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FITC示踪在优化小麦花粉管通道转化方法中的应用被引量：4: 2008年; 利用FITC(fluorescein is othiocyanate,异硫氰酸荧光素)标记的外源DNA对小麦进行了花粉管通道法转化,在荧光显微镜下观察了外源DNA进入小麦胚囊的情况,并初步研究了转化时间及转化溶液组成对DNA进入胚囊效率的影响。结果表明,外源DNA沿着花粉管生长过程中形成的花粉管通道进入胚囊;授粉45 min和60min进行转化外源DNA进入胚囊的几率较大,因此在此段时间开始转化较为合适;相对于TE缓冲液,将0.05%Silwet L-77和5%蔗糖作为转化溶液可以缩短DNA进入胚囊的时间,但不能提高外源DNA进入胚囊的几率。研究表明,使用FITC标记观察外源DNA进入胚囊效率的方法,可简便有效地应用于花粉管通道法转化条件的初步优化。; 仇泽苏乔安利佳; 关键词：小麦花粉管通道外源DNA

盐角草甜菜碱合成相关基因的共表达提高转基因烟草的耐盐性被引量：5: 2010年; 植物在逆境下能合成甜菜碱,其中磷酸乙醇胺N-甲基转移酶(PEAMT)和胆碱单加氧酶(CMO)是甜菜碱合成过程中的关键酶。将盐角草SePEAMT基因、SeCMO基因以及烟草的核基质结合区序列(Mar)利用Cre/loxP重组系统构建到同一表达载体上,得到植物表达载体pYLTAC747N-Mar-SePEAMT-SeCMO-Mar。该载体用电击转化法转入农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化烟草,经PCR检测确定转基因植株。在含250mM NaCl的MS培养基上培养35天后,转基因植株生根而野生型植株不能生根;转基因烟草植株甜菜碱积累量显著高于野生型植株,约是野生型植株的5.6～7.7倍;转基因植株与野生型相比,相对电导率显著降低,叶绿素含量明显升高。以上结果表明共表达SePEAMT和SeCMO能有效提高烟草甜菜碱表达量从而提高烟草的耐盐性。; 胡艳梅苏乔祖勇刘纪文; 关键词：甜菜碱耐盐多基因表达载体

海洋微生物冷激蛋白基因CSP、其编码蛋白及其应用: 本发明公开了一种冷激蛋白基因CSP、其编码的蛋白及其应用。本发明的冷激蛋白基因CSP来源于海洋微生物宏基因组，其碱基序列如SEQ ID NO:1，其编码的蛋白CSP是一类高度保守的核酸结合蛋白，可作为RNA分子伴侣，参与...; 苏乔丁风鹅曹钰雪徐永盛; 文献传递

植物跨膜离子转运蛋白与其耐盐性关系研究进展被引量：14: 2006年; 盐胁迫下植物吸收过多的N a+,使植物体内的离子平衡受到破坏,为了维持其正常生长细胞内的各种离子就必须保持平衡,而这一过程主要是由位于质膜和液泡膜上的离子转运蛋白完成的,并在植物耐盐性方面起关键作用。本文主要对响应盐胁迫的几种跨膜转运蛋白如:K+/N a+离子转运蛋白、N a+/H+逆向转运蛋白以及与其相关的H+-ATPase等,在植物耐盐分子生物学方面的研究进展进行综述。; 王景艳张高华苏乔安利佳刘兆普; 关键词：盐胁迫 NA^+/H^+逆向转运蛋白 H^+-ATPASE 耐盐性

无载体、无标记基因植物转化体系的建立和应用: 安利佳苏乔高晓蓉金礼吉夏秀英杨君包永明王长海杨青栾雨时徐品三李文利刘明吴畏王利华牛莉莉王永锋杨继芳孙丽宋继君马强; 该课题采用基因转化序列与花粉管通道法相结合的方法，以玉米和大豆为对象，对5个外源基因进行了转化研究，同时探索了筛选转化材料的检测方法，建立了一种无载体、无标记基因和无组织培养的玉米、大豆转化新体系。设计并构建了由外源基因...; 关键词：; 关键词：植物转化

RLM-RACE法扩增獐茅液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因5′-cDNA末端序列被引量：3: 2007年; 根据已获得的盐生植物獐茅(Aeluropus littoralisvar.sinensisDebeaux)液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白(Na+/H+antiporter)基因部分cDNA片段,设计2条特异引物(GSP1、GSP2),采用RLM-RACE(RNA ligase-medi-ated rapid amplification of 5′and 3′cDNA ends)法获得了其5-′cDNA末端序列,并找出了转录起始位点。该片段长816 bp,与芦苇液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因序列同源性最高达91%,与拟南芥、盐角草、水稻、大麦、小麦的同源性分别为81%、82%、86%、87%和81%,为该基因全长的克隆及启动子的研究奠定了基础。与其它测定基因转录起始位点的方法相比,RLM-RACE方法更快捷、简便、准确。; 王景艳张高华苏乔安利佳刘兆普; 关键词：獐茅 NA^+/H^+逆向转运蛋白转录起始位点

甜菜碱醛脱氢酶基因转化速生杨107的研究被引量：10: 2007年; 利用农杆菌介导法将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入速生杨107号中,以提高其耐盐性。对650个叶盘进行抗生素筛选获得25株抗性芽,PCR检测表明,BADH基因已整合到其中10株的基因组中。耐盐筛选结果表明,转基因植株在NaCl浓度为50、100 mmol/L的生根培养基上生长情况均好于未转化植株;相对电导率测定结果表明,在同等盐胁迫下转基因植株细胞膜较未转化植株能更好的保持其完整性。; 王亮苏乔安利佳; 关键词：甜菜碱醛脱氢酶

辽宁碱蓬胆碱单加氧酶基因克隆及转基因烟草的耐盐性(英文)被引量：13: 2003年; 甜菜碱是生物体内普遍存在的一种很有效的渗透调节剂。在高等植物中 ,甜菜碱由胆碱经两步酶催氧化得到 ,即 :胆碱→甜菜碱醛→甜菜碱 ,催化第一步反应的酶是胆碱单加氧酶 (cholinemonooxygenase ,CMO)。用RT_PCR和RACE技术从盐生植物辽宁碱蓬 (SuaedaliaotungensisKitag)中分离了CMOcDNA全序列 ,其中包括 5′端非编码区12 3bp ,3′端非编码区 36 8bp ,开放阅读框 132 9bp ,编码一个由 4 4 2个氨基酸构成的多肽 ,与菠菜、甜菜和山菠菜CMO的氨基酸序列同源性分别为 77%、72 %和 74 %。克隆了其编码区 ,构建了植物表达载体pBI12 1_CMO ,根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导转化烟草 (NictianatabacumL .cv.89) ,获得卡那霉素抗性植株。PCR和Southern杂交均证明外源CMO基因已整合到烟草基因组中 ,转基因烟草的甜菜碱含量明显高于对照 ,转基因烟草膜的相对电导率明显低于对照 ,说明盐胁迫下转基因烟草的膜结构所受损伤小于对照 ,转基因烟草具有一定的耐盐性 ,能在含 2 5 0mmol/LNaCl的培养基中正常生长。; 李秋莉刘大伟高晓蓉苏乔安利佳; 关键词：辽宁碱蓬胆碱单加氧酶基因克隆转基因烟草耐盐性

转BADH基因玉米的获得及其耐盐性被引量：34: 2006年; 利用花粉管通道技术将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入玉米,以提高玉米的耐盐性.对1 286株转化玉米进行PCR检测,共有16株呈阳性,转化率为1.2%.Southern Blot进一步证明BADH基因已经整合到玉米基因组.将阳性植株的后代(T3)用含1.2%NaCl的Hogland营养液每日1次浇灌,14 d后对玉米叶片的相对电导率和叶绿素含量进行测定.结果表明在同样的盐胁迫条件下,转基因植株所受到的盐伤害明显较对照植株轻,说明转入的BADH基因可以提高玉米的耐盐能力.; 付光明苏乔吴畏赵洪梅安利佳; 关键词：花粉管通道耐盐性玉米 BADH

利用Cre/loxP重组系统构建甜菜碱合成酶多基因表达载体被引量：4: 2007年; 通过使用一套基于Cre/loxP重组系统的植物多基因表达载体构建系统,将辽宁碱蓬（Suaeda liaotungesis kitag）的胆碱单加氧酶（CMO）基因、甜菜碱醛脱氢酶（BADH）基因以及烟草的核基质结合区（MAR）序列构建到同一表达载体上,得到可直接用于农杆菌转化的植物表达载体pYLTAC747H-MAR-BADH-CMO-MAR.该甜菜碱合成酶多基因表达载体的成功构建为进一步进行植物的遗传转化,以有效提高转基因植株的耐盐性提供了实验基础.实验中,用热激法替代了电击法进行质粒的大肠杆菌转化,并去掉了透析等步骤,简化了构建过程.; 王亮苏乔安利佳; 关键词：CRE/LOXP重组系统甘氨酸甜菜碱 CMO BADH 多基因表达载体

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苏乔

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