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Z36联合S8对自噬和死亡的影响: 2012年; 目的：探讨小分子化舍物Z36联合s8对肿瘤细胞的自噬和死亡的影响，进一步认识分子靶向药物的联用在抗肿瘤中的应用。方法：台盼蓝染色和流式细胞仪检测Z36单独处理和Z36联合s8处理后细胞死亡率和坏死细胞数，激光共聚焦荧光显微镜观察GFP—LC3点状聚集变化和通过免疫印迹法检测LC3-Ⅱ蛋白表达的变化，探讨Z36联合S8对自噬和死亡的影响。结果：Z36与S8联合处理后，HeLa细胞死亡率显著升高（P〈O．05），细胞发生坏死。s8明显地促进了Z36对HeLa细胞的毒性，其促进作用具有S8的剂量依赖性。但联合用药并未降低Z36引起的自噬，LC3-Ⅱ蛋白表达也未发生变化。结论：Z36联合使用s8后，并不影响Z36诱导的细胞自噬，而促进了Z36诱导的细胞坏死，S8可能与自噬无关的途径促进Z36诱导的细胞死亡。; 周翠红王晓奎周军毕得邓小燕; 关键词：联合用药坏死自噬

S8联合小分子化合物Z18的抗肿瘤效应研究: 2012年; 为了探讨S8联合小分子化合物Z18的抗肿瘤效应,本研究通过联合用药方式处理HeLa细胞后,采用台盼蓝染色和流式细胞仪对细胞死亡率和死亡方式进行检测。电镜实验证实Z18诱导细胞自噬,并利用Western Blotting检测联合用药后LC3-II的变化和使用转染了GFP-LC3或mRFP-EGFP-LC3的HeLa细胞检测联合用药对细胞自噬和自噬流的影响。最后通过ATG5 siRNA和CQ抑制自噬和自噬流,观察联合用药对细胞的自噬和死亡的变化,进一步研究S8对Z18的抗肿瘤作用的影响。结果显示,S8联合用药后,细胞死亡率显著升高(P<0.05),死亡方式主要以坏死为主。S8明显地促进了Z18对HeLa细胞的毒性,其促进作用具有剂量依赖性。但联合用药并未降低Z18引起的自噬空泡集聚,LC3-II蛋白表达也未发生变化。抑制自噬后,并未影响联合用药促进细胞死亡的结果。因此,Z18在联合使用S8的情况下,细胞自噬水平没有发生明显变化,而细胞死亡比例明显升高,自噬并不影响联合用药诱导的细胞死亡。S8可能通过调节细胞坏死的其他途径进而促进细胞对Z18的敏感性,并进一步使细胞发生坏死。; 周翠红王晓奎周军毕得邓小燕; 关键词：联合用药坏死自噬

一种检测蛋白质相互作用的双荧光共定位系统被引量：1: 2011年; 自发荧光蛋白以快捷灵敏、即时检测和无需破坏活细胞的特点在蛋白质相互作用的研究中得到广泛应用。从发光水母Aquoria victoria中分离的绿色荧光蛋白(GFP)和从珊瑚Discosoma sp.中分离的DsRed红色荧光蛋白是自发荧光蛋白的典型代表。本研究开发一种基于GFP和红色荧光蛋白(RFP),并可通过待检测蛋白在细胞内表达的空间位移变化产生共定位的双荧光共定位检测系统。该系统为克服两种荧光蛋白光谱渗漏带来的非特异性结果的干扰,将核仁定位信号(NoLS)和出核信号(ABL)分别连接到RFP和GFP。具有定位信号的GFP和RFP的待检测蛋白对可分别在细胞核内和(或)细胞核外表达,伴随它们的相互作用,荧光共定位的现象会产生在细胞内特定的区域。利用抗凋亡蛋白Bcl-2和Bak-BH3短肽作为蛋白对测试该系统,荧光共定位现象明显,系统灵敏可靠。; 周军周翠红邓小燕陶凤杰; 关键词：GFP DSRED 蛋白质相互作用

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周军