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MicroRNAs与肾相关疾病诊断的研究进展: 2015年; 肾脏代偿功能强大,肾相关疾病早期症状不明显,易延误治疗契机导致肾脏不可逆性病变,严重影响人类生存和生活质量。微小RNAs(microRNAs,miRNAs)在机体的生长发育中必不可少,研究表明,miRNAs在疾病的发生、发展以及预后中发挥着重要作用。本文就近年来miRNAs在肾相关疾病早期诊断和预后评价中的研究进展作一综述。; 祝源张娇俞静贾浩源尹磊许文荣钱晖; 关键词：微小RNA 肾病

人脐带间质干细胞来源的exosomes对肝细胞过氧化损伤的保护作用被引量：2: 2013年; 目的探讨人脐带间质干细胞来源的exosomes(hucMSC-Ex)对四氯化碳(CCL4)诱导的肝细胞氧化应激损伤的保护作用。方法将体外培养的人肝细胞系HL7702分为对照组(常规培养)、CCL4损伤组及hucMSC-Ex处理组(CCL4+hucMSC-Ex)。免疫荧光检测CM-Dil染料标记的hucMSC-Ex进入HL7702细胞的情况;免疫组织化学法分析细胞过氧化物8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)的表达水平;比色法检测培养上清中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量;western blot分析P38MAPK通路的活化情况。结果免疫荧光结果显示,hucMSC-Ex可转移进入HL7702细胞;比色法结果表明,与对照组相比,CCL4损伤组HL7702细胞培养上清中GSH含量下降,MDA上升(P<0.01),hucMSC-Ex处理组GSH和MDA含量无显著性变化;免疫组化结果显示,与对照组相比,CCL4损伤组8-OHdG表达阳性的HL7702细胞(胞核棕黄色)数量明显增高,而hucMSC-Ex处理组阳性细胞数量无明显变化;western blot结果表明,CCL4损伤组P-P38蛋白表达水平明显上升,而hucMSC-Ex处理组P-P38蛋白表达下降,其P-P38与P38/GAPDH蛋白的灰度值较CCL4损伤组下降约2.4倍。结论 HucMSC-Ex可减轻CCL4诱导的肝细胞过氧化损伤。; 王冰莹肖宇晴蒋留留李里明李霞贾浩源周颖叶惠慧许文荣严永敏钱晖; 关键词：脐带间质干细胞四氯化碳肝损伤

人脐带间质干细胞来源的外泌体对顺铂抗肿瘤疗效的影响被引量：1: 2017年; 目的:探讨人脐带间质干细胞来源的外泌体(exosome from human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSC-ex)对顺铂抗肿瘤效果的影响,评价hucMSC-ex的安全性。方法:蛋白质印迹法检测外泌体的表面特异性分子CD9、CD63以鉴定hucMSC-ex。通过细胞抑制率测定、克隆形成实验、细胞迁移实验,检测hucMSC-ex存在条件下顺铂对HGC-27细胞和MGC-803细胞抑制率、克隆形成及迁移效率的影响。结果:HucMSC-ex表达外泌体特异性分子标志物CD9、CD63;hucMSC-ex能减弱顺铂对HGC-27细胞和MGC-803细胞的生长抑制作用,但不影响顺铂作用后的HGC-27细胞和MGC-803细胞克隆形成及迁移效率。结论:hucMSC-ex对顺铂抗肿瘤疗效无明显影响,具有一定的安全性。; 王娟娟贾浩源张斌俞静纪成毛飞许文荣钱晖; 关键词：顺铂化疗

大鼠骨髓间质干细胞来源的外切体抑制顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡被引量：1: 2015年; 目的:观察大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)来源的外切体(exosome)对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法:原代培养大鼠骨髓MSC并提取外切体鉴定。构建顺铂损伤NRK-52E细胞模型,损伤组为5μmol/L顺铂处理6 h后正常营养液培养48 h,处理组为顺铂损伤后以100μg/m L外切体共培养48 h。未经任何处理的NRK-52E细胞为对照组。TUNEL-FITC,凋亡双染流式细胞术,蛋白质免疫印迹技术检测各组细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,损伤组NRK-52E细胞肿大,胞核不规则样改变,凋亡细胞增多,凋亡相关蛋白Bax上调而Bcl-2下调;处理组NRK-52E细胞肿大较损伤组缓解,胞核形态改善,凋亡细胞减少,Bax下调且Bcl-2上调。结论:大鼠骨髓MSC来源的外切体对顺铂诱导的NRK-52E细胞凋亡有一定的抑制作用。; 祝源杨芳张娇薛建国尹磊俞静贾浩源纪成钱晖; 关键词：顺铂肾小管上皮细胞凋亡

脐带间质干细胞来源的外泌体抑制TGF-β_1诱导的NRK-52E细胞上皮-间质转化被引量：2: 2017年; 目的:探讨脐带间质干细胞来源的外泌体(exosome from human umbilical mesenchymal stem cells,huc MSCex)对转化生长因子β_1(TGF-β_1)诱导的NRK-52E细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其机制。方法:体外培养大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞,TGF-β_1诱导使其发生EMT作为诱导组,未经任何处理的NRK-52E细胞为对照组,TGF-β_1处理24 h后加入huc MSC-ex共培养48 h为干预组。倒置显微镜下观察各组细胞形态;蛋白质印迹法检测细胞中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原α1链(Col1A1)和TGF-β_1等蛋白表达,qRT-PCR检测miR-199a表达。结果:TGF-β_1诱导24 h后,细胞由卵圆形变为长梭形,且细胞密度降低。给予huc MSC-ex干预后,细胞形态恢复。与对照组相比,诱导组E-钙黏蛋白表达降低,N-钙黏蛋白,α-SMA、Col1A1和TGF-β_1表达升高;干预组相关蛋白表达较诱导组发生逆转;诱导组中miR-199a表达下调,而huc MSC-ex干预组表达增加。结论:huc MSC-ex通过上调NRK-52E细胞miR199a表达逆转由TGF-β_1诱导的EMT作用。; 俞静张荣雪贾浩源王娟娟纪成许文荣钱晖; 关键词：脐带间质干细胞外泌体上皮-间质转化 MIRNA

人脐带间充质干细胞来源的exosomes对脂多糖诱导的肝星状细胞活化的抑制研究被引量：1: 2014年; 目的探讨人脐带间充质干细胞(hucMSC)来源的外体(exosomes,hucMSC-Ex)对脂多糖(LPS)诱导的人肝星状细胞系LX2活化的抑制作用及其可能机制。方法体外培养LX2细胞,分别设PBS对照组、LPS组(100 ng/mL)及hucMSC-Ex组(LPS+150μg/mL hucMSC-Ex),48 h后收集细胞并提取相应的RNA及蛋白质。western blot检测LX2活化相关指标(α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白)和凋亡指标(Bcl2、Bax及caspase3蛋白)的表达情况;RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测α-SMA mRNA表达水平;MTT法分析hucMSC-Ex对LX2细胞活化后增殖的影响。结果 LPS可刺激LX2细胞活化,活化后的LX2细胞形态由不规则形状向成纤维细胞样改变,并高表达α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白,其灰度值分别上升约2.45、2.34、2.77倍(P均<0.05);Bax及caspase3蛋白表达下降而Bcl2蛋白表达增强;LX2增殖能力增强;经hucMSC-Ex处理后,细胞形态由细长向不规则形态转变,α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白表达减弱,高表达Bax及caspase3蛋白而Bcl2蛋白表达下降,且细胞增殖减少(F=23.44,P<0.05)。结论 hucMSC-Ex能够抑制LPS诱导的LX2细胞活化,降低其增殖能力并促进细胞凋亡。; 李里明蒋留留祝源严永敏叶惠慧贾浩源薛建国朱伟许文荣钱晖; 关键词：脐带间充质干细胞脂多糖肝星状细胞

脐带间质干细胞来源的外切体对顺铂诱导的人肾小管上皮细胞损伤的修复作用被引量：2: 2014年; 目的:研究人脐带间质干细胞来源的外切体(hucMSC-Ex)对顺铂诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的修复作用,并探讨可能的作用机制。方法:体外建立顺铂诱导的HK-2细胞损伤模型,实验组以16μmol/L浓度的顺铂作用HK-2细胞16 h,再加入hucMSC-Ex共培养,同时选择人肺成纤维细胞的外切体(HFL1-Ex)为对照,8 h后采用蛋白质印迹法和FITC-Tunel技术检测hucMSC-Ex对损伤HK-2细胞的抗凋亡和促增殖情况。未经任何处理的HK-2细胞作为正常对照组,单纯顺铂损伤并加等量PBS为PBS对照组。结果:成功建立了顺铂诱导的HK-2细胞损伤体外模型,蛋白质印迹分析显示hucMSC-Ex处理改善了顺铂对HK-2细胞的损伤,凋亡蛋白Bax表达降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达相应升高。FITC-Tunel检测也显示HK-2细胞的凋亡明显减弱。而MTT分析显示hucMSC-Ex处理后,HK-2细胞的增殖能力显著增强。结论:HucMSC-Ex对顺铂诱导的HK-2细胞损伤有一定的修复效果,可能是通过促进HK-2细胞的增殖和抑制其凋亡来实现的。; 蒋留留贾浩源祝源尹磊李里明叶惠慧薛建国许文荣钱晖; 关键词：顺铂人肾小管上皮细胞增殖凋亡

人肺癌A549细胞系SP细胞分选条件的优化: 目的优化人肺癌A549细胞系分选SP细胞的条件.方法将人肺癌A549细胞分为两组：Hoechst33342组和抑制组(Hoechst33342+ Verapamil),流式细胞仪分选SP细胞.设置Hoechst333...; 叶惠慧贾浩源张蕾蕾薛建国蒋留留李里明许文荣钱晖; 关键词：SP细胞流式细胞术人肺癌细胞肿瘤干细胞

人脐带间质干细胞来源的exosomes对体内、外肝星状细胞活化的抑制作用: 李里明贾浩源蒋留留叶惠慧祝源严永敏钱晖; 关键词：脐带间质干细胞 EXOSOME 肝星状细胞

PEG诱导间充质干细胞与胃癌细胞融合的研究: 2015年; 目的探讨聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)1500诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesechymal stem cell,huc MSC)与胃癌细胞系(HGC-27)融合的可能性及融合细胞(hybrids)的活力。方法荧光染料DIO、DID分别标记HGC-27与huc MSC;细胞计数法观察标记前后细胞增殖情况;PEG1500诱导细胞融合后,用荧光显微镜观察双色的融合细胞;CCK-8法检测融合细胞的活性;流式细胞术分析融合细胞的细胞周期。结果 DIO与DID荧光染料可分别标记HGC-27(表达绿色荧光)与huc MSC(表达红色荧光),且标记对细胞增殖无明显影响;荧光显微镜可观察到双色双核的融合细胞;流式细胞术结果表明,与HGC-27细胞相比,融合细胞活性增强,细胞周期中G1期比例降低,S期比例升高(P<0.01)。结论 PEG可诱导huc MSC与HGC-27细胞融合,且融合后的细胞表现很强的体外增殖活性。; 薛建国尹磊祝源纪润璧贾浩源张娇俞静纪成王娟娟许文荣钱晖; 关键词：脐带间充质干细胞胃癌细胞细胞融合聚乙二醇

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贾浩源

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