较模型组均有所降低,且优化方1组、5组作用显著,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,治疗组小鼠肺组织HYP含量各有不同程度的降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。TGF-β、VEGF基因表达水平模型组均高于正常组,治疗各组(除优化方5组TGF-β表达外)较模型组有不同程度的降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。【结论】黄芪水提物和当归醇提物所占比例较大时,可降低肺中HYP的含量,抑制TGF-β、VEGF表达水平,从而改善小鼠肺纤维化的程度。
- 耿青霞赵宏照宗晨钟李丽娜王淑艳高誉珊董瑞娟
- 关键词：肺纤维化黄芪提取物当归提取物基因表达调控小鼠
- 颐脑解郁复方对卒中后抑郁大鼠行为学及海马CA1区病理损伤的影响被引量：11
- 2017年
- 目的探讨颐脑解郁复方对脑卒中后抑郁(PSD)大鼠行为学和海马CA1区病理损伤的干预作用。方法将168只SPF级SD大鼠随机分为正常组、假手术组、卒中组、PSD组、西药组和中药组,正常组、假手术组各24只,其余组各30只。正常组不干预,假手术组不插入线栓,卒中组仅行大脑中动脉阻塞手术,PSD组、西药组、中药组卒中术后1周应用慢性束缚应激1周复合单笼饲养法制备PSD模型。造模开始时,西药组灌胃盐酸氟西汀,中药组灌胃颐脑解郁复方,其余各组灌胃蒸馏水,每日1次。第2、4、8周末,各组大鼠进行旷场试验等行为学测试,HE染色观察海马CA1区病理变化。结果除第2周外,同一时间点中药组大鼠各项行为学评分均高于PSD组。同一时间点中药组大鼠海马CA1区较PSD组结构完整,细胞排列整齐,形态正常。结论颐脑解郁复方可改善大鼠PSD症状,并对海马CA1区具有保护作用。
- 田会玲李小黎唐启盛李侠李庆盟高誉珊张雯孙新月邵珺
- 关键词：行为学
- 电针“百会”“涌泉”对6月龄APP/PS1双转基因小鼠行为学及海马Dynein、CTSD水平影响的研究被引量：1
- 2022年
- 目的:从细胞内β-淀粉样蛋白(Aβ)及自噬溶酶体角度探讨电针干预阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:将20只6月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为电针组和模型组;10只6月龄雄性C57BL/6野生小鼠作为空白对照组。电针组针刺“百会”“涌泉”穴,双“涌泉”连接电针,留针15 min/次;空白对照组和模型组小鼠用与电针组相同的方法束缚15 min/次。隔日1次,共治疗6周。利用Morris水迷宫检测小鼠空间学习和记忆能力;透射电镜观察小鼠海马自噬体、自噬溶酶体情况;免疫荧光双标法观察小鼠海马CA1区CTSD和Aβ的共表达情况;Western blot(WB)法检测小鼠海马内Dynein和CTSD的相对表达量。结果:Morris水迷宫检测结果显示,在定位航行实验中,与空白对照组比较,模型组小鼠平均逃避潜伏期增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,电针组小鼠平均逃避潜伏期减少,差异有统计学意义(P<0.05)。在空间探索实验中,与空白对照组比较,模型组小鼠平均穿越平台次数减少,平台象限游泳路程减少,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,电针组小鼠平均穿越平台次数增加,平台象限游泳路程增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。透射电镜实验结果显示,空白对照组海马可观察到少量的自噬溶酶体;模型组海马有大量的自噬体堆积,主要是在神经元轴突末端,胞体核周可见许多自噬溶酶体;电针组海马神经元轴突中也可以观察到部分自噬体堆积,胞体核周可见部分自噬溶酶体。免疫荧光双标法结果显示,CTSD和Aβ在小鼠海马CA1区神经元内存在共表达。Western blot结果显示,与空白对照组比较,模型组动力蛋白中间链DIC表达量降低,CTSD表达量增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,电针组动力蛋白中间链DIC表达量增加,CTSD表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:8月龄APP/PS1双转基因小鼠海马神
- 张洋谭韵湘高誉珊杨晓坤栗晨璐薛卫国
- 关键词：DYNEIN
- 督脉电针对APP/PS1双转基因痴呆小鼠行为学和海马区Aβ沉积的影响被引量：10
- 2020年
- 目的观察督脉电针对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)小鼠行为学和海马区β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)表达的影响,探讨针刺疗法抗痴呆的作用机制。方法 7月龄雄性APP/PS1小鼠共20只,随机分为模型组,电针组,每组10只。以相同遗传背景的C57BL/6小鼠10只作为正常对照组,选取"百会""印堂""人中",隔天针刺干预1次,共15次。采用Morris水迷宫观察各组小鼠学习记忆能力变化,采用免疫组化法观察各组小鼠海马区Aβ表达含量。结果与对照组比较,模型组逃避潜伏期增长(P<0.01),游泳距离增加(P<0.01),游泳速度无统计学差异,首次跨越原平台时间延长(P<0.01),距原平台平均距离增加(P<0.01),海马区Aβ表达增多(P<0.01);与模型组比较,电针组逃避潜伏期缩短、游泳距离减少(均P<0.01),游泳速度无统计学差异,首次跨越原平台时间减少、距原平台平均距离缩短(均P<0.05),海马区Aβ表达减少(P<0.01)。结论督脉电针干预可降低Aβ沉积,而提高APP/PS1双转基因小鼠学习记忆和空间探索能力。
- 邵淑君李华岳邬继红唐银杉高誉珊张淑静向杜炼
- 关键词：督脉电针水迷宫Β-淀粉样蛋白
- 加味桔梗汤对慢传输型便秘小鼠肺肠组织神经肽含量的影响被引量：18
- 2013年
- 目的观察宣肺中药(加味桔梗汤)对便秘小鼠肠道传输功能和肺、肠组织速激肽A(NKA)、血管活性肠肽(VIP)含量的影响,从神经肽角度探讨加味桔梗汤防治慢性传输型便秘的现代生物学机制,"肺合大肠"脏腑相关联络机制。方法 40只小鼠随机分为正常组、模型组、模型给药组及正常给药组,采用自身粪便与复方地芬诺酯(2 mg/kg)联合灌胃法建立慢传输型便秘模型。模型给药组及正常给药组以加味桔梗汤(12 g/kg)灌胃,正常组、模型组以蒸馏水灌胃,连续7 d。观察小鼠排便情况,测定肺、肠组织中NKA和VIP含量。结果与正常组比较,模型组小鼠首粒黑便时间延长,4 h黑便粒数与重量明显减少,肺肠组织中NKA含量明显升高,VIP含量明显降低;与模型组比较,模型给药组首粒黑便时间缩短,4 h排便粒数与重量增加,肺肠组织中NKA含量明显降低,肺组织中VIP含量明显升高。结论加味桔梗汤可改善便秘小鼠肠道传输功能,其机制可能与调节肺、肠组织中神经肽NKA、VIP的含量相关。
- 郑丰杰李宇航许红高誉珊孙燕王毅王玥琦
- 关键词：加味桔梗汤肺合大肠神经肽小鼠
