解勤之
- 作品数：64 被引量：208H指数：9
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 改良骨髓涂片免疫酶标ABC法的建立及其临床应用
- 2005年
- 目的:建立一种准确性高、简便易行、成本低的急性白血病(AL)免疫分型方法。方法:对常用的骨髓涂片免疫酶标ABC法进行改进,检测29例AL患者CD3、CD14、CD19、CD33的表达,同时将其检测结果与流式细胞术法检测结果进行比较。用已建立的改良骨髓涂片免疫酶标ABC法检测55例AL的免疫学表型,并与形态学分型进行比较。结果:改良骨髓涂片免疫酶标ABC法较传统骨髓涂片免疫酶标ABC法敏感性高,结果更准确;视野更加清晰,背景染色低;与流式细胞术法检测的4种分化抗原阳性表达百分比之间差异无统计学意义(P>0.05),结果具有同等意义。本研究建立的方法可用于白血病的免疫学分型,可对形态学诊断起必要的补充作用,尤其是对形态学难以分类的白血病。结论:改良骨髓涂片免疫酶标ABC法是一种准确性高、简便易行、低成本的AL免疫分型方法,可在基层医院推广用于临床。
- 信红亚陈方平张国平王光平解勤之李群程英妮赵谢兰舒毅刚吴登蜀何群
- 关键词：骨髓涂片免疫分型
- GPⅡb^(R995A)点突变对受体亲合力及PP125^(FAK)磷酸化的影响被引量：1
- 2001年
- 目的:为了进一步探讨血小板膜(GPⅡb)胞内段在信号传递中的作用。方法:选择表达GPⅡb^(R995A)Ⅲa的CHO细胞为研究对象,以正常人血小板和表达GPⅡbⅢa的CHO细胞为对照,应用流式细胞术、免疫沉淀、western blot-ting等方法检测PAC-1且结合能力和PP125^(FAK)磷酸化。结果:GPⅡbⅢa CHO细胞几乎不结合PAC-1,而GPⅡb^(R995A)ⅢaCHO细胞结合PAC-1明显增加;GPⅡbⅢa CHO细胞只有在粘附纤维蛋白原后才有FAK磷酸化,GP血b^(R995A)Ⅲa CHO细胞在悬浮时即有微弱的FAK磷酸化。结论:本研究提示GPⅡb^(R995A)点突变能改变受体的低亲合力状态,使受体具有高亲合性;该突变还介导细胞内信号传导,引起非配体结合的FAK磷酸化。
- 唐雪元陈方平蹇在伏解勤之赵谢兰王光平
- 关键词：磷酸化
- GPⅡb钙离子结合结构域缺陷的血小板无力症
- 1996年
- 为了从分子水平阐明血小板无力症的发病机理，对一例Ⅰ型血小板无力症进行了系列研究。用抗血小板膜糖蛋白Ⅱｂ，Ⅲａ（ＧＰⅡｂⅢａ）单克隆抗体（ＳＺ－２２，２１）作免疫印迹分析发现患者ＧＰⅡｂ，Ⅲａ明显减少；完整血小板膜表面Ⅱｂ，Ⅲａ和αｖβ３结合试验显示患者几乎缺乏ＧＰⅡｂ，Ⅲａ复合物，而αｖβ３复合物数量增加，提示原发缺陷位于ＧＰⅡｂ；提取患者ＤＮＡ对ＧＰⅡｂ全部３０个外显子和启动子序列进行ＰＣＲ－单链构象多态性－测序研究发现，患者ＧＰⅡｂ第１３外显子第８６５８～８６７３位核苷酸１６个碱基缺失，对应于ＧＰⅡｂ第３、４钙离子结合之间第４００～４０５位６个氨基酸丢失（精４００－丝－精－脯－丝－谷氨酰－４０５），该缺陷可能改变了ＧＰⅡｂ钙离子结合的结构和空间构象，使ＧＰⅡｂ，Ⅲａ复合物不能形成，或虽有复合物形成但不稳定而容易被降解。
- 陈方平解勤之周伯通蹇在伏
- 关键词：血小板无力症
- 全文增补中
- 血小板无力症整合素 α Ⅱ b,β_3 和α Ⅴ,β_3 表达水平及意义被引量：4
- 1997年
- 血小板无力症整合素αⅡｂ，β３和αⅤ，β３表达水平及意义陈方平解勤之赵谢兰蹇在伏我们用单克隆抗体放射受体分析法检测了７例中国人血小板无力症αⅡｂ，β３和αⅤ，β３的表达水平，同时用单克隆抗体对αⅡｂ，β３（血小板膜糖蛋白ＧＰⅡｂ，Ⅲａ）作免疫印迹分析...
- 陈方平解勤之赵谢兰蹇在伏
- 关键词：血小板无力症整合素
- 重组腺相关病毒介导的人凝血因子IX基因在人/鼠结肠癌上皮细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨重组腺相关病毒/人凝血因子IX基因(rAAV-2/hFIX)在人/鼠结肠癌上皮细胞(SW480/C26细胞株)中的表达。方法:重组腺相关病毒/绿色荧光蛋白(rAAV-2/GFP)感染SW480/C26细胞,在荧光显微镜下观察GFP的表达,计算转染率。rAAV-2/hFIX感染SW480/C26细胞,检测hFIX基因、FIXAg量及hFIX活性的表达。结果:SW480细胞株/C26细胞株GFP48hr阳性率分别为(57.0±8.5)%和(48.0±5.7)%;转导组14 d和21 d均可见外源hFIX的cDNA片断。SW480细胞转导了rAAV-2/hFIX后在第2天和第21天ELISA法测hFIX抗原量分别为(98.0±4.3)和(30.9±6.5)ng.106cell-1.24h-1。未转导组为(2.7±0.1)ng.106cell-1.24h-1。C26细胞转导了rAAV-2/hFIX后在第2天测hFIX抗原量为(78±5.12)ng.106cell-1.24h-1。未转导组为(2.9±0.1)ng.106cell-1.24h-1。hFIX活性与hFIX抗原浓度明显相关。较对照组亦显著增高。结论:rAAV-2/GFP能有效地转导SW480/C26细胞。rAAV-2/hFIX能有效地转导SW480/C26细胞并表达具有凝血活性的功能蛋白hFIX。
- 马泳泳陈方平杜建伟陈焱彭建强吴小兵解勤之
- 关键词：血友病B基因治疗法重组腺相关病毒结肠上皮细胞
- 再生障碍性贫血患者红细胞表面阴离子位点
- 1996年
- 采用透射电镜观察再生障碍性贫血患者红细胞表面的阴离子位点，并用图象分析仪检测阴离子位，点的面积和平均灰度值，与正常人红细胞表面阴离子位点比较，再障组红细胞表面阴离子位点的密度减少，积分光密度明显降低，用神经氨酸酶处理后的表面阴离子位点均少于相应对照组。
- 严文保周军李玉禄李晓林解勤之
- 关键词：再生障碍性贫血红细胞
- rAAV2/hFⅨ无创途径治疗血友病B的临床研究
- ＜正＞目的：检测通过结肠灌注 rAAV2/hFIX 载体治疗血友病 B 的有效性和安全性。方法：选择了两位血友病 B 患者,在纤维结肠镜引导下结肠灌注 rAAV2/hFIX 载体,观察其临床症状和体征变化,留取患者全血、...
- 周淑娟彭捷王光平解勤之陈方平
- 关键词：基因治疗
- 文献传递
- αⅡbA477P(A446P)——发生于血小板无力症患者的新突变被引量：6
- 2004年
- 【目的】明确血小板无力症患者的基因缺陷 ,为进一步探讨其发病机理奠定实验基础。【方法】通过 4 0对引物对GT 5 7的αⅡb和 β3亚基基因的所有 4 5个外显子及其剪接点进行了全长的PCR扩增 ,然后对PCR产物进行了SSCP 聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,发现αⅡb基因的 14号和 15号外显子 (Exon14 /15 )的PCR扩增产物出现了异常条带 ,对外显子 14 /15的PCR产物进行了直接测序。【结果】αⅡb基因外显子 14发生了点突变G→C ,导致氨基酸密码由GCT→CCT ,该突变位于αⅡb亚基cDNA第 14 30个碱基 ,导致第 4 77( 4 4 6 )位氨基酸残基由丙氨酸转变成脯氨酸 [αⅡbA4 77P(A4 4 6P) ]。【结论】通过查阅文献资料 ,αⅡbA4 77P(A4 4 6P)
- 袁小瑜陈方平解勤之蹇在伏王光平
- 关键词：血小板无力症突变
- 急性白血病患者的凝血及血小板聚集功能分析
- 1996年
- 急性白血病患者的凝血及血小板聚集功能分析湖南医科大学附属湘雅医院血液研究室（４１０００８）舒毅刚，钟美佐，解勤之出血是急性白血病患者常见的临床表现之一，其发生机理与血小板减少及其功能障碍、凝血功能改变和毛细血管壁的浸润等综合因素有关。本文对３２例急性...
- 舒毅刚钟美佐解勤之
- 关键词：白血病急性凝血功能血小板聚集功能
- 静脉采血对PT和APTT影响因素分析及对策被引量：1
- 2002年
- 周谊辉龙菊华蹇在伏解勤之
- 关键词：静脉采血凝血酶原时间活化部分凝血活酶时间
