- 水稻悬浮细胞再生及根癌农杆菌介导转化的影响因素(英文)被引量:3
- 2009年
- 已经成功报道的农杆菌介导的水稻遗传转化多以活力较高的胚性愈伤为材料,很少以水稻悬浮细胞作为受体.另外,利用农杆菌转化多数都是通过浸泡的方式进行侵染.本实验利用滴加浸染法进行农杆菌介导转化水稻悬浮细胞,探讨影响DNA转化效率的因素.研究显示,在转化前,将水稻悬浮细胞在愈伤诱导培养基上培养1~2周,诱导产生直径为2~3mm的微小愈伤组织对转化非常重要.微小愈伤组织大小不应小于2mm;对悬浮细胞短时间培养不但会缩短植株再生时间,而且会提高转化效率.此外,侵染农杆菌的浓度、侵染时间和不同侵染方法也影响T-DNA插入基因组的效率.用1mlA600值为0.5浓度的农杆菌悬液滴加在水稻悬浮细胞诱导的愈伤,培养3d或直到可见农杆菌菌落,此方法可以得到较高转化效率.将再生的潮霉素抗性的转化植株在含有50mg/L潮霉素的分化和生根培养基中筛选得到,并对转化植株gus基因的表达进行PCR检测.结果显示,用A600值为0.5浓度的农杆菌浸泡侵染20min和滴加浸染法,分别得到PCR阳性植株率为70%和92%.
- PROMMEE Wittaya王梅珍朱登云赵倩敖光明于静娟
- 关键词:根癌农杆菌水稻悬浮细胞
- 谷子SiLEA14基因及应用
- 本发明首次克隆得到与植物逆境胁迫相关的SiLEA14基因(Seq ID No.1),将所述基因转化到植物中可提高植物抗逆性。本发明提供了一种利用SiLEA14基因增加植物抗逆性的新方法,可用于植物抗逆新品种的培育,对于农...
- 于静娟王梅珍朱登云李萍
- 文献传递
- 谷子SiLEA14基因及应用
- 本发明首次克隆得到与植物逆境胁迫相关的SiLEA14基因(Seq ID No.1),将所述基因转化到植物中可提高植物抗逆性。本发明提供了一种利用SiLEA14基因增加植物抗逆性的新方法,可用于植物抗逆新品种的培育,对于农...
- 于静娟王梅珍朱登云李萍
- 文献传递
- 标记抗逆高赖氨酸转基因玉米的获得及谷子中类似胚胎晚期丰富蛋白基因SiLEA功能的初步验证
- 王梅珍
- 关键词:玉米基因枪高赖氨酸谷子转基因烟草根癌农杆菌