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LEF1增强Trop2启动子转录活性: 2014年; 目的探究Wnt信号通路相关蛋白LEF1、TCF1、野生型β—catenin和激活型β—catenin对肿瘤相关钙信号转导因子Trop2启动子转录活性的调控作用，找出调控Trop2转录活性的转录因子并分析其可能的分子机制。方法通过生物信息学方法预测Trop2启动子上潜在的转录因子，构建小鼠Trop2启动子报告质粒，在293T细胞中，采用荧光素酶双报告系统分析LEF1、TCF1、野生型β-catenin和激活型β—catenin对Trop2启动子的调控作用。找出Trop2启动子上的TCF／LEF结合位点，通过定点突变的方法构建Trop2启动子TCF／LEF结合位点突变体，探究Trop2启动子转录活性调控可能的分子机制。结果经预测，Trop2启动子上存在LEF1、TCF1等众多的潜在转录因子结合位点。荧光素酶双报告实验证明。在293T细胞中。与空载体相比，LEF1、TCF1都不同程度地增强Trop2启动子转录活性。其中LEF1对Trop2启动子转录活性的增强作用最为明显，达108倍。突变Trop2启动子上的TCF／LEF结合位点可以明显降低LEF1对Trop2启动子的转录活性。结论在293T细胞中，LEF1可以极大地增强Trop2启动子的转录活性。LEF1上调Trop2启动子转录活性是通过结合到Trop2启动子上的两个TCF／LEF结合位点而发挥作用的。; 漆彦斌刘叙翔杨丽霞黄朝峰; 关键词：启动子转录激活

RORγt基因启动子的鉴定和特征分析被引量：5: 2013年; 目的以RORγt转录起始位点5’上游4.8 kb基因序列为研究对象,初步鉴定分析是否存在RORγt单独的启动子,并且探讨β-Catenin/Tcf1信号途经对RORγt启动子转录活性的影响。方法用带有不同长度的5’上游基因的5个报告质粒,与pSV-40-renilla Luc共转染Jurkat、EL-4、NIH 3T3和293T细胞系,与报告质粒的空载相比较,根据荧光强度的相对值的大小确定启动子存在的可能性和所在的位置;利用野生型β-Catenin、激活突变型β-Catenin和Tcf1表达质粒及RORγt启动子报告载体共转染,观察β-Catenin/Tcf1信号途径对RORγt启动子活性的影响。结果不同长度的启动子报告质粒在Jurkat、EL-4、NIH 3T3和293T细胞中均呈现启动子活性,其中所有报告质粒在Juakat和EL-4等T细胞系中的活性均高于其他2个上皮细胞系,而RORγt上游0.5 kb的报告质粒启动子活性在所有的细胞系中均呈最高活性。野生型β-Catenin、激活突变型β-Catenin和Tcf1对RORγt启动子报告有强激活作用。结论 RORγt转录表达由独立启动子控制,β-Catenin/Tcf1信号途径能够增强该启动子的转录活性。; 杨丽霞黄朝峰; 关键词：RORΓT 启动子分析转录调控 Β-CATENIN

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杨丽霞