方娟娟
- 作品数：8 被引量：35H指数：4
- 供职机构：东南大学医学院理学与病理生理学系更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金留学人员科技活动项目择优资助经费更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 含RIZ1 PR结构域融合蛋白的原核表达、提纯与功能分析被引量：1
- 2006年
- 目的:表达与提纯R IZ1第1个至第200个氨基酸含PR结构域的活性GST融合蛋白质(GST-PR200融合蛋白)。方法:设计引物以含人R IZ1 cDNA全序列的pR IZ1 RH质粒为模板克隆获得目的基因片段,测序核对后经EcoRⅠ与XhoⅠ双酶切,以正确阅读框架插入相同酶切的pGEX-6P-3中,经转染与IPTG诱导表达筛选到阳性大肠杆菌克隆并提纯该融合蛋白质。分别采用SDS-PAGE蛋白电泳法、质谱分析法及组蛋白甲基化转移酶(HMT)测定法鉴定其性质与功能。结果:获得的纯化融合蛋白质相对分子质量约为47 000,其CPM值明显高于对照组(P<0.01),且与作用时间呈正相关。结论:所构建的融合蛋白原核表达系统能有效表达活性GST-PR200融合蛋白,可供大量提取作进一步研究。
- 余卫平方娟娟DONG Wei-fengRon Geyer
- RIZ1表达对髓性白血病细胞株凋亡的影响被引量：6
- 2007年
- 背景与目的RIZ1是近年来发现的抑癌基因,在多种实体瘤如乳腺癌、肝癌和胃癌中RIZI均表达下降或无表达。本研究探讨了RIZ1转录对髓性白血病细胞凋亡的作用。方法采用RT-PCR法检测5种髓性白血病细胞株即AML193、KG-1、KG-1a、K562、Ery-1中RIZ1mRNA转录状况。将含RIZ1全长cDNA的重组质粒pRIZ1RH转入该基因表达缺乏的细胞株中,以制备强制性基因表达细胞模型。细胞株导入单纯载体(pcDNA3.1)作为对照。于基因导入后24h应用FCM细胞凋亡率。结果该5种细胞株中,AML193与K562呈RIZ1mRNA无转录或低转录,但导入pRIZ1RH24h后则出现转录或转录明显增加,且测得该两细胞株凋亡率分别为(22.7±0.7)%、(28.6±1.2)%,均高于相应对照组[分别为(11.7±1.6)%、(9.0±0.8)%],差异均有显著性(P<0.01)。结论RIZ1的转录能够诱导AML193和K562髓性白血病细胞株凋亡,提示该基因可作为其失活的髓性白血病患者之基因疗法的重要靶分子。
- 余卫平方娟娟Wei-Feng Dong陈宝安
- 关键词：RIZ1白血病基因表达
- 乳腺癌中RIZ1的表达及其临床意义初探被引量：3
- 2006年
- 目的研究R IZ1基因mRNA表达的改变与乳腺癌发生及与患者相关临床和病理特征之间的关系。方法采用半定量RT-PCR方法检测34例乳腺癌标本及相应癌旁组织、15例乳腺良性肿瘤R IZ1基因mRNA的表达状况,并结合相关指标进行分析。结果R IZ1基因mRNA在乳腺癌中的表达明显低于癌旁乳腺组织与乳腺良性肿瘤组织,差异均有显著性(均P<0.05)。R IZ1基因mRNA在乳腺癌中的表达与年龄、肿瘤TNM分期、淋巴结转移、激素受体(ER)状况无相关关系(均P>0.05)。结论:R IZ1基因mRNA表达降低可能与乳腺癌的发生相关。
- 方娟娟余卫平樊祥山安艳丽陈平圣
- 关键词：乳腺肿瘤基因表达RIZ1
- 高效液相色谱法测定人血清中头孢他啶的浓度被引量：15
- 2004年
- 目的 :建立高效液相色谱 (HPLC)法测定人血清中头孢他啶浓度的方法。方法 :HPLC法采用的色谱柱为C18柱 ,流动相为甲醇 0 .0 2mol·L- 1 磷酸二氢钾溶液 (1.5∶8.5 ) ,检测波长为 2 5 4nm。结果 :线性范围为 0 .5～ 80mg·L- 1 (r =0 .9992 5 ) ,回收率为 81.69%～ 10 0 .0 1% ,日内RSD为 2 .96%～ 5 .80 % ,日间RSD为 3 .5 0 %～ 6.96%。结论 :HPLC法简便、快速、准确 ,可用于药代动力学研究以及患者血药浓度的监测。
- 方娟娟余卫平邢艳霞卫开斌
- 关键词：高效液相色谱法血清头孢他啶HPLC
- 急性髓性白血病病人外周血中RIZ1的表达变化与启动子区甲基化相关性的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:研究急性髓性白血病病人外周血中肿瘤抑制基因RIZ1的表达状况和该基因启动子区甲基化状态及两者之间的关系。方法:以37例初发急性髓性白血病病人和15例正常人外周血标本为研究对象。RT-PCR检测RIZ1 mRNA水平,甲基化特异性PCR(MSP)检测RIZ1基因启动子区甲基化状态。结果:急性髓性白血病病人标本与正常人标本比较,RIZ1基因的表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。急性髓性白血病标本中RIZ1基因启动子区甲基化率为29.7%(11/37)。存在甲基化的急性髓性白血病病人外周血标本中,RIZ1基因表达缺失或降低。结论:RIZ1基因表达下降与急性髓性白血病的发生有关,其部分机制在于基因启动子区甲基化。
- 姚晨方娟娟高丽丽丁家华束国防余卫平
- 关键词：急性髓性白血病RIZ1基因
- 乳腺肿瘤中RIZ1基因的表达及启动子甲基化状态的研究
- [目的]
探讨乳腺肿瘤组织中RIZI基因mRNA表达状况与该基因启动子甲基化状态，并探讨两者之间的关系及各自与患者相关临床、病理指标之间的关系，为阐明乳腺癌发病机理与开发其新的防治手段提供实验依据。
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- 方娟娟
- 关键词：RIZ1基因乳腺肿瘤启动子甲基化
- 文献传递
- 三氧化二砷纳米微粒对抑制兔血管平滑肌细胞增殖作用的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的了解纳米微粒与普通剂型的三氧化二砷(As_2O_3)对抑制体外培养的兔血管平滑肌细胞(VSMC)增殖作用的差别。方法对照组为不加药物的细胞,实验组为3 μmol/L 纳米微粒和普通剂型的 As_2O_3,干预体外培养的兔 VSMC 细胞72 h,进行四唑氮盐(MTT)染色测定细胞吸光度(A)值。用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,提取细胞 DNA,进行凝胶电泳分析,将3组的结果进行比较。结果 3 μmol/L 纳米剂型的 As_2O_3干预细胞,细胞数量随作用时间的延长逐渐减少,细胞生长明显受抑制,而普通剂型干预细胞,生长受抑制程度较纳米剂型弱。24 h 时,对照组、3 μmol/L 普通剂型组与纳米组,A 值分别为0.68±0.10、0.58±0.12、0.33±0.12,48 h 时分别为0.79±0.11、0.48±0.14、0.28±0.11,72 h 时分别为0.96±0.13、0.34±0.15、0.20±0.06,差异均有统计学意义(H 值分别为10.934、15.039、15.539,P 值均<0.01)。流式细胞仪检测,纳米剂型 As_2O_3、普通剂型 As_2O_3干预及对照组的细胞干预48 h,细胞增殖率分别为44.97%、58.54%、74.02%,早期凋亡率分别为16.89%、11.27%、11.20%,晚期凋亡率分别为26.56%、23.60%、12.46%,坏死细胞分别为11.58%、6.59%、2.32%。DNA 电泳,As_2O_3干预细胞,可见凋亡梯形条带,部分细胞坏死,呈模糊的无间隔片状条带。纳米剂型药物作用的细胞 DNA 条带,梯形条带更多、更模糊。结论 As_2O_3可以抑制体外培养的 VSMC 增殖,且纳米剂型 As_2O_3较普通剂型的 As_2O_3对细胞抑制作用更强。
- 卢勤安艳丽王子好张东生牛焕章方娟娟滕皋军
- 关键词：砷剂血管平滑肌细胞增殖介入性放射学
- 乳腺癌中RIZ1基因启动子甲基化状态的探讨被引量：5
- 2007年
- 目的:研究乳腺癌组织中RIZ1启动子甲基化状态及与临床、病理指标之间的关系,并探讨该甲基化状态与RIZ1 mRNA表达的相关性。方法:应用甲基化特异性PCR法(methylation specific PCR,MSP)检测人乳腺癌组织和相应癌旁组织及乳腺良性肿瘤组织中RIZ1启动子甲基化状态,结合患者的临床与病理资料分析结果,并结合半定量RT-PCR法检测结果加以分析。结果:34例乳腺癌标本中RIZ1启动子甲基化阳性率为44.1%(15/34),该甲基化状态与患者年龄、肿瘤TNM分期、有无淋巴结转移、雌激素受体(ER)是否阳性无相关性(均为P>0.05)。RIZ1启动子甲基化标本中的RIZ1 mRNA表达水平低于未甲基化标本者,两者差异具有显著性(P<0.05),RIZ1表达降低与其启动子高甲基化状态之间有相关性(P<0.05)。结论:RIZ1基因启动子高甲基化是乳腺癌中常见的分子病理学改变之一;RIZ1 mRNA表达与RIZ1启动子高甲基化呈负相关。
- 方娟娟余卫平安艳丽樊祥山
- 关键词：RIZ1乳腺肿瘤启动子甲基化
