李文波
- 作品数：13 被引量：59H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅三医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省卫生厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- miR-33对B16F10细胞株增殖和凋亡的影响
- 2013年
- 目的 进一步探讨miR-33对黑色素瘤B16F10细胞株增殖和凋亡的影响.方法 构建靶向miR-33的高表达mimics及inhibitor干扰单链,将同一株B16F10细胞分为5组：空白组、miR-33mimics组、mimics对照组、miR-33 inhibitor组、inhibitor对照组,运用脂质体转染技术将对应基因导入B16F10细胞中,从RNA水平和细胞水平分析miR-33对B16F10细胞增殖和凋亡的影响.结果 miR-33mimics组对应基因表达（1773.3±245.83）高于空白组,差异有统计学意义（P＜0.01）；miR-33 inhibitor组中对应基因相对表达（0.6973±0.1958）低于空白组和inhibitor对照组,但差异无统计学意义；miR-33mimics组与空白组相比细胞生长呈下降趋势,在转染后48 h（1.1875±0.0502）及72 h（1.7500±0.0933）趋势明显,差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）；miR-33 mimics组细胞凋亡率[（1.8050±0.2050）％]高于空白组[（11300±0.1414）％]（P＜0.05）；与空白组相比,miR-33 mimics组G1期细胞比例[（62.7000±1.7321）％]增加,S期细胞比例[（23.4000±2.5044）％]减少,差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）.结论 miR-33在高表达时抑制B16F10细胞增殖,促进细胞凋亡.
- 李文波周建大谢慧清
- 关键词：黑色素瘤MIRNA基因转染细胞增殖细胞凋亡
- 负压引流与创面修复被引量：43
- 2009年
- 探讨负压引流(VSD)促进创面修复的可能机制,寻找促进创面修复的最佳负压引流条件。本文回顾性分析了众多学者的研究成果,总结VSD技术促进创面修复的最佳条件。
- 周建大刘进言胡媛谭建湘李文波王少华
- 关键词：引流术
- 成人成肌细胞的分离与体外培养
- 目的：建立一种体外成人成肌细胞分离与原代培养的方法。方法：首先用两步消化法对取自成人骨骼肌组织进行消化获取相对较纯的成肌细胞，通过差速贴壁法进行进一步的纯化，并对获取的成肌细胞进行细胞形态学观察、免疫组织化学、透射电镜鉴...
- 周建大罗成群贺全勇李文波陈继业李明
- 关键词：成肌细胞分离纯化体外培养
- 文献传递
- 人表皮生长因子基因转染原代角质形成细胞被引量：1
- 2009年
- 目的：将带信号肽的人表皮生长网子基因转染原代成人角质肜成细胞，证实细胞活性及hEGF的有效表达，为后期的皮肤修复研究打下基础。方法：先酶切验证pcDNA3．1－hEGF，后消化成人皮肤组织，以Defined Keratinocyte—SFM（DKSFM）传代培养角质形成细胞并鉴定，脂质体转染质粒pcDNA3．1－hEGF人细胞，转基因细胞培养48h再作RT－PCR和Western—blot分析，上清分别进行放射免疫测定和MTT测定。结果：质粒peDNA3．1－hEGF上的hEGF序列经测序证实，双酶切后获得约230bp和5．4kb条带；成人角质形成细胞体外培养可快速稳定增殖，转hEGF基因细胞经RT—PCR扩增出一条约230bp的特异性条带。Westem—blot检测到hEGF表达明显升高；放射免疫法和MTT实验证实转基因细胞有稳定的hEGF蛋白分泌。结论：质粒pcDNA3．1－hEGF在脂质体介导下成功转染成人皮肤角质形成细胞，转基因细胞能分泌有生物活性的EGF；体外培养的成人皮肤角质形成细胞可见少量EGF分泌．
- 周建大王少华罗成群谢慧清刘进言胡媛谭建湘李文波陈勇
- 关键词：皮肤表皮生长因子基因角质形成细胞质粒
- 转内皮抑素基因抑制黑色素瘤细胞的高转移能力被引量：1
- 2009年
- 目的验证转内皮抑素基因抑制高转移性黑色素瘤细胞的转移能力。方法将含胰岛素信号肽序列的pcDNA3．1-Endo真核表达载体转染小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16，运用RT-PCR和Western-blot验证Endo的表达后，进行黑色素瘤细胞的粘附实验、体外侵袭和运动实验以及C57BL／6小鼠的肺转移试验。结果转内皮抑素基因能明显抑制黑色素瘤细胞的粘附、体外侵袭和运动以及肺转移能力，其中粘附抑制率36．4％，体外侵袭抑制率48．4％，细胞运动功能抑制率52．1％，肺转移抑制率67．3％。结论转内皮抑素基因能明显抑制黑色素瘤细胞的高转移能力。
- 周建大胡媛谢慧清谭建湘李文波王少华刘进言
- 关键词：内皮抑素类黑色素瘤
- 下睑外翻的手术矫正
- 目的观察不同手术方法矫正下睑外翻的疗效。方法根据下睑外翻的不同原因和程度,采用外眦瞄着术、睑缘缩短术+下穹窿成形术、旋转皮瓣矫正术治疗下睑外翻。结果 65例患者78只眼采用不同手术,均获得满意效果,随访观察3～36个月无...
- 陈铁夫罗成群贺全勇周建大尹朝奇徐丹陈佳李雄王少华李萍李文波欧阳华伟
- 关键词：下睑外翻旋转皮瓣
- 文献传递
- HPLC法测定浓维磷糖浆3种成分的含量被引量：1
- 2018年
- 目的:建立同时测定浓维磷糖浆中咖啡因、维生素B1和烟酸含量HPLC方法。方法:采用Ulti Mate XB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以0.1%辛烷磺酸钠(含0.1%磷酸)为流动相A、乙腈为流动相B,梯度洗脱;流量1.0 m L·min^(-1);柱温30℃;检测波长261 nm。结果:咖啡因、维生素B1和烟酸的线性范围分别为38.22~382.25μg·m L^(-1)(r=1.000 0)、7.28~72.75μg·m L^(-1)(r=0.999 5)和0.78~7.84μg·m L^(-1)(r=1.000 0);平均回收率(n=9)分别为99.3%、99.8%、98.6%,RSD分别为0.66%、1.14%、1.30%;170批样品含量测定结果为咖啡因0.28%~0.33%、维生素B_1 0.026%~0.078%和烟酸0.004 6%~0.0259%(g·m L^(-1))。结论:所建方法经方法学验证,可用于浓维磷糖浆的质量控制。
- 章为李文波王皖李帅李晓燕刘雁鸣曾令贵
- 关键词：高效液相色谱法浓维磷糖浆咖啡因维生素B1烟酸
- 茵陈五苓糖浆质量标准研究被引量：4
- 2012年
- 目的:完善茵陈五苓糖浆的质量标准。方法:采用TLC法鉴别方中桂枝、茵陈;采用HPLC法测定方中绿原酸含量。结果:薄层鉴别特征明显,专属性强。HPLC法测定绿原酸在0.033～0.602μg范围内有良好的线性关系,r=0.999 8,平均回收率为99.8%,RSD=1.4%(n=6)。结论:本方法简便、可靠、准确,可用于茵陈五苓糖浆的质量控制。
- 章为丁野李文莉李晓燕李文波
- 关键词：薄层色谱法高效液相色谱法
- 内皮抑素基因抗黑色素瘤细胞高转移的动物研究被引量：1
- 2009年
- 目的:验证转内皮抑素基因抑制高转移性黑色素瘤细胞的转移能力。方法:将pcDNA3.1-Endo真核表达载体转染小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16F10,运用RT-PCR和W estern-b lot验证Endo的表达后,进行瘤细胞的粘附实验、体外侵袭和运动实验以及C57BL/6小鼠的皮下种植瘤和肺转移瘤试验,并进一步统计分析。结果:内皮抑素基因能明显抑制B16F10黑色素瘤细胞的粘附、体外侵袭和运动、体内成瘤以及肺转移能力,其中粘附抑制率36.4%,体外侵袭抑制率48.4%,细胞运动功能抑制率52.1%,肺转移抑制率为67.3%。结论:转内皮抑素基因能明显抑制黑色素瘤细胞的高转移能力。
- 周建大李文波罗成群谭建湘汪阳胡媛陈孜孜陈继业李明王少华
- 关键词：黑色素瘤内皮抑素基因转染
- 原发性皮肤黑色素瘤的microRNA基因芯片研究被引量：9
- 2010年
- 目的研究原发性皮肤黑色素瘤临床标本中的microRNA基因表达谱，并探讨其与转移的相关性。方法随机收集16例新鲜原发性皮肤黑色素瘤进行microRNA基因芯片研究，采用主因素分析法聚合分群后再行统计学分析，最后选取特殊miRNA行PCR定量分析。结果在470个miRNA中，有278个miRNA在至少9例标本中没有显示，故剔除，剩下192个miRNA采用主因素分析发现所有标本聚合成两群，II群为高转移组，Ⅰ群为低转移组。高转移性皮肤黑色素瘤中低表达2倍以上的miRNA有47个，高表达2倍以上的miRNA有6个，包括let-Tb、miR-199a、33、193b、22和miR-222等。对标本定量PCR后发现let-7b、miR-199a和miR-33与临床转移指标（年龄、生存时间、转移和转移性死亡）呈密切正相关。结论let-7b、miR-199a和miR-33可能在黑色素瘤的转移中发挥了重要功能。
- 周建大谭建湘谢慧清汪阳李文波钟石
- 关键词：寡核苷酸序列分析微RNAS
