黄素文
- 作品数：30 被引量：102H指数：6
- 供职机构：宁波出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目浙江省自然科学基金宁波市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 牛副结核分枝杆菌LAMP快速检测方法的建立被引量：11
- 2012年
- 为建立牛副结核分枝杆菌(MAP)的快速检测方法,本研究采用环介导等温扩增(LAMP)技术,以MAP的IS900基因序列为靶基因设计特异性引物,建立了MAP特异性的LAMP快速检测方法。经反应条件优化,检测结果显示,建立的LAMP检测方法具有良好的特异性,最低见测量为0.53 pg;与其他病原菌无任何交叉反应。临床样品检测与行业标准的符合率为100%。该LAMP检测方法可以用于MAP的常规检疫。
- 王建峰黄素文刘思国倪建波王春张吉红于纪棉朱堂明黄绍棠
- 关键词：环介导等温扩增
- 淡水小龙虾主要过敏原原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫活性鉴定被引量：18
- 2011年
- 目的:克隆、表达淡水小龙虾肌肉中主要过敏原原肌球蛋白(tropomyosin),并对其免疫活性进行鉴定。方法:根据甲壳类的泛过敏原tropomyosin基因的高度保守性设计简并引物,通过RT-PCR克隆出淡水小龙虾虾肉中过敏原tropomyosin的全长基因。将该基因与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经诱导异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,Ni2+亲和层析柱纯化后,用Western blot检测该重组蛋白的免疫活性。结果:序列分析显示该基因包括一个编码284个氨基酸的开放阅读框,与已知虾、蟹、龙虾等的过敏原tropomyosin基因有较高同源性(>80%)。根据过敏原的命名规则,将其命名为Proc 1,并提交GenBank数据库,登录号为FJ769183。重组小龙虾tropomyosin在大肠杆菌中能高效的表达,Western blot检测结果显示该重组蛋白具有良好的免疫活性。结论:研究成功表达了具有免疫活性的淡水小龙虾原肌球蛋白,为虾过敏性疾病的诊断和治疗奠定了基础。
- 黄素文杨文潮朱海王建峰倪健波吕志平冼静雯刘志刚
- 关键词：淡水小龙虾原肌球蛋白免疫活性
- 马动脉炎病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量：1
- 2011年
- 为建立一种快速、简便、特异性高的马动脉炎病毒反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法,针对马动脉炎病毒膜基质蛋白M基因的保守序列设计特异性引物,优化反应条件,建立了马动脉炎病毒的RT-LAMP检测方法并对其特异性和灵敏性进行了检测。结果显示,建立的RT-LAMP检测方法具有良好的特异性,灵敏度为0.12pg,是普通RT-PCR的100倍,检测时间仅需1h,肉眼即可观察检测结果。表明建立的RT-LAMP检测方法可用于进出口马动脉炎病毒的检疫。
- 黄素文于纪棉倪健波王建峰杨文潮张超张吉红相文华
- 关键词：马动脉炎病毒检疫
- 赤羽病病毒real-time RT-PCR检测方法的建立与初步应用
- 根据GenBank中已发表的赤羽病病毒(Akabanevirus,AKAV)的S基因序列,建立了检测AKAV的real-timeRT-PCR方法。特异性试验表明,该方法对AKAV的检测有高度的特异性,与牛病毒性腹泻病毒(...
- 张吉红闻伟刚李如松黄素文倪健波王建峰
- 关键词：赤羽病病毒核酸检测
- 文献传递
- 尿样中沙丁胺醇的检测被引量：4
- 2007年
- 利用沙丁胺醇和克伦特罗在分子结构上非常相似的特点,克伦特罗抗体与沙丁胺醇反应中具有一定的交叉性,在现有的克伦特罗检测系统的基础上建立沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测体系。试验表明该方法完全可以应用于尿样中沙丁胺醇的检测。
- 黄素文周宏斌赵秀玲倪健波黄绍棠
- 关键词：沙丁胺醇交叉性
- 赤羽病病毒套式RT-PCR检测方法的建立与初步应用被引量：11
- 2010年
- 根据GenBank中已发表的赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了3条特异性引物,建立了检测AKAV的套式RT-PCR方法。特异性试验表明,该方法可以特异扩增出AKAV的S基因片段,但从牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)等13种对照病毒中均不能扩增出目的条带。敏感性试验表明,套式RT-PCR能够扩增10-5稀释度的病毒RNA(核酸含量约1.18 ng/μL),比普通RT-PCR高出1 000倍。用此方法检测130份奶牛血清样品与1份流产胎儿病料,均未检测到阳性样本,但AKAV在血清模拟样品中可被有效检出。研究结果表明,该方法灵敏、特异,为AKAV的检测提供了一个快速、有效的手段。
- 张吉红黄素文闻伟刚李如松
- 关键词：赤羽病病毒套式RT-PCR方法流产胎儿核酸含量GENBANK
- 溶藻弧菌相关分离株的分子及VITEK鉴定被引量：12
- 2012年
- 哈维群弧菌是弧菌属的核心菌群,包括溶藻弧菌在内的6个种在表型和遗传型上均十分相似,要准确鉴定各种有一定难度。看家基因的研究及生化鉴定系统的出现为弧菌鉴定提供了多种方法,本文比较了16S rRNA基因、toxR基因和pyrH基因以及VITEK 2 COMPACT GN鉴定卡对溶藻弧菌相关分离株的分辨力。哈维群弧菌基因组内16S rRNA基因是多拷贝的,且拷贝间序列差异大于种间差异,不适用于种的鉴定。单拷贝基因toxR和pyrH序列种内差异均小于种间差异。基于toxR基因相似性比较可清楚地将18个疑似溶藻弧菌分离株和5个参比株归并到4个种;toxR基因系统发育学分析也显示,哈维群弧菌各种独立地聚类分支,且溶藻弧菌种内存在两个明显的聚类分支,说明两个分支的溶藻弧菌具有独立的进化方向。pyrH基因的相似性比较和发育学分析也得到类似的结果,但pyrH基因具有较强的保守性,因而分辨力稍低于toxR基因。VITEK 2 COMPACT GN鉴定卡在鉴定溶藻弧菌时也有一定的错误率,且鉴定谱较窄。因此,建议在实际应用中采用toxR基因比对作为溶藻弧菌快速鉴定的主要手段,可再选用pyrH基因对鉴定结果进行验证。
- 郭静Liswaniso Gadafii郭安南阎永伟张德民裘琼芬黄素文戴海平
- 关键词：溶藻弧菌RDNA
- 淡水小龙虾过敏原胶体金快速检测试纸条的研制被引量：3
- 2014年
- 目的研制虾过敏原胶体金快速检测试纸条。方法利用克隆表达的具有变应原活性的重组淡水小龙虾原肌球蛋白制备虾过敏原单抗和多抗,用胶体金偶联虾过敏原单抗;将过敏原多抗和羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维膜上,分别作为检测线和质控线,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装切割成胶体金免疫层析快速检测试纸条。结果使用研制的试纸条检测淡水小龙虾、日本沼虾、虾蛄、河鲫鱼、带鱼、猪肉和牛肉等样品提取液,只有淡水小龙虾出现阳性条带,其余样品均为阴性,无明显交叉反应。此试纸条的检测灵敏度也很高,达到100 ng/ml。结论该试纸条重复性好、操作简单、灵敏度高、特异性强,能快速检测食品中的淡水虾过敏原,具有很重要的应用推广价值。
- 黄素文王建峰朱海倪健波刘志刚杨文潮
- 关键词：淡水小龙虾胶体金试纸条
- 饲料中沙丁胺醇快速检测技术研究被引量：3
- 2007年
- 本实验在现有的克伦特罗检测系统上建立了沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测体系。结果表明,该方法在饲料中沙丁胺醇的检测中完全可行。
- 黄素文周宏斌赵秀玲倪健波黄绍棠孙鸣
- 关键词：沙丁胺醇
- 马病毒性动脉炎两种快速诊断方法的建立和应用
- 马病毒性动脉炎(Equineviralarteritis，EVA)是由马动脉炎病毒引起的一种通过呼吸道或生殖器官传播的传染病，是危害养马业的重大疾病之一，被世界动物卫生组织(OIE)列入检疫名录。近年来，我国社会经济不断...
- 黄素文
- 关键词：马动脉炎病毒N蛋白间接ELISA
