何峰
- 作品数：14 被引量：42H指数：4
- 供职机构：中山大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程理学更多>>
- 共轭亚油酸单体诱导乳腺癌细胞SKBr3凋亡的PPARγ信号通路研究被引量：3
- 2009年
- cis9,trans11-CLA和trans10,cis12-CLA是共轭亚油酸(CLA)二种抑瘤活性最强的主要单体.在以前报道二者诱导乳腺癌细胞凋亡的工作基础上,进一步探讨共轭亚油酸单体诱导乳腺癌细胞SKBr3凋亡的途径及机制.采用RT-PCR和Westernblot等方法,证实了CLA在SKBr3细胞中可显著提高PPARγ的转录及蛋白质表达水平,并发现CLA对PPARγ与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase3的表达影响呈同步相关性,并表现出时间和剂量依赖性.通过PPARγ抑制剂GW9662实验表明它们之间存在协同关系.首次提出了PPARγ-Bcl-2-Caspase3信号通路的SKBr3细胞凋亡途径,为CLA有望作为PPARγ新型调节剂诱导肿瘤细胞凋亡在临床应用提供实验证据.
- 袁贤琳何峰陈青杨湘玲杨得坡王冬梅钟翎
- 关键词：细胞凋亡
- HPLC法测定注射用兰索拉唑中主药及有关物质的含量被引量：8
- 2007年
- 目的:建立以高效液相色谱法测定注射用兰索拉唑中主药及有关物质含量的方法。方法:色谱柱为Shim-packC18,流动相为甲醇-水-三乙胺-磷酸(620∶380∶5∶1·5),流速为1mL·min-1,检测波长为284nm,进样量为20μL。结果:兰索拉唑检测浓度的线性范围为16~320μg·mL-l(r=0·9999);平均回收率为100·0%(RSD=1·08%,n=9);有关物质含量均为0·147%。结论:该方法简便、快速、准确、重现性好,适用于该制剂的质量控制。
- 浦锡娟何峰
- 关键词：高效液相色谱法兰索拉唑
- 原小檗碱类多靶点抗老年性痴呆症药理作用被引量：8
- 2009年
- 原小檗碱是一类异喹啉生物碱,具有相同的药效基团。本研究检测了以小檗碱和四氢黄藤素为代表的原小檗碱多靶点抗AD效应及分子作用机制。以人神经母细胞瘤SH-SY5Y为研究对象,利用Western blot检测药物对细胞全长APP和BACE1蛋白水平的影响;ELISA技术检测细胞外可溶性淀粉样前体蛋白α(sAPPα)的分泌;酶活性检测试剂盒检测乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果显示,药物处理细胞24 h后,二者均能显著地抑制BACE1蛋白的表达,并可使sAPPα的分泌显著增加,但未见细胞APP蛋白含量明显变化,同时对该细胞的AchE的活性具有显著的抑制作用。以上结果证明:原小檗碱生物碱药理活性涉及预防和减少Aβ沉积和增强乙酰胆碱对脑胆碱受体的作用,并通过细胞自身的代谢增加具有神经营养作用的sAPPα的分泌。提示此类化合物具有多靶点抗老年痴呆的潜能,通过结构优化改造,将有望获得副作用小的新一代抗AD有效药物。
- 陈青奉文尚何峰钟翎
- 关键词：淀粉样前体蛋白乙酰胆碱酯酶
- 亚油酸及共轭亚油酸异构体纯化技术优化被引量：4
- 2009年
- 以红花籽油制备的亚油酸样品和共轭亚油酸样品为原料,采用溶剂低温结晶法和尿素包合法对共轭亚油酸与亚油酸进行分离纯化,结果表明,与溶剂结晶法相比,尿素包合法对共轭亚油酸和亚油酸有更好的纯化效果。正交实验得到的尿素包合法最佳工艺条件为:m(共轭亚油酸)∶m(尿素)=1∶3,m(尿素)∶V(乙醇)=1∶5,4℃放置24 h得到含量95.17%的共轭亚油酸;m(亚油酸样品)∶m(尿素)=1∶3,m(尿素)∶V(乙醇)=1∶5,-10℃放置24 h得到含量99.93%的亚油酸。
- 孙磊李杰梅冀军峰鲁冰山何峰杨得坡
- 关键词：共轭亚油酸亚油酸纯化溶剂结晶尿素包合
- 条件培养基抑制L-抗坏血酸钠介导的小鼠黑色素瘤细胞凋亡
- 2012年
- 目的探讨肿瘤细胞B16F10通过自分泌对抗由L-抗坏血酸钠(VitCNa)介导的凋亡作用。方法常规在75 cm^2培养瓶中培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10,待细胞长至90%～95%融合时吸取原DMEM/高糖培养液,用PBS反复清洗后加入无血清的DMEM/高糖10ml在培养箱中培养6～8 h,收集培养液用2500 r/min离心5min后上清用0.22μm滤器过滤,-20℃保存备用,在6孔板中每孔接种1×10~6 B16F10,常规培养24h后,实验组每孔加入2ml条件培养液(含有10%胎牛血清),对照组用普通培养液,两组均用10 mmol/L VitC Na促凋亡,分别在3、6、24 h观察细胞凋亡情况,hoechst染核,收集细胞免疫荧光检测caspase3和TUNEL、RT-PCR检测Bcl2表达。进而分离出条件培养液中相对分子质量大于5 000和小于5 000成分,分别煮沸,用蛋白酶K灭活后对B16F10促凋亡。结果发现条件培养基能够抑制VitC Na介导的小鼠黑色素瘤细胞B16F10凋亡,抗凋亡成分小于5 000,且不能被煮沸和蛋白酶K灭活,提示其是小分子抗凋亡物质。结论 B16F10可以分泌出拮抗细胞凋亡的小分子物质。
- 杨旭辉夏添余伟华卢晓芳项鹏何峰
- 关键词：黑色素瘤细胞凋亡条件培养基
- Nestin特异性RNA干扰真核表达载体的构建及稳定株筛选被引量：2
- 2012年
- 目的构建人nestin基因特异的RNA干扰质粒,为探讨抑制nestin基因表达对人黑色素瘤细胞生物学行为调控的研究奠定基础。方法分别用30、50、80 nmol/L干扰或80 nmol/L对照siRNA转染人黑色素瘤细胞株UACC903,48 h后用免疫荧光、RT-PCR和Western-blot鉴定nestin基因表达并筛选有效的序列,用有效或对照组序列的正义链和反义链,通过酶切、连接、转化和筛选,获得长期下调人nestin基因表达的慢病毒载体,并包装慢病毒感染人UACC903细胞,免疫组化和Western-blot鉴定干扰有效,以此获取nestin表达下调的UACC903细胞株。结果重组质粒成功转化高感受态大肠杆菌,经XhoⅠ和HPAⅠ双酶切,琼脂糖凝胶电泳分析,结果表明寡核苷酸成功插入到预计位点,经测序鉴定,序列完全正确。干扰组或对照组慢病毒感染UACC903细胞后与对照组比较,干扰组mRNA和蛋白表达明显降低。结论成功构建了针对人nestin基因的特异性shRNA真核表达载体,转染细胞后可抑制nestin基因的表达,为进一步研究其基因功能奠定了基础。
- 杨旭辉夏添余伟华钟跃思项鹏何峰
- 关键词：RNAINESTIN黑色素瘤细胞
- 影响宫腔内人工授精妊娠率的临床及精液因素分析被引量：6
- 2012年
- 目的探讨促排卵方案、子宫内膜因素、处理后前向运动精子总数和活动率、受精次数对人工授精妊娠率的影响。方法回顾性分析本中心2009-2010年收治的677对病人促排卵方案,子宫内膜类型及厚度,受精次数,将前向运动精子总数分为7组,即A:(4～9)×106,B:(10～12)×106,C:(13～15)×106,D:(16～20)×106,E:(21～25)×106,F:(26～30)×106,G:>30×106,分别比较各组患者年龄、不孕年限、活动率对临床妊娠率的影响。结果 677个周期共获得88例生化妊娠,79例临床妊娠,平均生化妊娠率为13.15%,临床妊娠率为11.81%。促排卵方案以HMG组最好,子宫内膜类型为三线征及内膜厚度大于8mm是妊娠达到10%以上的必要条件。双次人工授精妊娠率(15.27%)明显高于单次(7.57%)。各活动精子数量组妊娠率分别为0、14.37%、11.92%、15.09%、8.33%、20.34%、6.06%,A组临床妊娠率最低,与其余组比较差异有统计学意义,F组活动率和妊娠率最高,与其余组比较差异有统计学意义。结论促排卵方案以HMG组最好;三线征子宫内膜且厚度大于8mm、(26～30)×106精子密度和84%以上的活动率是获得高妊娠率的先决条件;双次人工授精优于单次。
- 杨旭辉杨少芬钟跃思黄志承殷潜生陈创奇黄郁强何峰
- 关键词：活动率人工授精妊娠率
- 慢病毒介导shRNA沉默巢蛋白表达对人黑色素瘤细胞转移特性的影响被引量：3
- 2012年
- 目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默黑色素瘤细胞株UACC903巢蛋白(nestin)的表达,研究其对黑色素瘤细胞转移能力的影响。方法以人nestin mRNA编码序列作为干扰靶点,以慢病毒基因PLL3.7作为质粒载体,构建靶向人nestin的shRNA表达质粒,另构建不针对任何已知mRNA的阴性对照shRNA表达质粒,分别感染UACC903细胞并流式分选获得高纯度的nestin干扰或对照组细胞。应用RT-PCR、免疫荧光及Western blotting检测不同组别nestin表达的变化。分别用Transwell侵袭试验检测跨膜细胞的数量评估各组黑色素瘤细胞的侵袭能力,划痕法检测迁移能力改变。光镜观察各组细胞形态变化,免疫荧光检测E-cadherin、N-cadherin和β-catenin在不同组别的表达变化。结果成功构建nestin shRNA慢病毒载体nestin-RNAi-LV。RT-PCR及免疫荧光结果显示干扰组UACC903细胞nestin mRNA及蛋白表达水平较对照组显著降低。nestin下调的UACC903细胞黏附、侵袭及迁移能力下降(P<0.05)。结论慢病毒介导的shRNA能有效地静默食管癌细胞nestin基因的表达,能抑制黑色素瘤细胞UACC903迁移。
- 杨旭辉夏添余伟华卢晓芳项鹏何峰
- 关键词：人黑色素瘤巢蛋白
- PBL与LBL相结合在留学生医学有机化学教学中的应用探索
- 随着经济全球化的发展、我国高等教育及医疗水平的提高，越来越多的外国留学生来中国高校学习医学知识，留学生教学成为我国高等教育的重要组成部分。中山大学医科自上世纪五十年代末就开始进行留学生教学工作，在长期教学实践中，本文依据...
- 何峰黄爱东
- 关键词：高等教育医学有机化学留学生教学模式
- 文献传递
- 共轭亚油酸及其异构体亚油酸纯化技术优化及含量测定
- 本文涉及溶剂低温结晶法与尿素包合法对共轭亚油酸及亚油酸的分离纯化作用,与溶剂结晶法比较,尿素包合法对共轭亚油酸及红花籽油中的亚油酸有更好的纯化效果。采用正交设计得到了尿素包合法对这些物料的最佳工艺条件,即:共轭亚油酸:尿...
- 孙磊李杰梅王冬梅陈常青鲁冰山何峰杨得坡
- 关键词：共轭亚油酸亚油酸纯化溶剂结晶尿素包合
- 文献传递
