何宏彬
- 作品数:8 被引量:66H指数:6
- 供职机构:东北农业大学生命科学学院更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 犬瘟热病毒XJ株的分离鉴定被引量:11
- 2002年
- 应用犬肺原代巨噬细胞,从新疆阿克苏送检的一只病死犬肺脏中分离出1株犬瘟热病毒,并对其进行了形态学、理化学、血清学、动物感染试验、分子生物学鉴定。结果证明所分离的XJ株为1株CDV的强毒株。
- 乔军孟庆龄夏咸柱何宏彬范泉水
- 关键词:犬瘟热病毒
- 犬Ⅰ型腺病毒TN株的分离鉴定被引量:9
- 2001年
- 应用 MDCK细胞采用单层吸附接毒和带毒传代的方法 ,从新疆阿克苏送检的犬粪便中分离出 1株犬腺病毒 ,并对其进行了形态学、理化学、血清学、动物感染试验、分子生物学鉴定。结果证明所分离的 TN株为 1株CAV-
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- 用套式PCR法检测犬冠状病毒的研究被引量:4
- 2000年
- 根据 Gen Bank中 Wesseling发表的犬冠状病毒 K378株纤突蛋白基因序列 ,设计合成了能扩增 372 bp基因片段的套式引物。用异硫氰酸胍—酚—仿一步抽取法提取细胞总 RNA进行反转录 ,再以此产物进行套式 PCR扩增 ,并筛选出最佳套式 PCR扩增条件。结果经套式 PCR扩增能得到与设计大小相同的产物 ,并且不扩增犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬 型腺病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验表明 ,此法能扩增出犬冠状病毒强毒细胞培养物 (毒价为 1 0 -4.2 TCID5 0 / 0 .1 ml) 1 0 -6稀释的反转录产物 ,远高于常规 RT PCR。经初步应用表明 。
- 乔军孟庆玲贾桂珍何宏彬夏咸柱
- 关键词:犬冠状病毒
- 塔里木野鸡新城疫病毒T_20株的分离鉴定被引量:1
- 2001年
- 应用 10日龄鸡胚 ,从新疆塔里木 1只病死的野鸡脾脏中分离出 1株副粘病毒 ,并对其进行了形态学、理化学、血清学、动物感染试验、分子生物学鉴定。结果证明所分离的 T2 0 株为 1株 NDV的强毒株。
- 乔军孟庆龄夏咸柱何宏彬范泉水
- 关键词:野鸡新城疫病毒
- 犬瘟热病毒反转录—聚合酶链反应检测方法的建立及初步应用被引量:11
- 2001年
- 根据 Gen Bank中 Barrett报道的犬瘟热病毒弱毒株 Onderstepoort的血凝蛋白基因序列 ,设计合成了一对能扩增 76 0 bp基因片段的引物。用异硫氰酸胍 -酚 -仿一步抽提法提取细胞总 RNA进行反转录 ,再以此产物为模板进行 PCR扩增 ,筛选出最佳扩增条件。结果以此对引物进行 PCR扩增能得到与设计片段大小相同的产物 ,并且不扩增犬细小病毒、犬 I型腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验证实 ,此法能扩增出稀释 1 0 0 0倍的 CDV强毒细胞培养物 ( 1 0 5 .1 TCID5 0 /0 .1 ml)的反转录产物 ,其敏感性远高于电镜负染和荧光抗体染色法。经初步应用表明 ,此法可用于犬瘟热的临床诊断和实验研究。
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- 关键词:犬瘟热病毒反转录-聚合酶链反应
- 用PCR法检测东北虎感染猫细小病毒的研究被引量:7
- 2001年
- 根据GenBank中已发表的猫细小病毒基因组中的保守序列 ,利用Goldkey软件设计了一对能扩增 750bp片段大小的引物 ,对某动物园 1只病死东北虎的脾脏样品进行了PCR检测。结果得到了与设计大小完全相符且与标准猫细小病毒扩增产物大小一致的特异核酸带 ,同时对犬瘟热、犬腺病毒、轮状病毒的核酸扩增结果均为阴性。敏感性试验表明 ,此法可检出血凝价为 1 2 8×脾脏匀浆液上清 1 0 - 5倍稀释的模板 ,远高于血凝试验的敏感性 ,为虎、狮。
- 乔军孟庆龄夏咸柱何宏彬
- 关键词:东北虎
- 用半套式PCR检测犬瘟热病毒的研究被引量:8
- 2000年
- 根据GenBanK中Barrett报道的犬瘟热病毒Onderstepoort弱毒株的附着或血凝蛋白基因序列,设计合成了能扩增760bp基因片段的半套式引物。用异硫氰酸胍—酚—仿一步抽取法提取细胞总RNA进行反转录,再以此产物进行半套式PCR扩增,并筛选出最佳PCR扩增。结果经半套式PCR扩增能得到与设计片段大小相同的产物,并且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验表明,此法能扩增出CDV强毒细胞培养物(毒价为10-5.8TCID50/0.1mL)10-6稀释的反转录产物,远高于常规PCR。经初步应用表明,此法可用于天瘟热的临床诊断和实验研究。
- 乔军孟庆龄陈瑛何宏彬夏咸柱
- 关键词:犬瘟热病毒
- 犬瘟热、犬冠状病毒联合RT-PCR检测方法的建立及应用被引量:27
- 2002年
- 用CDV、CCV特异性引物对同一样品中CDV和CCVRNA模板进行联合RT PCR扩增 ,并对扩增条件进行了优化。结果同时得到了两条大小与试验设计完全相符的特异性扩增带 ,且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒、犬副流感病毒、轮状病毒的核酸。敏感性试验表明 ,该联合PCR能检测出 10 - 4倍稀释的CDV模板 (10 6 6 TCID50 / 0 1mL)和 10 - 3倍稀释的CCV模板 (10 5 9TCID50 /0 1mL)。通过对 7份临床发病犬病料的检测 ,其阳性检出率高于电镜负染检查。初步应用表明 ,此法具有高度敏感、特异、准确、快速等特点 ,适用于兽医临床对CDV。
- 乔军孟庆龄夏咸柱何宏彬范泉水
- 关键词:犬瘟热犬冠状病毒RT-PCR检测特异性引物敏感性兽医临床