范灵芝
- 作品数：9 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 激活淋巴细胞cDNA单链库的构建被引量：1
- 1997年
- 介绍一种激活淋巴细胞cDNA单链库构建方法 ,此库具有良好的模板活性 .
- 范灵芝刘彦仿杨新科候云德
- 关键词：CDNA淋巴细胞
- 人IL-4选择性剪接变异体(IL-4δ2)cDNA的克隆和序列测定
- 1998年
- 在对多种细胞因子的激活条件进行对比实验的基础上，我们成功地构建了人外周血激活淋巴细胞ｃＤＮＡ单链库。并采用ＩＬ－４特异引物和ＲＴ－ＰＣＲ技术，在从此库中克隆出了ＩＬ－４ｃＤＮＡ的同时，也获得了其选择性剪接变异体（ＩＬ－４δ２）ｃＤＮＡ。测序结果表明，所克隆的ＩＬ－４δ２ｃＤＮＡ含有成熟ＩＬ－４蛋白的外显子１，３，４编码区和前导肽编码序列，唯编码１６个氨基酸的外显子２在转录后被剪接掉。这一研究为今后进一步探究细胞因子选择性剪接变异体的工作奠定了基础。
- 贾松惠范灵芝侯云德
- 关键词：选择性剪接基因克隆
- 三种抗G-CSF单链抗体基因的表达及活性鉴定
- 1999年
- 从重组人ＧＣＳＦ免疫小鼠全套单链抗体噬菌体表面展示文库中， 筛选到３ 个具有ＧＣＳＦ抗原结合活性的重组噬菌体单链抗体基因。将其感染不含Ｓｕｐ Ｅ的Ｅ． ｃｏｌｉ 菌株， 获得以ＳｃＦｖＥｔａｇ 形式的目的抗体片段的可溶性表达。经ＥＬＩＳＡ和Ｄｏｔｂｌｏｔ 检测， 表达产物具有与ＧＣＳＦ抗原结合的活性。ＮＦＳ６０ 细胞株抑制实验初步表明， 表达产物具有抑制ＧＣＳＦ的作用。
- 贾松惠郭鹞范灵芝梁米芳侯云德
- 关键词：G-CSF单链抗体基因表达活性鉴定
- 重组人G—CSF免疫小鼠全套单链抗体噬菌体表面展示文库的构建被引量：3
- 1999年
- 利用全套噬菌体抗体表面展示技术，绕过杂交瘤技术，从重组人G-CSF免疫的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA，反转录成cDNA后，用抗体可变区PCR混合引物进行全套抗体重、轻链可变区（VH和VL）基因的扩增。经重叠延伸反应，在体外随机装配成单链抗体（ScFv）。将其克隆至噬菌粒载体pCANTAB5E中，电转化含SupE的E.Coli菌株，以辅助噬菌体M13K07超感染噬菌粒文库，构建成全套ScFv表面展示文库。为利用亲和富集筛选技术，获得具有G-CSF结合活性的完整重组噬菌粒克隆奠定了基础。
- 贾松惠郭鹞范灵芝梁米芳侯云德
- 关键词：G-CSF单链抗体噬菌体基因文库
- 大鼠终纹床核内血管活性肠多肽免疫阳性物质的分布
- 1991年
- 根据最近鞠躬等对终纹床核的划分,本文用ABC、PAP法研究血管活性肠多肽免疫阳性物质在终纹床核内的分布。发现终纹床核内血管活性肠多肽免疫阳性终末较多,分布较集中。以卵圆核的周边部及囊旁核密度最高;前侧区的前连合上方及卵圆核的中央次之;梭形核、前腹区的吻侧水平面含中等密度阳性终末;主核、束间核、后背核内无免疫阳性物质。此外,终纹床核内可见许多沿血管壁走行的阳性纤维。血管活性肠多肽免疫阳性细胞多分布在免疫阳性终末较稀少的区域,以卵圆核中央密度最大,前背区尾侧水平最多。细胞多为中小型梭形细胞,也有三角形及多极形的细胞。
- 范灵芝鞠躬
- 关键词：血管活性肠肽终纹床核大白鼠
- 人黄体松弛素原基因的克隆及在大肠杆菌中的初步表达被引量：2
- 1997年
- 为了加速我国基因工程高技术药物的研制，开发新型、具有生物活性功能的人重组松弛素原，利用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术从人黄体组织克隆了松弛素原的编码基因，包括Ｂ和Ａ链以及连接肽（Ｃ肽）。克隆的松弛素原基因进行序列测定后，再亚克隆到原核表达载体ＬＫＢ２，转化大肠杆菌ＢＬ２１，用ＩＰＴＧ诱导表达。结果表明，克隆的松弛素原基因与已发表的基因序列相同，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示表达蛋白的分子量为２０ｋＤ，为可溶性蛋白，占菌体蛋白的３０％。
- 丁传天杨新科毕胜利范灵芝范灵芝侯云德
- 关键词：基因表达大肠杆菌PCR
- 人白细胞介素13cDNA克隆及序列分析
- 1995年
- 人白细胞介素１３ｃＤＮＡ克隆及序列分析范灵芝，杨新科，段淑敏，刘彦仿，侯云德白细胞介素１３（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１３，ＩＬ－１３）是近年来发现的一种新的免疫调节介质［１］，它主要由激活的Ｔ淋巴细胞产生，具有调节单核细胞及Ｂ淋巴细胞的功能，在病毒免...
- 范灵芝杨新科段淑敏刘彦仿侯云德
- 关键词：白细胞介素13CDNA克隆提纯
- 全文增补中
- 人白细胞介素13 cDNA的克隆及序列测定被引量：1
- 1997年
- 用反转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术从中国人外周血淋巴细胞中克隆了ＩＬ－１３ｃＤＮＡ，序列测定表明克隆的ＩＬ－１３ｃＤＮＡ含成熟的ＩＬ－１３蛋白全部编码，且存在编码第９８位Ｇｌｎ的密码子ＣＡＧ。这为进一步表达ＩＬ－１３并深入探究其功能奠定了基础。
- 范灵芝杨新科侯云德贾松惠赵利军刘彦仿
- 关键词：白细胞介素13基因克隆聚合酶链反应
- 具有G-CSF抗原结合活性的三个重组噬菌体单链抗体基因的筛选及序列测定
- 1999年
- 利用固相化GCSF亲和吸附法,从已构建的抗rhGCSF全套单链抗体(ScFv)噬菌体表面展示文库中,筛选出含有特异抗体片段的噬菌体颗粒。结合直接感染法和酸性洗脱液洗脱法,进行4轮亲和富集筛选,并通过ELISA法结合双酶切鉴定,共筛选出9个具有GCSF结合活性的完整的重组噬菌粒克隆。对其中3个阳性克隆进行了ScFv基因全序列测定,获得6个抗体可变区基因的全序列。计算机分析表明,它们均为新发现的小鼠免疫球蛋白可变区基因。
- 贾松惠郭鹞范灵芝梁米芳侯云德
- 关键词：G-CSF可变区基因
