李晔
- 作品数:6 被引量:20H指数:1
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- 发文基金:国家高技术研究发展计划江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
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- 过表达Gpr3诱导猪颗粒细胞G_1阻滞及凋亡
- 2014年
- G蛋白偶联受体3(Gpr3)属于G蛋白偶联受体视紫质家族成员.Gpr3通过激活Gs蛋白介导的下游信号通路,维持卵泡卵母细胞减数分裂的前期阻滞,但在卵泡颗粒细胞中的作用不清.为了明确Gpr3在猪卵泡颗粒细胞中的功能,构建了Gpr3基因的真核表达载体,利用过表达的方式激活其介导的信号通路,并利用MTT、流式细胞术和real-time PCR等方法检测了过表达Gpr3对猪卵泡颗粒细胞增殖及凋亡的影响.结果显示,过表达Gpr3后,猪颗粒细胞的增殖水平显著下调,G0/G1期细胞的百分比增加,S期细胞减少,Cyclin B1和CDK1 mRNA的表达量也显著降低;同时,显著增加了颗粒细胞的凋亡率,在抑制Bcl-2表达的同时,促进了Bax的表达.结果表明:过表达Gpr3在猪颗粒细胞中具有抑增殖促凋亡的作用,丰富了其在调节卵泡发育过程中的生物学功能.
- 张宝乐李晔徐银学
- 关键词:过表达增殖凋亡
- 猪Gpr12基因克隆、表达及其对卵泡颗粒细胞生长周期和凋亡的影响
- G蛋白偶联受体12(G protein-coupled receptor12, Gprl2)是G蛋白偶联受体超家族成员之一。近年来研究表明Gprl2在小鼠和人的卵巢中通过调节cAMP含量而维持卵母细胞减数分裂的阻滞作用,...
- 李晔
- 关键词:颗粒细胞基因克隆超表达
- 文献传递
- 猪Gpr6基因的克隆及表达分析
- 2013年
- 为了探明G蛋白偶联受体6基因(Gpr6)的结构、功能与表达模式,克隆了含有完整阅读框的猪Gpr6的cDNA序列。利用生物信息学方法对Gpr6基因的结构及功能进行了系统研究,运用Real-time PCR技术对其在组织中的表达规律进行了分析,并利用构建的原核表达载体pET32a-Gpr6对其在BL21菌株中的最佳蛋白表达条件进行了筛选。结果表明:猪Gpr6基因的cDNA序列由1 664个核苷酸组成,编码366个氨基酸残基,等电点为7.63,相对分子质量为38.38×103,与牛、犬、人、黑猩猩、大鼠和小鼠的氨基酸相似性分别为91.2%、89.5%、88.3%、88.3%、86.3%和86.1%。猪Gpr6基因在各组织中均有表达,但仅在下丘脑、垂体和肝脏中表达量较高。经原核表达分析,发现成功获得了相对分子质量约为27 000的Gpr6蛋白,并且确定了该蛋白的最佳表达条件为0.8 mmol.L-1IPTG,37℃诱导表达2 h。
- 李晔张宝乐丁建华张子敬徐银学
- 关键词:组织表达谱原核表达
- 猪G蛋白偶联受体12(Gpr12)基因克隆鉴定及其表达分析被引量:1
- 2014年
- 为研究猪G蛋白偶联受体12(G protein-coupled receptor 12,Gpr12)基因的序列和组织表达特征,探索Gpr12 mRNA在卵泡发育过程中的表达规律,本研究利用克隆测序技术获取猪Gpr12基因的编码区序列,并利用生物信息学方法分析Gpr12基因序列和蛋白的潜在特征;RT-PCR技术检测Gpr12基因的组织表达模式;荧光定量PCR技术检测Gpr12 mRNA在猪卵泡发育过程中的表达规律。结果表明:猪Gpr12基因编码区序列长1 005 bp,编码蛋白含有典型的7次跨膜结构域和DRY基序,存在多个潜在的磷酸化和糖基化修饰位点;Gpr12基因在所检测的组织和细胞中均有表达,且在脑、垂体和卵母细胞中高表达;随着卵泡的发育,Gpr12 mRNA的表达量极显著升高(P<0.01),表明Gpr12基因可能参与了猪卵泡发育的调控过程。
- 张宝乐李晔石放雄徐银学
- 关键词:基因克隆
- 桃绿枝气插体内养分变化与生根的关系被引量:19
- 1995年
- 桃绿枝气插生根过程中,插条叶片光合作用的能力逐步下降,但对插条生根仍有显著促进作用。气插后带叶插条生根部位总糖、可溶性糖及淀粉含量显著下降(P<0.05),至不定根出现后又显著回升(P<0.05);无叶插条则持续显著下降。插条生根部位钾和氨的含量呈上升趋势。无叶插条因受插条萌芽的影响,插后13天钾和氮开始显著下降。插条钙的含量先降后升。试验表明插条营养物质含量变化与不定根的生长发育关系密切。在插条不定根原基形成和分化期,生根部位碳水化合物含量急剧下降,钾的含量则显著上升,而氮的含量稳定在较高的水平。桃绿枝气插时插条留叶,有助于生根,带叶插条生根率达87.1%,无叶插条仅22.3%。
- 凌志奋王业遴马凯胡卫东李晔
- 关键词:桃树良种繁育
- 猪Gprl2基因克隆、表达及其对卵泡颗粒细胞生长周期和凋亡的影响
- G蛋白偶联受体12(G protein-coupled receptor12,Gpr12)是G蛋白偶联受体超家族成员之一。近年来研究表明,Gpr12在小鼠和人的卵巢中通过调节cAMP含量而维持卵母细胞减数分裂的阻滞作用,...
- 李晔
- 关键词:卵泡颗粒细胞基因克隆