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空肠弯曲菌cdtA、cdtB、cdtC基因构建与表达: 目前,空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,C.jejuni)感染是全球范围内急性胃肠炎最常见的病因之一。更具严重后果的是该菌与格林-巴利综合征(Guillain-Barrésyndrome,GBS)有非...; 刘卫卫; 关键词：空肠弯曲菌候选疫苗 B细胞抗原表位; 文献传递

米勒·费希尔综合征的临床研究: 2010年; 目的探讨米勒·费希尔综合征的临床特点并对其进行综述。方法回顾分析8例米勒.费希尔综合征患者的临床特点。结果主要神经系统症状:头晕,恶心呕吐,视物模糊,视物成双,四肢无力,手足发麻感,行走不稳。主要神经系统体征:瞳孔直接及间接对光反射消失,双侧眼外肌麻痹,水平眼震,周围性面瘫,共济失调,深、浅感觉减退,腱反射减弱或消失。首发症状主要表现为头晕、视物成双和四肢无力。脑脊液蛋白升高8例,脑脊液细胞数无升高病例。肌电图检查示神经源性损害4例,脑电图异常3例。CT和MRI检查发现异常1例。激素和人血免疫球蛋白同时使用可有效缓解病情,7例患者出院时症状明显好转,1例不明显。结论米勒.费希尔综合征主要累及周围神经系统,临床表现相似,大多数预后较好。; 赵子春李震中朱一飞李鑫刘卫卫王红; 关键词：格林-巴利综合征颅神经

吉兰-巴雷综合征相关空肠弯曲菌waaF基因序列对比研究被引量：1: 2011年; 目的了解吉兰-巴雷综合征(GBS)相关空肠弯曲菌(C.jejuni)waaF基因核酸及氨基酸序列特征,分析其遗传进化关系。方法选取3株致GBS C.jejuni菌株,提取其基因组测序。应用生物信息学软件,以NCTC11168序列为参照进行比对,分析waaF基因碱基及相应氨基酸突变、二级结构变化,计算遗传距离。结果 3株致GBS C.jejuni waaF基因均由960个碱基构成,相同碱基突变位点有5个,1081462位zhanxingT→A,lulei、qiaoyuntaoT→G导致相同氨基酸改变:185位D→E,该位点导致α螺旋结构的改变。3株致GBS C.jejuni waaF基因遗传距离较小。结论 GBS相关C.jejuni菌株waaF基因序列存在相同碱基及氨基酸突变及二级结构变化,这可能与C.jejuni致GBS能力的改变相关。河北地区致GBS的C.jejuni在进化上存在聚类现象。; 陈娟李震中白欣立刘慧李鑫赵子春刘卫卫郭医杰邢丛丛李春岩; 关键词：吉兰-巴雷综合征空肠弯曲菌

空肠弯曲菌cdtA、cdtB、cdtC基因的克隆、序列分析及B细胞表位预测: 2010年; 目的预测和分析空肠弯曲菌(CJ)细胞扩张毒素(CDT)cdtA、cdtB、cdtC蛋白的二级结构和B细胞抗原表位,为CJ疫苗研制提供基础资料。方法 PCR扩增cdtA、cdtB、cdtC基因,克隆入pGEM-T载体并测序,对重组质粒测序后进行生物信息学分析。以cdtA、cdtB、cdtC基因推导的氨基酸序列为基础,采用Chou-Fasman法、Ganmier-Robson法和Karplus-Schulz法预测该蛋白二级结构;按Kyte-Doolittle方案、Emini方案和JamesonWolf方案预测其B细胞抗原表位。结果克隆的cdtA、cdtB、cdtC基因全长分别为874bp、913bp、711bp。发现cdtA的840-32bp序列完全与标准株NCTC11168的1-807bp序列一致,cdtB的841-42bp序列完全与标准株NCTC11168的1-798bp序列一致,cdtC的667-96bp序列完全与标准株NCTC11168的1-570bp序列一致。cdtA第11～44和54～90区段,cdtB第5～70、78～112、137～187区段,cdtC第119～140和145～193区段及其附近可能是CJ-cdtA、cdtB、cdtC蛋白的B细胞表位优势区。结论成功扩增空肠弯曲菌O∶19菌株cdtA、cdtB、cdtC基因,测序表明与标准株序列高度同源,已有文献证明cdtA、cdtB、cdtC基因在不同CJ菌株中高度保守,符合疫苗候选抗原的基本特征;预测出cdtA、cdtB、cdtC蛋白的B细胞抗原表位优势区,这将为CJ新型疫苗的设计和单克隆抗体的筛选等方面的研究提供重要信息。; 刘卫卫白欣立李震中张军峰李鑫赵子春李春岩; 关键词：诱导分化空肠弯曲菌 B细胞抗原表位

空肠弯曲菌cdtA及其高抗原肽段的原核重组质粒的构建和表达: 2010年; 目的空肠弯曲菌细胞扩张毒素cdtA及其高抗原肽段蛋白人工表达。方法使用PCR方法获得cdtA、cdtA1、cdtA2编码的基因,经确证后将该基因克隆到谷胱甘肽转移酶融合表达载体(pGEX-5x-1)中,构建了pGEX-5X-1-cdtA、cdtA1、cdtA2表达质粒,在大肠杆菌BL21中获得了相应表达。结果 pGEX-cdtA、cdtA1、cdtA2重组菌株具有明显的表达带,其分子量与预期的结果相同。结论成功构建了cdtA及其高抗原肽段的原核表达重组质粒,并表达出相应蛋白为其免疫原性分析及研制疫苗奠定了基础。; 刘卫卫白欣立李震中张军峰李鑫赵子春李春岩; 关键词：空肠弯曲菌重组质粒

空肠弯曲菌Cj1136、Cj1138、Cj1139基因对比研究被引量：2: 2009年; 目的了解吉兰-巴雷综合征（GBS）相关空肠弯曲菌（C．jejuni）的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因序列特征，并同GenBank中的非GBS相关C．jejuni菌株对应序列进行比较，找出可能使C.jejuni菌株具有致GBS能力的碱基突变。方法选取分离自GBS患者粪便并经动物模型证实为致GBS的AMAN型C.jejuni 3株进行培养并提取基因组DNA测序。将基因测序结果与NCTC11168菌株进行对照比较，寻找此3株C.jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因突变位点，并计算此3株致GBS C. jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因序列间的遗传距离。结果3株致GBS C．jejuni菌株的Cj1136基因由1173个碱基构成；Cj1138基因由1170个碱基构成；Cj1139基因由912个碱基构成，与NCTC11168的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因序列相比，此3株致GBS C. jejuni中只有Cj1138存在2个相同的碱基突变。遗传距离计算，3株致GBS C．jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因之间最大遗传距离为2．1％。结论与NCTC11168相比GBS相关C.jejuni中Cj1138基因序列存在相同碱基突变，这些碱基突变可能与C.jejuni致GBS能力的改变相关。该3株致GBS C.jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因遗传距离较小，反映河北地区致GBS的C.jejuni在进化上存在聚类现象，具有一定的区域特征。; 李鑫李震中白欣立刘慧赵子春刘卫卫高爱民邢丛丛李春岩; 关键词：吉兰-巴雷综合征空肠弯曲菌基因

格林-巴利综合征相关空肠弯曲菌galE基因序列对比研究被引量：2: 2009年; 目的测定3株格林-巴利综合征（Guillain-Barre syndrome，GBS）相关空肠弯曲菌的galE基因序列，并同GenBank中的空肠弯曲菌菌株相应序列进行比较，了解致GBS的序列特征并分析其遗传进化关系。方法选取分离自GBS患者粪便并经动物模型证实为致GBS的3株AMAN型空肠弯曲菌菌株进行培养并提取基因组DNA测序。将基因测序结果通过与NCTC11168菌株进行对照比较寻找galE基因突变位点并对galE基因片段进行遗传距离计算。结果3株致GBS空肠弯曲菌菌株的galE基因均由987个碱基构成。与NCTC11168的galE基因序列相比，此3株空肠弯曲菌菌株gale基因核苷酸序列有4个相同碱基突变并导致了4个对应的相同氨基酸突变。遗传距离计算，zhanxing株与qiaoyuntao株距离为1．5％，zhanxing株与lulei株距离为1．6％，qiaoyuntao株与lulei株距离为0．5％。结论GBS相关空肠弯曲菌中galE基因核苷酸序列的确存在相同变异且发生变异概率较非GBS相关空肠弯曲菌明显增大，遗传距离反映了此3株致GBS的空肠弯曲菌具有一定的区域特征。; 李鑫李震中白欣立刘慧赵子春刘卫卫方保峰王红郭医杰李春岩; 关键词：格林-巴利综合征空肠弯曲菌

空肠弯曲菌cdtA、cdtB及cdtC真核表达重组载体的构建与表达被引量：1: 2010年; 目的以空肠弯曲菌(CJ)细胞扩张毒素(cytolethal distending toxi,CDT)cdtA、cdtB及cdtC为目的基因,构建CJ-cdtA、cdtB及cdtC基因的真核表达重组载体pcDNA3.1(+)-cdtA,pcDNA3.1(+)-cdtB,pcDNA3.1(+)-cdtC,为CJ核酸疫苗的研制提供实验材料。方法用Primer5.0软件分析GenBank中空肠弯曲菌细胞扩张毒素cdtA、cdtB及cdtC基因序列,设计合成相应特异性引物,引入EcoRI、BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点,PCR扩增cdtA、cdtB及cdtC目的基因片段,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)多克隆酶切位点中,构建重组体pcDNA3.1(+)-cdtA、pcDNA3.1(+)-cdtB及pcDNA3.1(+)-cdtC;通过酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定,筛选阳性重组体。结果扩增出特异的cdtA、cdtB及cdtC基因片段,大小约为807bp、798bp、570bp;双酶切及测序鉴定证明成功构建了CJ真核表达重组载体pcDNA3.1(+)-cdtA、pcDNA3.1(+)-cdtB及pcDNA3.1(+)-cdtC。结论 PCR扩增得到了大小约为807bp、798bp、570bp的CJ-cdtA、cdtB及cdtC目的基因片段;并成功构建了pcDNA3.1(+)-cdtA、cdtB及cdtC真核表达重组载体。; 刘卫卫白欣立李震中张军峰李鑫赵子春李春岩; 关键词：空肠弯曲菌

研究论文Endostatin、VEGF、FGF-2在喉癌中的表达及临床意义: 目的：喉癌约占全身癌肿的1％-5％，在耳鼻咽喉的恶性肿瘤中，约占7.9％-35％。目前大量的基础研究表明，血管的生成是实体肿瘤生长、发展、转移的关键。肿瘤微血管密度与其恶性表型及其生物学行为密切相关，如果没有血管生成，大...; 刘卫卫; 关键词：喉癌 ENDOSTATIN基因血管抑制因子碱性成纤维细胞生长因子; 文献传递

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刘卫卫

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