目的观察复方小柴胡汤(FFXCHT)对高分化鼻咽癌细胞CNE-1和低分化鼻咽癌细胞CNE-2增殖的抑制作用,探讨其调控CNE-2细胞microRNA的差异表达。方法通过磺基罗丹明B(SRB)法检测FFXCHT对CNE-1和CNE-2细胞增殖的影响;采用μParafloTM MicroRNA芯片检测,激光扫描器收集杂交的图像,经LOWESS滤器规范信号后比较数据,分析FFXCHT处理前后CNE-2细胞microRNA表达的差异。结果 FFXCHT可抑制CNE-1和CNE-2细胞增殖,且呈剂量依赖性;FFXCHT处理CNE-1细胞24h、48h、72h,其IC50分别为12.23mg/mL,4.63mg/mL和4.97mg/mL;其对CNE-2细胞IC50分别为9.67mg/mL,4.33mg/mL,3.09mg/mL。microRNA芯片检测结果显示FFXCHT处理CNE-2细胞后,在检测的326个microRNA中,有10个microRNA上调,1个microRNA下调,其中检测量绝对值在1000以上且两者相差log2(Sample B signal/Sample A signal)>1的microRNA有hsa-miR-513、hsa-miR-498、hsa-miR-210和hsa-miR-602。结论该FFXCHT可抑制高低分化鼻咽癌细胞的增殖,其抑瘤作用可能与microRNA的差异表达有关。
目的:研究腺病毒介导14-3-3.σ(Ad-14-3-.3σ)对Akt过表达Rat1-Akt细胞成瘤性的作用,并探讨其作用是否通过负调控Akt而实现。方法:通过半体内和体内实验观察Ad-14-3-.3σ转染对Rat1-Akt细胞在裸鼠中成瘤性的影响;采用W estern b lotting方法检测转染14-3-.3σ基因后肿瘤组织内14-3-.3σ蛋白及其对Akt蛋白、Akt磷酸化活性和Akt磷酸化底物水平的影响。结果:无论体外用Ad-14-3-3σ处理Rat1-Akt细胞,还是体内经瘤内注射Ad-14-3-3σ,均可见14-3-3.σ可使荷瘤鼠肿瘤体积显著缩小(P<0.05),出现肿瘤的时间推迟,其中以长时间不间断给药疗效最好;转染14-3-.3σ基因治疗组的肿瘤组织中Akt蛋白、Akt-Thr308位点磷酸化活性及Akt磷酸化底物水平低于转染Ad-β-gal或PBS处理的对照组。结论:14-3-3σ可抑制Rat1-Akt细胞在裸鼠中的成瘤性,14-3-3σ通过负性调控Akt蛋白水平和磷酸化活性而抑瘤。
