赵春礼
- 作品数：121 被引量：271H指数：9
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 羊膜上皮细胞条件培养液对大鼠骨髓基质细胞神经分化的影响
- ＜正＞骨髓基质细胞 （bone marrow stromal cells,BMSCs）体外诱导分化为神经细胞的研究,不仅具有重要的理论意义,而且具有广阔的应用前景,是目前生命科学领域的一大研究热点。本研究的目的在于探讨羊...
- 王丹妮季凤清孙海梅李荣平赵春礼杨慧
- 文献传递
- 成人骨骼肌细胞原代培养被引量：9
- 2001年
- 本研究以获取基因治疗自体移植的载体为目的 ,观察了生长因子对成人骨骼肌卫星细胞增殖的影响。用手术中取得的成人骨骼肌进行体外组织块培养及酶消化培养 ,用成纤维细胞生长因子及表皮生长因子进行处理 ,作动态观察。结果证明 ,消化分离出的肌卫星细胞数量极少 ,培养不能成活 ;组织块培养肌卫星细胞的增殖与生长因子的作用有关 ,成纤维细胞生长因子及表皮生长因子处理组的增殖细胞数显著高于对照组。提示 ,生长因子可促进成年人骨骼肌卫星细胞增殖 ,但与其年龄及部位有一定关系。
- 吕捷赵春礼李玉成张进禄徐群渊
- 关键词：成纤维细胞生长因子表皮生长因子卫星细胞骨骼肌
- 5-HT_(1A)受体蛋白在PC12细胞膜转运的动态变化
- 2010年
- 目的在神经元样PC12活细胞上进行实时、可视和定量研究5-羟色胺1A受体的时空分布、膜转运和信号传导机制。方法运用RT-PCR方法获得小鼠5-HT1A基因,并插入到pEGFP-N1真核表达载体中。采用阳离子脂质体方法将质粒转染至PC12细胞和HEK293细胞中,通过G418筛选出稳定表达5-HT1A-EGFP的PC12细胞系。运用激光共聚焦成像系统观察活细胞中5-HT1A-EGFP的表达情况,利用光漂白荧光恢复(FRAP)技术在PC12细胞膜局部漂白后观察5-HT1A-EGFP荧光蛋白在细胞膜上转运的情况。结果克隆所获得的小鼠5-HT1A基因是准确的。5-HT1A-EGFP蛋白清晰的分布于PC12和HKE293细胞膜上。通过FRAP技术观察到漂白区域的细胞膜在100s内有部分恢复,说明受体在细胞膜上发生转运。结论建立了稳定表达5-HT1A-EGFP融合蛋白的PC12细胞系,并利用活细胞成像和FRAP技术观察分析并证实了5-HT1A受体在PC12细胞的膜表面的表达和转运的动态变化。
- 金艳燕吕琼闫竹青高尔静赵春礼张进禄徐志卿
- 微囊化转TH基因人成纤维细胞脑内移植治疗帕金森病大鼠模型的研究被引量：2
- 2000年
- 目的 探讨微囊化转酪氨酸羟化酶 (TH)基因的细胞在帕金森病 (PD)大鼠模型脑内存活、组织反应及对异常行为的治疗效果。 方法 以人 TH基因作为目的基因 ,重组到逆转录病毒载体感染人成纤维细胞 ,将细胞包裹在 APA半透膜中进行微囊化后 ,植入 6 -羟多巴胺单侧损毁的 PD大鼠模型纹状体内 ,观察移植物的存活状况和功能作用 16周。 结果 体外和植入体内的微囊化转基因细胞具有良好的存活能力。移植微囊化细胞可以使大鼠异常运动明显改善 ,移植位点周围的免疫反应较小。
- 戴晓玲张进禄徐群渊赵春礼赵焕英孙晓红郑少鹏
- 关键词：帕金森病基因治疗TH基因微囊化
- 两种价态锰化合物对SH-SY5Y细胞损伤作用的体外研究被引量：4
- 2002年
- 为探讨两种价态 (2价和 3价 )锰化合物对 SY5 Y细胞的细胞毒性和引起细胞凋亡的作用 ,选择了多巴胺能神经细胞 SH- SY5 Y细胞作为受试系统 ,细胞活力测定结果显示 Mn2 +和 Mn3+可依时间和剂量依赖性而使细胞的存活率减少 ,但 Mn3+的细胞毒性作用高于 Mn2 + ,相差显微镜下观察 ,Mn2 +和 Mn3+刺激细胞 2 4 h后 ,细胞变圆 ,贴壁状态不好 ,HE染色得到相似的结果 ,在用流式细胞仪观察 Mn2 + 和 Mn3+ 的致凋亡作用中发现 ,不同价态锰均可引起 SH- SY5 Y细胞发生凋亡 ,但 Mn3+ 的致凋亡作用强于 Mn2 + 。
- 周春艺李国君张晨李鹏高杨慧赵春礼褚金花张杰张淑华
- 关键词：SH-SY5Y细胞损伤体外研究
- 外源性Nurr1基因过表达对SK-N-SH细胞分化作用的研究被引量：5
- 2005年
- 为研究外源性Nurr1基因过表达对转染细胞的作用,探讨Nurr1基因调控多巴胺能神经元分化的机制。本研究应用:(1)pBK- RSV -Nurr1质粒经脂质体法转染SK- N- SH细胞,G418筛选;用RT PCR和免疫细胞化学方法检测基因转染细胞Nurr1mRNA及Nurr1蛋白的表达; (2)all- trans- RA、9- cis- RA、forskolin诱导基因转染细胞,RT PCR及免疫荧光细胞化学方法检测基因转染细胞MAP2 和TH的表达。结果显示: (1)经RT -PCR检测,基因转染细胞表达Nurr1mRNA;免疫细胞化学染色结果显示基因转染细胞表达Nurr1蛋白,说明外源性Nurr1基因在转染细胞内过表达;基因转染细胞形态与正常细胞相比没有明显变化,生长速度略有降低并表达成熟神经元的特异性标识物MAP2,但不表达多巴胺能神经元的特异性标识物TH。(2)尽管RA、forskolin诱导可促进Nurr1基因转染的SK- N- SH细胞进一步向成熟神经元分化,但不能诱导基因转染细胞表达TH。结论:单纯的Nurr1过表达可以促进SK- N- SH细胞向成熟神经元方向分化,但不足以激活TH基因转录。TH基因的转录激活还需要除Nurr1以外的其它细胞(或神经元)的环境或因子的共同作用。
- 赵咏梅张海燕刘扬邹西峰赵春礼苏玉金徐群渊
- 关键词：NURR1基因基因转染细胞外源性
- 不同诱导因子对人脐带血非造血干细胞神经分化的影响被引量：4
- 2007年
- 目的探讨诱导人脐带血非造血干细胞向神经细胞分化的最佳条件。方法通过密度梯度离心法原代培养脐带血非造血干细胞;用流式细胞术分析脐带血获得的贴壁细胞的CD34、CD90、CDl66、HLA-ABC、HLA-DR等免疫表型;并用不同诱导因子组合:1.维甲酸(RA);2.表皮生长因子(EGF)+碱性成纤维细胞生长因子(bFGF);3RA+EGF+bFGF;4二甲基亚砜(DMSO)+丁羟基茴香醚(BHA)诱导后,用免疫荧光化学法检测各组脐带血非造血干细胞中β-微管蛋白-Ⅲ(β-tubulin-Ⅲ)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖苷酶-C(Gal-C)等神经细胞、星型胶质细胞及少突胶质细胞的特异性标记抗原的表达。结果脐带血非造血干细胞CD90、CD166、HLA-ABC表达阳性;无论那一种诱导因子组合,分化为少突胶质细胞的比率均高于神经元及星型胶质细胞;即各组分化为少突胶质细胞数>神经元的细胞数>星型胶质细胞数。对于少突胶质细胞(Ga-C)以RA+EGF+bFGF组合诱导率最高,达57.02%,其次是DMSO+BHA诱导组。而对于神经元及星型胶质细胞的分化各组比较,以RA组最高,其次是DMSO+BHA诱导组合。结论RA对神经元及星型胶质细胞的诱导作用较好,而RA+EGF+bFGF组合对于少突胶质细胞诱导作用最明显。
- 季凤清王屹孙海梅李荣平王丹妮曾晓蓓赵春礼王秀琴杨慧
- 关键词：神经细胞胶质细胞人脐带血
- 逆转录病毒载体ex vivo途径表达TH和GDNF基因被引量：6
- 2004年
- 为了通过逆转录病毒载体 ex vivo途径高效表达 TH和 GDNF基因。本实验构建有 TH和 GDNF基因的重组逆转录病毒载体 p LHCX/TH和 p L NCX2 /GDNF,分别转染包装细胞 PA3 17和 PT67中 ;经筛选、RT-PCR、免疫组化等鉴定得到产毒细胞 PA3 17/TH和 PT67/GDNF。培养 COS-7细胞 ,以两种产毒细胞的上清分别感染 COS-7细胞 ,筛选后 ,免疫组化、原位杂交检测基因的表达量 ,将基因改造的细胞移植到大鼠纹状体内 ,免疫组化检测体内移植的 TH、GDNF基因的表达。结果表明 :TH和GDNF基因可在靶细胞表达 ,且筛选后基因表达阳性细胞显著增加 ;TH阳性率达 5 0 % ,GDNF阳性率达 70 %。在体内实验中 ,可以观察到这两种外源基因可同时在大鼠脑内移植区表达。以上结果提示 ,TH和 GDNF基因改造细胞 ,可通过 ex vivo途径在脑内移植区高效表达。这一实验结果将对
- 杨慧段德义吴杰军赵春礼蔡青徐群渊
- 关键词：逆转录病毒酪氨酸羟化酶胶质源性神经营养因子THGDNF
- 温控型永生化神经干细胞移植于大鼠纹状体后存活、迁移与分化的研究
- ＜正＞目的: 探讨SV40温度敏感型大T抗原永生化的神经干细胞移植于大鼠纹状体后的存活、迁移和分化情况,并观察GDNF转导对神经干细胞移植后特性的影响。方法:首先对细胞的分化情况进行鉴定,然后用携带绿色荧光蛋白（EGFP...
- 王颖段德义姬曼赵春礼张海燕徐群渊
- 关键词：神经干细胞迁移分化
- 文献传递
- 人胚胎脑多巴胺D2受体（D2R）基因的克隆、表达及活性检测
- ＜正＞ 帕金森病神经元变性早期,DA受体数目及递质转化率增加,引起神经超敏化状态,使纹状体体内DA能神经末梢的突触后神经元对DA的敏感性提高;但到PD晚期,DA受体的数量减少,药物治疗的效果也同时减退。因此,对旨在增
- 赵焕英杨慧岳凤鸣苏月张宇新赵春礼徐群渊
- 文献传递
