胡亚楠
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：霍英东青年教师基金江苏省自然科学基金霍英东基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 鲨鱼再生肝组织cDNA文库的构建与差异表达基因的筛选
- 鲨鱼是海洋中较为常见的数量庞大的鱼种之一,长期的研究发现:鲨鱼对肿瘤细胞具有极强的免疫力,即使鲨鱼长期生活在具有强烈致癌物质的环境中,也不会致癌.由于肝脏是动物体内的一种重要的杀菌、解毒器官,而鲨鱼肝脏重量占其体重的25...
- 赵艳景边杉胡亚楠叶波平王旻奚涛吴梧桐
- 关键词：鲨鱼CDNA文库肝组织差异表达基因
- 文献传递
- 酵母与新药研究被引量：3
- 2004年
- 酵母中约有31%的编码基因与哺乳动物的一些重要功能基因具有很高的同源性,这为人类对生命现象的认识带来了新的思考,并将推动药物作用靶点、药物的毒副作用的研究。文章围绕酵母这种“模式”生物建立的几种技术平台的发展和特点,简要综述了它们在药物研究领域中的应用。
- 胡亚楠刘睿吴梧桐叶波平
- 关键词：酵母同源基因双杂交系统新药研究
- 一种简单快速的cDNA文库构建方法被引量：3
- 2005年
- 目的:建立一种以LDPCR(longdistancePCR)为基础的cDNA文库的快速构建方法。方法:以鲨鱼再生肝组织为材料获得总RNA,用偶联有Oligo(dT)的磁珠纯化mRNA后,利用含BamHⅠ酶切位点的Oligo(dT)16引物在逆转录酶MMLV的作用下合成cDNA第一链,进而利用末端转移酶在合成的cDNA第一链的3′末端引入polydC尾;以含BamHⅠ酶切位点的Oligo(dT)16和含HindⅢ酶切位点的Oligo(dG)10为引物,利用LDPCR合成双链cDNA,双链cDNA经BamHⅠ和HindⅢ双酶切,通过T4DNA连接酶连接到经相同双酶切的pUC19载体后构建成cDNA文库,对文库的容量、重组率以及多样性进行分析。结果:通过本方法构建的cDNA文库容量约为5.84×105个/μgdscDNA,重组率为96.7%;对随机提取的30个克隆质粒的插入序列进行分析,共获得25个不同的cDNA序列,且未见重复序列。结论:本法构建的cDNA质粒文库具有快速、简单的特点,构建的文库质量符合要求,可用于大规模的功能基因分析。
- 赵艳景胡亚楠王颖刘睿叶波平王旻吴梧桐
- 关键词：CDNA文库文库构建
- 一种来自于鲨鱼再生肝脏的新功能基因及其重组产物对肝损伤的保护作用
- 叶波平林克江王诚王颖金国虔吴梧桐赵艳景边杉余江河李谦胡亚楠
- 该研究利用现代生物技术手段从鲨鱼肝脏中鉴定并获得一新功能茵在，在对其结构与功能的分析基础上，推测其表达产物具有降酶保肝和促进肝细胞增殖的作用，并进一步利用动物模型对该基因重组产物的药效活性进行了验证，目前尚未见有关该基因...
- 关键词：
- 关键词：鲨鱼新基因肝保护作用
- 条纹斑竹鲨鱼再生肝组织cDNA质粒文库的构建和鉴定被引量：6
- 2005年
- 建立了鲨鱼肝脏的部分切除模型,获得了再生24h的鲨鱼肝组织,分离了再生肝组织的总RNA,纯化了mRNA,利用含BamHI酶切位点的Oligo(dT)16为引物合成cDNA第一链,通过末端转移酶在cDNA第一链3'末端加入Oligo(dC)尾,进而以Oligo(dT)16和含HindIII酶切位点的Oligo(dG)10为引物,通过LD-PCR (long- distance-PCR)方法合成双链cDNA,将双链cDNA经BamHI和HindIII双酶切,通过T4DNA连接酶连接到经相同酶切的pUC19载体后构建成cDNA文库.对文库质量的分析结果表明,通过本方法构建的鲨鱼再生肝组织cDNA文库容量至少为4.92×105个/μg dscDNA,重组率达96.7%.对随机提取30个克隆的质粒进行分析,获得了其中25个插入片段的序列,未见重复序列,经与GenBank和dbEST数据库比对分析发现新基因在其中占较大的比例(76%).鲨鱼再生肝组织cDNA文库的成功构建为进一步通过差异显示技术筛选、克隆肝再生过程中差异表达的相关功能基因奠定了一个良好的基础.
- 赵艳景胡亚楠刘睿王颖余江河叶波平王旻吴梧桐
- 关键词：质粒文库GENBANK斑竹EST数据库差异显示技术末端转移酶
