路榕
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
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- 膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞中类固醇急性调节蛋白和睾酮合成相关酶表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞24 h后,用10-9mol/L的annexin 5处理间质细胞12 h和24 h,分别提取细胞总RNA和总蛋白;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测类固醇急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)、17α-羟化酶(17α-hydroxylase,CYP17A)、17β-羟基类固醇脱氢酶Ⅹ型(17β-HSD10)mRNA表达的改变,并用蛋白免疫印迹方法(Western blotting)检测蛋白表达水平的变化。结果:与对照组相比,在mRNA水平上,annexin 5处理细胞12 h后,只有17β-HSD10的表达升高了26%(P<0.05),其他差异均无统计学意义,而处理24 h后,StAR、P450scc和3β-HSD的表达分别升高55%、69%和59%(P<0.05),17β-HSD10升高了104%(P<0.01),17α-hydroxylase表达则无显著差异;在蛋白水平上,annexin 5处理细胞12 h后,17β-HSD的表达升高了39%(P<0.05),而处理24 h后发现,除StAR表达无显著变化外,P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达分别升高了35%、88%(P<0.05)和47%(P<0.01)。结论:Annexin 5对睾酮合成具有调节作用,这种作用是通过在基因水平和蛋白水平上影响P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达而实现的。
- 陶晓倩林钗英柳海燕时姗姗路榕黄宇烽李晓军戈一峰崔英霞姚兵
- 关键词：睾丸间质细胞
- Annexin5对雄性SD大鼠生殖相关指标和睾酮分泌的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨膜联蛋白5(annexin5)对雄性SD大鼠体重、睾丸系数、附睾系数、精子相对计数和睾酮水平的影响。方法给雄性SD大鼠腹腔注射3个不同剂量(7.5μg/kg、15μg/kg、30 μg/kg)的annexin5,对照组腹腔注射等量的pH 8.0 Tris-HCl,1次/d,连续20d。分别称重对照组和实验组SD大鼠体重、睾丸、附睾,并对附睾尾进行精子计数。HE染色观察睾丸组织结构。运用化学发光法检测对照组和各实验组SD大鼠血清中睾酮浓度。结果与对照组相比,15 μg/kg实验组大鼠附睾系数与精子相对计数均显著提高,分别提高了12.5%(131.8±9.6vs 1 17.2±5.9)(P<0.01)和31.4%(36.8±5.6vs 31.7±5.3)(P<0.05);其它剂量组与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示各剂量实验组与对照组相比,睾丸的形态结构没有发生明显改变。7.5 μg/kg组和15 μg/kg组大鼠血清睾酮含量显著高于对照组,分别提高了35.5%(36.33±3.89vs26.82±3.75)(P<0.01)和82.8%(49.04±5.17vs26.82±3.75)(P<0.01),30 μg/kg组大鼠睾酮含量虽也有升高,但与对照组比较,结果无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔注射annexin5能影响大鼠睾丸生精、附睾功能及睾酮水平,并与剂量有关。
- 林钗英陶晓倩柳海燕时姗姗路榕姚兵
- 关键词：睾酮睾丸精子
- 膜联蛋白5对人精子膜及DNA完整性的影响
- 2011年
- 目的:研究膜联蛋白5(Annexin5)对人精子细胞膜及DNA完整性的影响。方法:①精子膜完整性测定:按精子浓度>20×106/ml;活率>60%选取标准收集精液标本53份,分为3组,实验组为47.5μl精液中加入2.5μl10-6mol/L的Annexin5;阴性对照组为47.5μl精液标本中加入2.5μl1mol/L的Tris-HCl(pH8.0,25℃);空白对照组为47.5μl精液标本中加入2.5μl0.01mol/L的PBS(pH7.4),作用20min后,通过精子低渗肿胀试验(HOS)检测精子膜的完整性。②DNA完整性测定:同方法①,3组实验标本作用20min后,每份标本加入2.5μl0.02mol/L的H2O2,作用60min,通过吖啶橙(AO)荧光染色检测精子核DNA的完整性。结果:An-nexin5处理20min后低渗肿胀精子百分率与空白对照组及阴性对照组比较均具有极显著差异[(66.17±12.02)%vs(58.13±13.08)%,P<0.01;(66.17±12.02)%vs(59.94±11.91)%,P<0.01];空白对照组与阴性对照组比较无显著性差异。加入H2O2后,Annexin5组的DNA碎片指数与空白对照组及阴性对照组比较均具有极显著差异[(6.39±1.07)%vs(11.16±1.16)%,P<0.01;(6.39±1.07)%vs(10.86±1.05)%,P<0.01],空白对照组与阴性对照组比较无显著性差异。结论:Annexin5蛋白能在体外提高低渗肿胀精子百分率,对精子膜的完整性具有保护作用,同时对HO作用引起的精子核DNA破坏起保护作用。
- 路榕郭萃陶晓倩柳海燕时姗姗林钗英姚兵
- 关键词：精子膜低渗肿胀试验DNA完整性
- 精浆胸苷激酶1与精液参数关系的初步分析
- 2010年
- 目的探讨精浆胸苷激酶1(Thymidine kinase 1,TK1)的浓度与精子参数的关系。方法利用增强化学发光法检测无精子症和少弱精子症及已生育健康人精浆TK1的浓度。同时利用计算机辅助精液分析系统分析各实验组精子密度及活力。各实验组精浆酸性磷酸酶、α-葡糖苷酶、精浆果糖和锌的浓度也一并检测。分析精浆TK1浓度变化和精子参数、精浆相关参数的相关性。结果弱精子组(2.41±0.21)及无精子组(2.72±1.16)患者精浆TK1的浓度显著高于正常对照组(1.53±0.22)(P<0.0 1),少精子组(1.60±0.1 3)和少弱精子组(1.68±0.24)患者精浆TK1的浓度与对照组相比差异没有统计学意义(P>0.05)。精浆TK1与精浆生化指标即精浆酸性磷酸酶、α-葡糖苷酶、果糖和锌的浓度都没有显著的相关性(P>0.05)。结论 TK1可能与精子活动质量有一定相关性,高浓度的TK1是引起弱精子症的原因之一,与精子数量的变化关系不密切。TK1在无精子症患者中浓度偏高的原因有待进一步研究。
- 马宏青路榕陶晓倩韩雪峰张艳梅戈一峰夏欣一姚兵
- 关键词：胸苷激酶1精子参数
- 膜联蛋白5对雄性SD大鼠睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响被引量：4
- 2011年
- 目的研究注射膜联蛋白5后雄性SD大鼠睾丸类固醇急性调节蛋白(Steroidogenic acute regulatory protein,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450 cholesterol side-chain cleavage enzyme,P450scc)和3β-羟类固醇脱氢酶(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)表达的改变,初步探讨膜联蛋白5影响睾酮分泌的机制。方法将20只SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组又分为7.5μg/kg组、15μg/kg组和30μg/kg组,每组5只。对照组大鼠腹腔注射等量的pH8.0 Tris-HCl,实验组腹腔注射不同剂量的膜联蛋白5,1次/d,连续20 d。用RT-PCR方法分别检测对照组和各实验组SD大鼠睾丸组织中睾酮合成相关的StAR、P450scc和3β-HSD mRNA的表达变化,并用Western blot方法检测以上3种物质蛋白质水平的变化。结果与对照组相比,在mRNA水平上,7.5μg/kg组和15μg/kg组大鼠睾丸组织P450 scc mRNA表达分别增加了25.9%[(0.68±0.04)vs(0.54±0.03),P<0.01]和27.8%[(0.69±0.04)vs(0.54±0.03),P<0.01];3β-HSD mRNA表达分别升高了32.9%[(1.05±0.07)vs(0.79±0.10),P<0.01]和53.2%[(1.21±0.07)vs(0.79±0.10),P<0.01];而30μg/kg组表达差异无统计学意义;在蛋白水平上,15μg/kg组大鼠睾丸组织P450 scc蛋白表达提高了34.2%[(0.37±0.04)vs(0.28±0.02),P<0.01],7.5μg/kg组和15μg/kg组的3β-HSD表达也分别增加了14.7%[(1.53±0.10)vs(1.34±0.05),P<0.01]和24.4%[(1.67±0.14)vs(1.34±0.05),P<0.01];而StAR的表达无论在转录水平还是在蛋白水平上,较对照组差异均无统计学意义。结论膜联蛋白5可通过调节P450scc与3β-HSD的表达来调节睾酮合成。
- 林钗英柳海燕陶晓倩时姗姗路榕姚兵
