戈曼
- 作品数:6 被引量:1H指数:1
- 供职机构:内蒙古农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- SAMHD1单克隆抗体的制备及其初步应用
- SAMHD1是一种细胞核蛋白,鼠γ干扰素诱导基因Mg11的类似物,具有脱氧核糖核苷三磷酸水解酶活性。SAMHD1能在树突状细胞和其他髓系细胞中阻碍人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)的早期复制,而HIV-2和猴免疫缺陷病毒S...
- 戈曼
- 关键词:单克隆抗体免疫印迹
- 文献传递
- SAMHD1蛋白单克隆抗体的制备及SAMHD1在不同细胞中的表达鉴定被引量:1
- 2013年
- SAMHD1是最近发现的在人髓系细胞中发挥抗艾滋病毒作用的一种天然蛋白。为制备抗人huSAMHD1蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的人huSAMHD1重组蛋白为免疫原,经腹腔免疫4周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA法筛选和4次有限稀释法克隆纯化,获得了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株。Western blot与间接免疫荧光试验结果表明,获得的MAb与人huSAMHD1的真核表达蛋白呈阳性反应,而与猴、马SAMHD1的真核表达蛋白呈阴性反应,表明其具有很好的特异性,可以用于ELISA、免疫荧光和免疫印迹检测以及对huSAMHD1的进一步研究。
- 戈曼吴星亮尹鑫魏萍王晓钧
- 关键词:单克隆抗体ELISA免疫荧光免疫印迹
- 马A3Z3V1抑制马传染性贫血病毒早晚期反转录的鉴定
- 2013年
- 马A3Z3V1是宿主细胞内的一种APOBEC3免疫因子,它可以有效抑制马传染性贫血病毒(EIAV)在马宿主细胞内的复制。为鉴定马A3Z3V1分子对EIAV早晚期反转录的抑制作用,本实验根据EIAV的R/U5和gag基因序列分别设计了检测EIAV早晚期反转录产物的引物并建立了SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,利用该方法评价免疫因子A3Z3V1对EIAV逆转录过程的影响。结果显示,在早期反转录过程中,A3Z3V1可以使EIAV的反转录产物最高减少7倍;在晚期反转录过程中,A3Z3V1可以使EIAV的反转录产物最高减少3倍。本实验结果将有助于进一步研究APOBEC3分子的抗病毒作用机制。
- 吴星亮张泽力尹鑫艾有为戈曼王晓钧
- 关键词:马传染性贫血病毒
- 抗马传染性贫血病毒Rev蛋白单克隆抗体的制备
- 2014年
- 为制备马传染性贫血病毒(EIAV)蛋白表达调控因子Rev的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的重组EIAV Rev为免疫原,免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性克隆,经3次细胞克隆纯化后获得一株能够稳定分泌抗Rev的杂交瘤细胞株。MAb亚型鉴定为IgG2a/κ。Western blot与间接免疫荧光试验结果显示,获得的MAb与真核表达的Rev呈阳性反应。本研究首次制备了抗EIAV Rev的MAb,为Rev的功能研究奠定了基础。
- 郭纪珂戈曼张泽力马建申之义王晓钧
- 关键词:马传染性贫血病毒REV单克隆抗体
- 一株抗马传染性贫血病毒p26蛋白单克隆抗体识别差异表位鉴定
- 2015年
- 为研究本实验室制备的抗马传染性贫血病毒(EIAV)p26蛋白单克隆抗体(MAb)1G11的B细胞表位识别特性,本研究通过对不同EIAV株p26蛋白进行系统进化分析,将其划分为3大分支群。根据已经鉴定的线性表位(命名为1G11),通过对3个分支群中的8株代表性病毒株p26蛋白1G11表位区域分析,并原核表达8株病毒1G11表位区域多肽P26-(1~8),经SDS-PAGE和western blot鉴定,结果表明除表位多肽P26-7以外,其他多肽均能够被MAb 1G11所识别。分析显示P26-7多肽序列同时发生N^200S和M^215L变异。由于N^200S和M^215L单独改变并不影响MAb 1G11识别,因此我们推测N^200与M^215同时改变可能影响两侧末端半胱氨酸(C)及附近氨基酸所形成的表位构象,进而影响MAb 1G11识别;同时,其他氨基酸差异并不影响MAb 1G11识别,表明该抗体对1G11表位区域识别具有广谱性。这为进一步应用该MAb作为检测抗体和开发广谱性诊断检测方法提供了依据。
- 常浩胡哲戈曼郭继珂王晓钧周建华
- 关键词:马传染性贫血病毒
- 定量分析马传贫病毒抗原捕获ELISA方法的建立
- EIAV(马传贫)病毒与HIV病毒同属于逆转录病毒科慢病毒属,马传贫弱毒疫苗是目前世界上唯一成功应用的慢病毒疫苗,对于该疫苗作用机制的阐明将为艾滋病疫苗的研究提供借鉴.在基础研究和临床检测中,病毒载量的定量分析至关重要,...
- 胡哲常浩戈曼林跃智王雪峰郭巍王晓钧