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大肠杆菌错配识别蛋白MutS的表达与活性鉴定: 2011年; 目的构建表达错配识别蛋白MutS,并进行错配识别活性鉴定。方法在大肠杆菌中表达MutS蛋白,并纯化获得目的蛋白;利用凝胶滞缓实验对错配识别活性进行验证,并计算MutS蛋白降低的错配率。结果纯化的MutS蛋白具有错配识别活性,并能降低DNA双链的错配率。结论表达纯化的MutS蛋白在体外具有特异性识别、结合含有错配碱基DNA双链的生物活性,从而有助于合成生物学的发展。; 王芬邢玉华王微谭俊杰刘刚张部昌陈惠鹏; 关键词：纯化活性鉴定

高GC含量DNA模板的PCR扩增被引量：6: 2013年; 目的：探索高GC含量DNA的PCR扩增条件，为扩增达托霉素生物合成基因簇及拼接奠定基础。方法：在PCR扩增体系中，使用高保真的聚合酶及添加不同浓度的DMSO、7-deaza-dGTP等增强剂，并选择合适的PCR循环程序，优化富含GC的DNA的PCR扩增条件。结果：向反应体系中额外添加1%~4%的DMSO可以显著提高富含GC的DNA的PCR扩增产物量，但会降低其特异性；7-deaza-dGTP可以提高扩增产物的特异性及保真度，但产量会有所下降。应用touch down PCR并在体系中添加7-deaza-dGTP能够提高扩增产物的特异性和产率，增加扩增的保真度。结论：应用优化的PCR扩增条件将所有达托霉素生物合成基因簇分段扩增出来，并可扩增出长达6 kb的片段，且序列完全正确，可以进行后续拼接。; 邢玉华戴素琴刘体颜王微谭俊杰曲国龙刘刚陈惠鹏; 关键词：PCR

重组人proEMAP Ⅱ/p43蛋白N端和C端结构域的构建及活性鉴定: 2010年; 目的构建表达重组人proEMAPⅡ蛋白N端(p43N)及C端(p43C)结构域,并进行活性鉴定。方法分别在大肠杆菌中表达p43N及p43C蛋白,并纯化获得目的蛋白;利用血管内皮细胞管腔形成实验及细胞迁移实验进行活性鉴定,并比较等摩尔浓度下,p43蛋白、p43N、p43C及p43N+p43C的活性差异。结果 p43N及p43C均具有抑制内皮细胞管腔形成和迁移的活性,在等摩尔浓度条件下,p43蛋白的生物活性高于p43N和p43C,p43N活性最弱,但p43N和p43C共同作用时,抑制活性高于单独作用。结论获得具有生物活性的p43N及p43C蛋白,为进一步确定p43N作用机制及其与p43C相互关系奠定了基础。; 王慧敏邹亮邢玉华董桂福刘刚张部昌陈惠鹏; 关键词：血管内皮细胞管腔形成细胞迁移活性鉴定

重组人proEMAPⅡ/p43体外抑制新生血管生成活性方法的建立被引量：3: 2010年; 目的建立proEMAPⅡ/p43蛋白体外检测抑制新生血管生成活性的方法。方法利用内皮细胞增殖实验、细胞周期实验、细胞迁移实验、管腔形成实验、鸡胚绒毛尿囊膜实验等体外检测血管生成的模型,研究p43蛋白抑制血管生成的活性。结果 p43蛋白能明显抑制内皮细胞迁移和管腔形成,但对内皮细胞增殖和细胞周期没有明显的量效关系。结论最终选用细胞迁移实验和管腔形成实验作为主要活性检测方法,细胞迁移实验作为p43蛋白活性的定量检测方法,迁移抑制率作为活性高低的评价标准,管腔形成实验用于p43蛋白活性的定性研究。; 邢玉华刘大涛刘刚邹亮胡立德付学奇陈惠鹏; 关键词：新生血管生成细胞增殖细胞迁移管腔形成

抗血管生成活性的重组人proEMAPⅡ/p43蛋白缺失突变体的构建和筛选(英文): 2014年; proEMAPⅡ（又称p43蛋白）是哺乳动物氨酰tRNA合成酶的辅助因子，近年来发现，p43具有细胞因子活性以及抗新生血管生成的作用，具有潜在的抗肿瘤疗效．p43的C端结构域即为EMAPⅡ，其结构和功能都已知，具有细胞因子和抗血管生成的双重功能．但是N端的结构还不清楚，研究表明全长的p43比EMAPⅡ具有更高的生物学活性，但是p43的结构和作用机制尚不明确．此外，作为蛋白质药物，更小的分子能够减少免疫原性和副作用，从而发挥更好的活性．本文利用生物信息学方法，对p43 N端的二级结构进行预测，并且在不破坏二级结构的前提下，构建了10个p43的缺失突变体，在体外对10个缺失突变体与全长的p43蛋白进行抗新生血管生成活性验证比较，最终我们获得了3个活性高的p43缺失突变体，并且发现N端的1～16，1～79位氨基酸和C端的264～312位氨基酸不是p43发挥抗血管生成功能所必需的，而且它们的删除使得活性位点更好地呈现并发挥活性．通过我们的研究，有助于揭示p43蛋白结构和功能的关系以及其作用机制，同时为临床筛选肿瘤治疗候选药物奠定基础．; 邢玉华刘大涛谭俊杰胡立德刘刚付学奇陈惠鹏; 关键词：P43 缺失突变体抗血管生成剂内皮细胞迁移管腔形成

高表达达托霉素的菌株及其筛选方法: 本发明涉及高表达达托霉素的菌株及其筛选方法，属于抗生素生产菌株及其筛选领域。菌株的分类命名为玫瑰孢链霉菌（Streptomyces？roseosporus)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号分别...; 刘刚刘体颜陈惠鹏邢玉华张部昌; 文献传递

肿瘤血管生成的实验模型被引量：2: 2012年; 血管生成在肿瘤的生长、侵袭和转移中起着重要的作用。通过抑制新生血管的形成和发展来达到杀伤肿瘤细胞的目的,是一种确实有效的"饥饿"疗法。近年来对抗血管生成治疗肿瘤的研究取得了很大的进展,目前已建立了多种实验模型和评价标准,包括体内和体外两大类。每种模型都有其优缺点,可根据研究内容选择合适、有效的实验模型。; 邢玉华刘刚陈惠鹏; 关键词：血管生成肿瘤

大肠杆菌-链霉菌穿梭型BAC载体及其构建方法: 本发明涉及一种大肠杆菌-链霉菌穿梭型BAC载体及其构建方法，该BAC载体含有多克隆位点MCS，Am抗性基因，整合酶基因int，整合位点attp，接合转移片段oriT，BAC载体的复制区oriS、repA基因、sopA基因...; 刘刚戴素琴陈惠鹏邢玉华张部昌; 文献传递

重组人proEMAPⅡ结构与功能的研究: 本研究旨在构建proEMAPⅡ/p43缺失突变体,探寻p43蛋白行使抗新生血管功能的结构域,筛选分子量小、活性高的肿瘤治疗候选药物;建立体外检测p43抗血管生成活性的方法;利用基因芯片高通量筛选p43作用于人微血管内皮细...; 邢玉华; 关键词：新生血管生成缺失突变体活性检测基因芯片; 文献传递

合成生物学的关键技术及应用进展被引量：6: 2012年; 20世纪的生物学研究一直着眼于对生物系统的不断分解，解剖至细胞中单个蛋白或基因，研究其结构和功能来解释生命现象。但随着当代分子生物学技术的迅猛发展，以系统化设计和工程化构建为理念的合成生物学成为新一代生物学的发展方向。; 邢玉华谭俊杰李玉霞凌焱刘刚陈惠鹏; 关键词：合成生物学分子生物学技术生物系统生命现象工程化

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邢玉华

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