毛瑞阳 作品数:16 被引量:56 H指数:5 供职机构: 温州医科大学 更多>> 发文基金: 温州市科技计划项目 温州市科技局科研基金 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
天麻素对终末糖基化产物诱导神经小胶质细胞炎症因子表达的影响 被引量:23 2011年 目的观察终末糖基化产物(AGEs)对小鼠神经小胶质细胞BV-2炎症因子白细胞介素(IL-1β、IL-6)表达的影响及天麻素的干预效应。方法将体外培养的小鼠小胶质细胞分成对照组、AGEs组、天麻素(12.5、25、50、100 mg/L)组,培养18 h,观察细胞形态变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中IL-1βI、l-6水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定IL-1β、IL-6 mRNA表达。结果倒置显微镜下观察,对照组小胶质细胞多为静止期,突起较少,AGEs组多数细胞突起较多,呈阿米巴样,以AGEs质量浓度为300 mg/L时最明显,天麻素干预组细胞突起较AGEs组有所减少,其中以天麻素50 mg/L组最少。与对照组相比,AGEs组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6水平,以及细胞内IL-1β、IL-6 mRNA表达明显增加,具有显著差异(P<0.05);与AGEs组相比,天麻素组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6水平,以及细胞IL-1β、IL-6 mRNA表达均有所降低,其中天麻素25、50、100 mg/L组差异显著(P<0.05),以天麻素50 mg/L组降低最显著(P<0.01)。结论 AGEs能够诱发神经小胶质细胞产生IL-1β、IL-6,天麻素能部分抑制AGEs对小胶质细胞的诱导作用。 张媛元 毛瑞阳 杜晓红 刘毅关键词:天麻素 终末糖基化产物 白细胞介素1Β 白细胞介素6 天麻素对高糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β,IL-6表达的影响 被引量:11 2009年 目的:研究天麻素对高糖诱导的神经小胶质细胞白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:将体外培养的小鼠小胶质瘤细胞(BV-2细胞)分成对照组、高糖组、天麻素低、中、高(25,50,100 mg.L-1)剂量组,培养24 h,观察细胞形态。应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中IL-1,βIL-6蛋白浓度,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法评价IL-1,βIL-6 mRNA表达。结果:与对照组相比,高糖组培养24 h后,细胞出现聚集,胞体、胞核变大,枝状突起明显,胞浆内颗粒物增多现象,天麻素各剂量组上述改变较轻。与对照组相比,高糖组细胞培养上清液中IL-1,βIL-6浓度,以及细胞内IL-1,βIL-6 mRNA表达明显增加,具有显著统计学差异(P<0.05);而与高糖组相比,天麻素各组细胞培养上清液中IL-1,βIL-6浓度,以及细胞IL-1,βIL-6 mRNA表达均降低,均具有显著统计学差异(P<0.05),其中以中浓度天麻素组最为显著,与高、低浓度组相比,均具有显著统计学差异(P<0.05)。结论:天麻素能抑制高糖诱导的神经小胶质细胞IL-1,βIL-6表达。 杜晓红 毛瑞阳 刘毅 李颖 单亦升关键词:天麻素 高糖 白介素-1Β 白介素-6 终末糖基化产物对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响 2012年 目的:研究终末糖基化产物(AGEs)对神经小胶质细胞白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法:以不同浓度、不同时间AGEs刺激体外培养的小鼠小胶质瘤细胞(BV-2细胞),观察细胞形态的变化,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内IL-1β、IL-6mRNA水平,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清液中IL-1β、IL-6的蛋白含量。结果:与空白组和AGEs对照物组比较,AGEs组细胞活化呈阿米巴样,胞核大而圆,核仁明显,胞浆内颗粒物增多,以300mg/L作用18h组效果最显著。与空白组和AGEs对照物组比较,作用时间相同时,AGEs浓度为50mg/L时即可见细胞的IL-1β、IL-6mRNA水平明显增加(P<0.05或P<0.01),浓度为150mg/L时,细胞培养上清液中IL-1β、IL-6的蛋白含量明显增加(P<0.05);作用浓度相同时,2h即可见细胞的IL-1βmRNA水平明显增加(P<0.05),6h见细胞的IL-6mRNA水平和细胞培养上清液中IL-1β、IL-6的蛋白含量明显增加(P<0.05或P<0.01),其中以300mg/L作用18h组效果最显著(P<0.05)。结论:AGEs刺激可使小胶质细胞内IL-1β、IL-6高表达。 张媛元 杜晓红 毛瑞阳 刘毅关键词:终末糖基化产物 白细胞介素-1Β 白细胞介素-6 天麻素对高糖诱导的小鼠小胶质细胞IL-1β和IL-6表达的影响 目的:
研究不同浓度葡萄糖对神经小胶质细胞IL-1β(白介素-1β)、IL-6(白介素-6)表达的影响,以及天麻素对高浓度葡萄糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响。
方法:
... 毛瑞阳关键词:天麻素 小胶质细胞 白介素 逆转录聚合酶链反应 文献传递 同型半胱氨酸诱导小鼠胶质细胞表达白介素-1β和肿瘤坏死因子-α的研究 被引量:1 2015年 目的探讨同型半胱氨酸诱导小胶质细胞表达白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的机制。方法将体外培养的小鼠小胶质瘤细胞(BV-2细胞)分成空白对照组、半胱氨酸(Cys)组、同型半胱氨酸(Hcy)组和同型半胱氨酸+还原型谷胱甘肽(Hcy+GSH)组,培养72h。应用反转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)方法检测IL-1β和TNF-αmRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中细胞因子的蛋白浓度,蛋白质印迹法(Westernblot)检测NF-κB/p65的含量。结果空白对照组、Cys组、Hcy组和Hcy+GSH组细胞内IL-1β 和TNF-αmRNA(F=48.63、130.76,均P〈0.05)和蛋白表达(F=702.91、293.69,均P〈0.05)以及NF-κB/p65含量(F=212.06,P〈0.05)差异均有统计学意义;与空白对照组比较,Hcy组细胞内IL-1β 和TNF-αmRNA和蛋白表达明显增加,Hcy+GSH组较Hcy组表达水平下降,Hcy组NF-κB/p65含量高于其他组,差异均具有统计学意义(均P〈0.05)。结论Hcy可诱导小胶质细胞表达IL-1β和TNF-α,NF-κB信号通路可能参与了此过程。 李颖 毛瑞阳 杜晓红 赵晓薇关键词:高同种半胱氨酸血症 白细胞介素-1Β 筛选大鼠血管钙化消退差异表达基因及初步分析 被引量:3 2011年 目的:探讨大鼠在血管钙化消退过程中基因表达的变化。方法:选取6周龄SPF级雄性SD大鼠24只,随机分成3组(n=8),分别为对照组、钙化组和消退组。钙化组和消退组制作血管钙化模型(vitamin D3 plus nico-tine,VDN),对照组生理盐水和花生油灌胃。钙化组和对照组于实验第8周处死,消退组继续饲养至16周处死,测定各组大鼠动脉组织钙含量并作病理检查。采用抑制性消减杂交方法将消退组和钙化组大鼠血管cDNA作差减杂交,分离消退组较钙化组高表达或低表达基因的cDNA片段,建立消退组和钙化组的差异表达文库,扩增、鉴定文库并测序阳性克隆,BLAST比对测序序列。随机挑选4个基因进行RT-PCR验证和DNA条带半定量分析。结果:①血管组织钙含量测定显示钙化组((15.34±2.51)mg/g)较对照组((5.20±0.75)mg/g)血管组织钙含量明显升高(P<0.01);消退组((12.73±1.89)mg/g)较钙化组降低(P<0.05);②构建了血管钙化的差减文库,对所获阳性克隆进行测序和BLAST比对分析,获得28个表达上调基因和22个表达下调基因。RT-PCR验证示Prdx3,Ank2,Ror2,Abcc1等基因在消退组和钙化组间差异表达,消退组较钙化组表达增高,平均约为后者的1.7倍。结论:VDN模型诱导的大鼠血管钙化可以发生主动消退。钙化消退过程中焦磷酸合成相关基因、谷氨酸信号相关基因、还原及凋亡调节基因表达上调,同时见较多骨化相关基因及氧化活性等基因表达下调。钙化抑制基因的表达增多而钙化促进基因表达的下降可能是钙化发生主动消退的内源性机制。 吴秀娟 刘毅 孙文学 杜晓红 陈天新 毛瑞阳 徐利鸳关键词:钙质沉着症 基因文库 骨化 抑制性消减杂交 高糖对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6蛋白及其基因表达的影响 2009年 目的探讨不同浓度葡萄糖对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6蛋白及其基因表达水平的影响。方法将体外培养的小鼠小胶质细胞随机分为:正常对照组(NC组)和葡萄糖浓度为30mmol/L组(G1组)、35mmol/L组(G2组)、45mmol/L组(G3组),并观察各组细胞形态变化,同时测定细胞培养上清液中IL-1β、IL-6蛋白和小胶质细胞IL-1β、IL-6 mRNA水平。结果G2组和G3组培养24h后与NC组比较,神经小胶质细胞易于聚集,胞体、胞核变大,枝状突起明显,胞质内颗粒物增多,且随着葡萄糖浓度升高其作用更为明显;G1组培养上清液中IL-1β、IL-6蛋白水平和NC组的差异均无统计学意义(均P〉0.05),G2组和G3组培养上清液中IL-1β、IL-6蛋白水平均较NC组明显增高(均P〈0.01);高浓度葡萄糖各组IL-1β和IL-6 mRNA的表达水平均较NC组明显增加(均P〈0.01),且G2组和G3组的基因表达水平均较G1组显著增高(均P〈0.01)。结论高糖可上调神经小胶质细胞IL一1β、IL-6的蛋白及mRNA表达水平。 毛瑞阳 杜晓红 赵晓微 董建永 刘毅关键词:葡萄糖 白细胞介素-1Β 白细胞介素-6 温州地区老年体检者血压、血糖、血脂状况调查 目的:了解近五年来在我院体检的老年病人高血压、高血糖、血脂异常的发生率,提高老年人对定期进行健康体检重要性的认识,并探讨相应的干预措施。方法:以2006年-2009年3月间在我院体检中心进行体检的60岁以上健康体检者15... 毛瑞阳 杜晓红关键词:老年人 高血压 血脂异常 高血糖 流行病学 文献传递 柿叶黄酮对同型半胱氨酸诱导小胶质细胞细胞因子表达的影响 被引量:1 2014年 目的观察柿叶黄酮对同型半胱氨酸诱导的小胶质细胞表达白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,并与银杏叶提取物EGb761进行比较。方法将体外培养的小鼠小胶质细胞(BV-2细胞)分成空白对照组、同型半胱氨酸组(Hcy)、Hcy+EGb761组(100mg/L)和Hcy+低、中、高(12.5、25、50μg/mL)剂量柿叶黄酮组,培养72h。应用RT-qPCR方法评价各组IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清液中上述细胞因子的蛋白浓度。结果与空白对照组比较,同型半胱氨酸组细胞内IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达和细胞培养上清液中蛋白浓度明显增加(P<0.05);与同型半胱氨酸组比较,Hcy+EGb761组和Hcy+低、中、高剂量柿叶黄酮组各细胞因子mRNA表达及培养上清液中蛋白浓度均降低(P<0.05),尤其是高剂量柿叶黄酮组结果与Hcy+EGb761组作用相似。结论柿叶黄酮能抑制同型半胱氨酸诱导小胶质细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-α,在一定浓度条件下其作用不亚于银杏叶提取物。 李颖 毛瑞阳 杜晓红 赵晓薇关键词:小胶质细胞 柿叶黄酮 同型半胱氨酸 白介素-1Β 白介素-6 同型半胱氨酸对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响 2014年 目的:研究同型半胱氨酸(HCY)对神经小胶质细胞(bv-2细胞)白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:在细胞培养液中加入HCY、半胱氨酸(DL-CY)、空白对照组及溶剂对照组干预后,用细胞计数试剂盒(CCK8法)观察各组细胞增殖活性,并用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定细胞培养上清液IL-1β、IL-6浓度,用实时荧光定量核酸扩增检测系统(QPCR)的方法评价IL-1β、IL-6 mRNA表达改变。结果:实验各组中细胞增殖活性差异均无统计学意义(P>0.01),而HCY组IL-1β、IL-6的mRNA表达及上清液中蛋白表达与其他各组相比均有显著增加(P<0.01)。结论:HCY上调神经小胶质细胞IL-1β、IL-6的表达。 毛瑞阳 王川怡 杜晓红关键词:同型半胱氨酸 白介素-1Β 白介素-6