李德富
- 作品数：84 被引量：330H指数：10
- 供职机构：中国药品生物制品检定所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划“九五”国家科技攻关计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程经济管理更多>>
- 乙型乙脑病毒减毒中间株SA14-12-1-7基因组全序列的测定
- 目的 对乙型脑炎活疫苗减毒过程中间株SA14-12-1-7株进行全序列测定和分析,进一步了解乙脑活疫苗减毒及其稳定性的分子机制.方法 根据已发表的SA14-14-2株及SA14株的序列,设计6对重叠引物,涵括整个乙脑病毒...
- 曾明俞永新董关木范行良姚智慧李德富
- 关键词：乙型脑炎病毒基因组
- 文献传递
- 应用同功酶图谱鉴别动物细胞种属来源的研究被引量：2
- 1996年
- 采用薄层球脂糖凝胶电泳方法，对人、小鼠、兔、中国白鼠、豚鼠、拘、牛、猴等动物细胞进行MD、NP、LD和G6PD四种酶组成分析，获得了上述动物细胞四组同功酶图谱，将此图谱用于46株传代细胞的种局归类研究，确认来源于人的细胞有25株，小鼠有10株，仓鼠有3株，非洲绿猴有4株，其它来源4株，均与实验相符．说明所制备的图谱可靠并有较好的重复性、稳定性。
- 姜典才张宁高光尹红章李德富
- 关键词：动物细胞同功酶
- 全文增补中
- 丙型肝炎病毒抗原检测方法的建立被引量：28
- 2001年
- 目的 以特异性单克隆抗体为基础建立丙型肝炎病毒 (HCV)抗原检测的酶联免疫吸附(ELISA)法 ,探索从血浆或血清中检测HCV抗原的可能性。方法 利用我们制备的抗 HCV核心及NS3区单克隆抗体 (McAbs) ,进行多种交叉组合模式的分析 ,确立实验室模式 ,并测定 34 8份义务献血员血样 ,确定此方法的Cutofff值 ,并分析 146份抗 HCV阳性及 2 2 5份抗 HCV阴性血浆 ,阳性结果用套式PCR试剂盒确证。结果 构建了以抗 HCV核心区单抗C39及NS3区单抗C7 6为包被抗体 ,以C39及NS3区C7 5 7为标记抗体的夹心ELISA检测模型 ,以C7为抗原 ,其检出灵敏度为 5ng ml,其Cutoff值为阴性对照均值± 0 2 5。 146份抗 HCV阳性样本中 ,11份为抗原反应阳性 ,2 2 5份抗 HCV阴性样本中 ,16份为抗原阳性 ,这些阳性样本经PCR检测后 ,2 3份为HCVRNA阳性。结论 用单抗构建的HCV抗原检测方法分别从抗 HCV阳性及阴性样本中检测出HCV抗原反应阳性样本 ,并经PCR确证 ,表明直接从血浆样本中检测HCV抗原是可能的 ,这将对于HCV和基础研究及控制HCV的传播有重要意义。
- 孟淑芳李秀华尹红章李德富
- 关键词：丙型肝炎病毒单克隆抗体酶联免疫吸附测定聚合酶链反应
- PERT-ELISA法用于细胞逆转录病毒检测的再研究
- 2009年
- 目的进一步分析PERT-ELISA法在细胞逆转录病毒检测应用中的意义。方法分析不同细胞培养液及其添加成分对PERT-ELISA法检测结果的影响及检测方法的精密性和检测用试剂的稳定性,将该方法用于不同来源细胞的逆转录酶活性的检测,并通过共培养法对我国金黄地鼠肾细胞中逆转录酶活性是否具有感染性进行初步分析。结果不同细胞培养液及其添加成分逆转录酶活性检测均为阴性,不会影响样本的检测结果。PERT-ELISA法具有良好的试验间精密性及重现性,检测用试剂在保存条件下,至少在1年内可保持稳定。近250株细胞的检测结果显示,含有逆转录病毒颗粒的细胞,无论是否具有感染性,均为逆转录酶活性阳性;除部分人淋巴瘤来源的细胞外,大部分人源细胞为逆转录酶活性阴性;8种91株猴肾来源的细胞包括74株Vero细胞均为逆转录酶活性阴性;而鼠源细胞则大部分为阳性,其中20株CHO来源的细胞均为阳性;3株猪源细胞及1株猫源细胞为阳性,而2株水貂细胞、2株牛源细胞及1株犬源细胞均为阴性。被检测的15株组织工程产品用人源细胞逆转录酶活性均为阴性,而我国不同地区来源的金黄地鼠肾细胞上清中,逆转录酶活性均为阳性。金黄地鼠肾细胞与人2BS细胞共培养后连续传代7次,细胞上清中逆转录酶活性仍为阳性,但随着传代次数的增加呈下降趋势。结论PERT-ELISA法可用于细胞逆转录病毒的检测,但对于阳性细胞,还需要进一步分析其与逆转录病毒或逆转录病毒样颗粒的相关性及是否具有感染性。
- 孟淑芳李秀华林林冯建平李修兰王佑春李德富
- 关键词：细胞逆转录酶活性感染性
- 非甲基化CpG的免疫学功能及免疫佐剂的应用被引量：2
- 2001年
- 曾明徐沪济李德富
- 关键词：免疫学功能免疫佐剂
- 我国血液制品中人细小病毒B19污染情况及基因型的初步研究被引量：4
- 2009年
- 目的分析我国血液制品凝血因子Ⅷ及原料血浆中人B19病毒污染情况及B19病毒的基因型。方法以B19病毒VP1／VP2区引物采用套式PCR法分别检测16批凝血因子Ⅷ成品及10批混合原料血浆中B19病毒的污染情况，并对阳性样品中B19病毒DNA的NS1-VPlu区进行测序和基因型分析。结果16批凝血因子Ⅷ中B19病毒DNA阳性率为75％（12／16），10批混合原料血浆中B19病毒DNA阳性率为100％（10／10）。序列测定结果表明，所有B19阳性样品中的病毒序列高度保守，同源性为98．3％～100％，且均为基因型Ⅰ型。结论我国凝血因子Ⅷ及原料血浆中B19病毒Ⅰ型污染率高，病毒核苷酸具有较高的保守性。
- 吴瑜耿彦生王菁舟张勇朝赵晨燕孟淑芳李德富
- 关键词：人细小病毒B19基因型
- TSEs的病原学研究进展和生物制品的安全性策略
- 1999年
- 汪兴太李德富
- 关键词：海绵状脑病病原学生物制品安全性
- 国产HIV抗体诊断试剂的质量评价被引量：3
- 2000年
- 目的评价国产ＨＩＶ抗体诊断试剂的质量。方法用４４００份义务献血员的血样，评价国内９ 个厂家的 ＨＩＶ抗体诊断试剂的特异性；ＨＩＶ抗体阳性样品 ３ ３６８份，评价试剂的灵敏度；测定各试剂结果的真实性 及相关质量指标。结果国产ＨＩＶ抗体诊断试剂的特异性、阳性预示值基本在９９％以上，但灵敏度仍存在一定差 距。结论通过对国内主要生产厂家生产的试剂质量的评价，了解制品质量，有益于进一步提高国产试剂的质量。
- 尹红章王兵宋爱京陆明李秀华孟淑芳李德富
- 关键词：HIV抗体ELISA诊断试剂
- 人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期蛋白L1 DNA疫苗的免疫原性及安全性
- 2005年
- 目的对HPV18型DNA疫苗的免疫原性和安全性进行初步评价。方法将HPV18L1基因与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建DNA疫苗质粒pcDNAL1。使用脂质体将重组质粒转染COS7细胞,用Westernblot检测体外瞬时表达的抗原。将重组质粒pcDNAL1肌肉注射BALBc小鼠(100μg只),加强免疫3次后分别采集血清,用ELISA法和Westernblot法检测抗体,实时荧光定量PCR法检测质粒的组织分布。采用ELISA法检测DNA疫苗免疫后抗核抗体和抗双链DNA抗体的效价。结果重组质粒可在真核细胞中有效地转录和表达HPV18L1蛋白。小鼠免疫后可检出较高滴度的抗HPV18L1抗体和特异条带。免疫后质粒主要分布在注射部位,且随着时间延长被清除;未检测到抗核抗体和抗双链DNA抗体。结论HPV18L1重组质粒可诱导小鼠产生特异的体液免疫反应,且该DNA疫苗是安全的,为进一步研制开发HPVDNA疫苗打下了基础。
- 李娟孟淑芳张春涛王佑春尹红章李德富
- 关键词：DNA疫苗免疫原性人乳头瘤病毒安全性COS-7细胞PCDNA3
- 艾滋病疫苗的研究动向
- 1991年
- 艾滋病是一种致死性传染病。针对其病原体HIV的疫苗研究工作一直是全球最为关注的课题之一。尽管HIV原型疫苗在动物模型上的试验结果没有达到人们预期的目标,然而随着有关方面研究的进展,许多人相信研制有效的HIV疫苗还是有可能的。主要取得进展的有以下两个方面:(1)HIV保护性免疫抗原决定簇的研究。(2)慢病毒的原型疫苗在动物模型上的研究。
- 蒋一得李德富
- 关键词：艾滋病疫苗
