黎靖宇
- 作品数:5 被引量:15H指数:2
- 供职机构:广西医科大学更多>>
- 发文基金:广西科技厅资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 昆明种小鼠胚胎神经干细胞的分离及培养被引量:5
- 2008年
- 目的:在神经干细胞的分离培养过程中,国内外的报道多数是用胰蛋白酶对组织细胞进行消化,但是消化时间比较难把握。采用胰酶消化与机械分离法相结合的方式对昆明种小鼠胚胎脑神经干细胞进行分离、培养和初步的免疫组织化学检测,为相关研究建立实验条件。方法:实验于2006—10/2007-09在广西医科大学基础医学实验室完成。实验室为广西重点实验室、基础医学博士后工作站。①实验材料:孕14-16d的昆明种小鼠由广西医科大学实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:分离昆明种小鼠胎鼠的脑组织,经胰酶消化加机械吹打后,在加入碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的B27无血清培养基中培养。③实验评估:用免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞。结果:在无血清DMEM/F12培养液中,加入碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子及B27的条件下,培养24h后可见细胞以悬浮方式生长,三五聚集成团块,48h后形成由十数个至数十个细胞组成的,大小不等的细胞球,形态规则,细胞无突起,形成典型的神经球,可传代。免疫细胞化学法检测显示,细胞表达神经巢蛋白。结论:①来自昆明种小鼠胎脑的神经干细胞能在体外培养、增殖并具有增殖传代能力。②无血清B27培养基添加表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子有利于神经干细胞的体外培养和促进其增殖。
- 宫晓洁孙莉黎靖宇袁路刘琦陈维平
- 关键词:神经干细胞神经球碱性成纤维细胞生长因子表皮细胞生长因子
- 小鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及形态学观察被引量:10
- 2008年
- 目的建立一种简单实用的小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离培养方法,通过了解其细胞生物学特性,为MSCs的应用提供实验依据。方法采用差速贴壁法体外分离、扩增MSCs,倒置显微镜观察原代及传代细胞的形态及生长过程。结果在小鼠骨髓间充质干细胞的培养过程中,血液系细胞在换液过程被去除,成纤维细胞污染经差速贴壁法也可去除。获得的骨髓间充质细胞形态较均一,生长状态良好。结论采用差速贴壁培养法可获得一定纯度的MSCs,此法简单、实用,并且获得的细胞生长状态良好,增殖能力强.
- 宫晓洁孙莉黎靖宇陈维平
- 关键词:骨髓间充质干细胞小鼠形态学生物学特性
- 神经干细胞体外培养体系的建立
- 本文对神经干细胞体外培养体系的建立进行了研究。文章探讨了替代细胞因子培养神经干细胞的适合技术和条件,建立了神经干细胞体外培养体系,降低实验成本,为建立细胞资源库打下了基础。研究表明:
1.新生昆明小鼠大脑海马能...
- 黎靖宇
- 关键词:神经干细胞胚胎细胞细胞培养
- 文献传递
- 建立不同细胞来源的饲养层
- 目的:近年来的研究表明,除鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast,MEF)外,多种细胞可作为饲养层细胞,如:骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)、睾丸支持...
- 袁路陈维平黎靖宇
- 文献传递
- 昆明种小鼠胚胎神经干细胞的分离与培养(英文)
- 2009年
- 背景:对于神经千细胞的分离培养,目前多采用胰蛋白酶对组织细胞予以消化,但消化时间较难把握。目的:采用胰酶消化与机械分离法相结合的方式对昆明种小鼠胚胎脑神经干细胞进行分离、培养,并进行初步的免疫组织化学检测。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006~10/2007—09在广西医科大学基础医学实验室完成。材料:孕14-16d的昆明种小鼠由广西医科大学实验动物中心提供。方法:分离昆明种小鼠胎鼠的脑组织,经胰酶消化加机械吹打后,在加入碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的B27无血清DMEMIF12培养基中培养。主要观察指标:用免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞。结果:培养24h后,细胞以悬浮方式生长,聚集成团:48h后形成由数十个细胞组成的细胞球,形态规则,体积大小不等,细胞无突起,形成典型的神经球,可传代扩增。免疫细胞化学染色结果示细胞巢蛋白呈阳性表达。结论:在含有表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的无血清B27培养基条件下,有利于小鼠胚胎神经干细胞的体外培养和传代增殖。
- 宫晓洁孙莉黎靖宇袁路刘琦陈维平
- 关键词:神经干细胞表皮细胞生长因子无血清