王水良
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人细胞色素P450 2E1 cDNA在鼻咽癌细胞系CNE-2的稳定表达被引量：2
- 2001年
- 目的 :为进一步研究人细胞色素P45 0E1 (cytochromeP45 0 2E1 ,CYP2E1 )蛋白对相关化学致癌物的体外代谢功能及其在化学物质鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma ,NPC)变中的作用机制提供体外模型。方法 :应用基因重组技术构建人CYP2E1cDNA真核表达载体pcDNA3 .1 - 2E1 ,并经脂质体介导转入CNE2细胞 ,通过G41 8筛选后挑选若干抗性细胞克隆扩大培养。结果 :经Southernblot和Westernblot对一系列抗性克隆细胞进行检测 ,获得 2个具有外源CYP2E1cDNA基因稳定整合和表达的细胞克隆CNE2 - 2E1 - 1及CNE2 - 2E1 - 2。结论 :建立了可供CYP2E1代谢相关的化学致癌物筛选及CYP2E1在NPC癌变中作用机制研究的体外模型。
- 王水良贺智敏陈主初
- 关键词：细胞色素P4502E1CDNA体外模型鼻咽癌
- 人CYP450 2E1异源性表达模型的建立及底物的表达诱导作用被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨化学致癌物二亚硝基哌嗪 (DNP)对人CYP2E1异源表达的诱导作用。方法 :脂质体介导法将外源人CYP2E1cDNA导入NIH 3T3细胞 ,G4 18筛选后挑取克隆 ,Southernblot鉴定外源基因的整合 ,用不同浓度乙醇和DNP处理阳性克隆 ,RT -PCR和Westernblotting检测各组细胞CYP2E1表达水平。结果 :获得二个具有外源基因CYP2E1cDNA整合及稳定表达的细胞克隆 ;随着乙醇和DNP处理浓度的提高 ,细胞CYP2E1mRNA和蛋白质水平的表达增强。结论 :DNP与乙醇能稳定诱导CYP2E1异源表达 ,其作用可能与其mRNA转录增强有关 ;DNP致癌可能与CYP2E1对其原位代谢活化相关。
- 王水良贺智敏朱建华侯德富陈主初
- 关键词：细胞色素P4502E1基因表达
- 人细胞色素P450 2E1基因在胚胎鼻咽组织、鼻咽癌细胞和组织中的表达被引量：9
- 2002年
- 背景与目的:有研究表明,亚硝胺类化学物质能诱导体内外鼻咽细胞癌变,但作为间接致癌物,其活化主要依赖细胞色素P4502E1(CYP2E1)的代谢。本研究旨在探讨人细胞色素P4502E1(hCYP2E1)基因在化学物质二亚硝基哌嗪(N,N-dinitrosopiperazine,DNP)致鼻咽癌变中的可能作用,为鼻咽癌病因和发病学机制提供新的证据。方法:采用RT-PCR方法检测8例胚胎鼻咽组织,10例鼻咽癌活检组织,5株鼻咽癌细胞系(CNE-1,CNE-2,HNE-1,HNE-2,HNE-3)和1株体外恶性转化的鼻咽细胞系(7429)CYP2E1mRNA水平的表达。用不同浓度(200,250,300μg/ml)化学致癌物DNP作用于体外培养的正常鼻咽细胞后,也用RT-PCR检测其CYP2E1mRNA表达。结果:(1)100%胚胎鼻咽组织(8/8)和鼻咽癌细胞系(6/6,含7429细胞系)、80%(8/10)的鼻咽癌活检组织均存在CYP2E1的表达;(2)经DNP处理的胚胎鼻咽细胞CYP2E1表达增高。结论:鼻咽部存在可诱导的CYP2E1基因表达,提示该基因在亚硝胺类间接致癌物(如DNP)致鼻咽癌变过程中可能发挥重要作用。
- 贺智敏王水良袁建辉陈主初
- 关键词：细胞色素鼻咽癌细胞
- 细胞色素P450 2E1在人鼻咽部的表达及体外表达模型的建立
- 2001年
- 贺智敏王水良等
- 关键词：细胞色素P4502E1鼻咽部致癌机制
- 二亚硝基哌嗪（DNP）对人细胞色素P450 2E1体外表达的影响被引量：2
- 2002年
- 目的建立人细胞色素P450 2E1(CYP2E1) cDNA体外异源表达模型,观察化学致癌物二亚硝基哌嗪(N,N'-dinitrosopiperazine, DNP)对CYPWE1表达的影响.方法脂质体介导转染法将外源人CYP2E1 cDNA导入NIH3T3细胞,PCR和Southern blot鉴定外源基因的整合,RT-PCR检测其表达;用不同浓度乙醇和DNP处理转化细胞,RT-PCR和western bloting检测CYP2E1表达的改变.结果获得二个具外源基因CYP2E1 cDNA整合及稳定表达的细胞克隆NIH3T3-2E1-A1和NIH3T3-2E1-A8;经乙醇和DNP处理的细胞克隆CYP2E1 mRNA和蛋白质水平的表达增强.结论 DNP与乙醇对CYP2E1表达的诱导可能与其mRNA转录增强有关,DNP致癌可能与CYP2E1对其原位代谢活化相关.
- 朱建华贺智敏王水良陈主初
- 关键词：二亚硝基哌嗪细胞色素P4502E1化学致癌物肿瘤病因学
