郑璐
- 作品数：14 被引量：32H指数：4
- 供职机构：解放军第97医院更多>>
- 发文基金：南京军区医学科技创新课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TWS119对人胃癌SGC-7901细胞和γδT细胞活性影响及机制研究被引量：2
- 2016年
- 目的研究糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)体外抗肿瘤活性和对人γδT细胞活性的影响。方法用不同浓度的4,6-二取代吡咯并嘧啶分别作用于人胃癌SGC-7901细胞和γδT细胞24、48和72 h后,用CCK-8法测定4,6-二取代吡咯并嘧啶对人胃癌SGC-7901细胞和γδT细胞增殖的影响及γδT细胞对SGC-7901细胞杀伤能力;流式细胞术分析4,6-二取代吡咯并嘧啶对SGC-7901细胞凋亡的影响,Western blot检测4,6-二取代吡咯并嘧啶对Bcl-2、p-STAT3和p-ERK1/2表达的影响。结果 0~8.0μmol·L^(-1)4,6-二取代吡咯并嘧啶能抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长并诱导其凋亡,抑制Bcl-2的表达,促进p-ERK1/2和p-STAT3的表达。而在γδT细胞中,4,6-二取代吡咯并嘧啶在0~4.0μmol·L^(-1)时能促进其增殖和对SGC-7901细胞的体外杀伤活性,促进Bcl-2的表达,抑制pERK1/2和p-STAT3的表达。结论一定浓度的4,6-二取代吡咯并嘧啶能抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖并诱导其凋亡,同时能促进γδT细胞增殖和对SGC-7901细胞的杀伤活性,其机制可能与4,6-二取代吡咯并嘧啶激活Wnt信号传导通路及其对p-ERK1/2、Bcl-2和p-STAT3表达的影响有关。
- 陈永强郑璐刘军权吕小婷孙蕾清徐晶周忠海陈复兴
- 关键词：ΓΔT细胞SGC-7901细胞增殖
- 金丝桃苷增强人NK细胞增殖及功能的研究被引量：1
- 2019年
- 目的:研究金丝桃苷对人NK细胞增殖及功能的影响。方法:常规方法扩增健康人外周血NK细胞。用不同浓度的金丝桃苷作用于细胞,CCK-8法检测增殖。流式细胞仪检测NK细胞处理前后颗粒酶、穿孔素的表达。ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ、FasL、TNF-α的表达。结果:金丝桃苷各浓度组对CD3-CD56+的比例无明显影响,但在1.6~8.0μg/ml时能显著促进NK细胞增殖,并提高颗粒酶和穿孔素的表达。金丝桃苷在1.6~40μg/ml浓度能明显促进NK细胞分泌FasL、IFN-γ,但对TNF-α的分泌无明显影响。结论:一定浓度范围内金丝桃苷能增强NK细胞的增殖及功能。
- 周燏高小宁高小宁吕小婷孙蕾清陈玲郑璐
- 关键词：金丝桃苷NK细胞增殖
- 糖原合酶激酶-3β抑制剂TWS119对γδT细胞增殖及表型的影响被引量：7
- 2015年
- 目的：观察糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶（TWS119）对γδT细胞增殖和表型的影响。方法：从健康人外周血中分离单个核细胞,加入到γδT细胞完全培养基培养,分别于第1天和第8天时,加入TWS119（0~8.0μmol/L）诱导培养。培养到12 d后,用CCK-8法测定γδT细胞增殖能力;用流式细胞术检测γδT细胞纯度、CD45RA和CD62L的表达。结果：TWS119能够活化γδT细胞Wnt/β-catenin信号通路。在第1天加入TWS119诱导培养组中,随着TWS119浓度的增加,γδT细胞表面CD45RA和CD62L的阳性表达率逐渐升高,而对细胞的增殖及纯度呈抑制作用。在第8天加入TWS119诱导培养组中,TWS119能剂量依赖性促进CD62L的表达而对CD45RA表达无影响,同时在一定浓度范围能促进γδT细胞的增殖和提高纯度的作用。结论：TWS119在一定浓度范围内能促进γδT细胞增殖和提高γδT细胞纯度,并能活化γδT细胞Wnt/β-catenin信号通获得CD45RA＋CD62L＋γδT细胞和CD62L＋γδT细胞。
- 陈永强郑璐刘军权吕小婷周燏陈玲徐晶周忠海陈复兴
- 关键词：ΓΔT细胞细胞增殖表型
- TWS119通过抑制STAT3磷酸化促进γδT细胞CCR5的表达
- 2016年
- 目的：研究糖原合酶激酶-3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶（TWS119）促进γδT细胞趋化因子受体CCR5表达的分子机制。方法：用TWS119诱导从健康人外周血中分离培养获得γδT细胞48 h后,用流式细胞仪检测γδT细胞CCR5的表达;Western blot检测GAPDH和p-STAT3的表达。结果：培养10 d后的γδT细胞纯度达到85.79%±5.01%。TWS119浓度在0～8.0μmol/L范围内能显著促进趋化因子受体CCR5的表达,且剂量依赖性抑制STAT3的磷酸化。同时,用STAT3磷酸化抑制剂Stattic（0.5μmol/L）预处理γδT细胞也可以促进CCR5的表达,并能协同增强TWS119促进趋化因子受体CCR5的表达。结论：TWS119通过抑制STAT3磷酸化促进γδT细胞CCR5的表达。
- 徐晶孙蕾清陈永强郑璐吕小婷陈复兴刘军权周忠海
- 关键词：CCR5ΓΔT细胞STAT3
- 槲皮苷对人γδT 细胞增殖及杀伤功能的影响被引量：5
- 2014年
- 目的：探讨槲皮苷（ quercitrin ）对人外周血γδT细胞体外增殖和功能影响及相关机制。方法从健康人外周血中分离单个核细胞（PBMC），加入到含有异戊烯焦磷酸和IL-2的RPMI 1640完全培养基中诱导培养获得γδT细胞。用不同浓度的槲皮苷作用γδT细胞48 h后，用CCK-8法测定不同浓度槲皮苷组γδT细胞增殖和杀伤能力；采用流式细胞术检测各组γδT细胞颗粒酶B和穿孔素的表达；用Western blot法检测p-ERK、p-Akt和Bcl-2蛋白的表达。结果培养10 d后的γδT细胞纯度达到（88．94±2．36）％。槲皮苷浓度在10～80μg/ml时能显著促进γδT细胞的增殖及颗粒酶B、穿孔素的表达和对结肠癌HCT116细胞的杀伤能力。在蛋白水平p-ERK、p-Akt和Bcl-2的表达量均显著高于对照组，而内参GAPDH表达量无变化。结论槲皮苷可体外增强γδT细胞的增殖及杀伤功能，其机制可能通过p-ERK和p-Akt信号通路。
- 郑璐陈永强刘军权周忠海杨阳吕小婷朱云陈复兴
- 关键词：槲皮苷ΓΔT细胞细胞增殖颗粒酶B穿孔素
- 紫草素诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的探讨被引量：3
- 2016年
- 目的:研究紫草素诱导人前列腺癌细胞(PC-3)凋亡及其作用机制。方法:以PC-3细胞为研究对象,以不同浓度的紫草素处理PC-3细胞,另设空白组,处理不同时间后,分别采用噻唑蓝(MTT)法检测紫草素对PC-3细胞增殖抑制情况;显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和磷酸化-细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达。结果:不同浓度的紫草素对PC-3细胞的生长抑制呈时间和剂量依赖性;形态学观察结果显示紫草素作用PC-3细胞后可使细胞变圆,脱落,皱缩,细胞内出现空泡,周围出现凋亡小体;与空白组比较,不同浓度的紫草素明显升高Caspase-3和Bax蛋白的表达,明显降低Bcl-2蛋白的表达,不同浓度的紫草素作用细胞48 h后可诱导细胞产生ROS,ROS清除剂二硫苏糖醇(DTT)可以明显逆转紫草素诱导的PC-3细胞的生长抑制率,且0.2 mmol·L-1DTT可以抑制由紫草素诱导的Caspase-3和ERK1/2的活化。结论:紫草素通过ROS/ERK1/2信号通路诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡。
- 陈永强郑璐刘军权周燏陈玲曹希亮周忠海陈复兴
- 关键词：紫草素人前列腺癌PC-3细胞活性氧细胞凋亡
- 糖原合酶激酶3β抑制剂TWS119激活NK细胞Wnt/β-catenin信号通路促进CD62L表达被引量：3
- 2015年
- 目的探讨糖原合酶激酶3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶（TWS119）调控Wnt/β-catenin信号通路对NK细胞增殖和表型的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞（PBMC）,加入到含重组人IL-2和人AB血清的NK细胞完全培养基中诱导培养,获得NK细胞。（0~8.0）μmol/L TWS119处理NK细胞72 h,Western blot法检测NK细胞β-catenin的表达、CCK-8法测定NK细胞增殖能力;流式细胞术检测各组NK细胞CD107a和CD62L（L-选择素）的表达。结果培养10 d后的NK细胞纯度达到（61.76±3.74）%;TWS119能够活化NK细胞Wnt/β-catenin信号通路。（0~2.0）μmol/L TWS119处理NK细胞,能显著促进NK细胞增殖,浓度大于2.0μmol/L时增殖率逐渐降低。（0~8.0）μmol/L TWS119处理NK细胞,CD62L的阳性表达率逐渐升高,且呈剂量依赖性;与之相反,CD107a阳性表达率逐渐下降。结论 TWS119活化NK细胞Wnt/β-catenin信号通路可获得早期成熟的CD62L＋NK细胞。
- 陈永强郑璐刘军权周忠海吕小婷张娟张颂孙蕾清陈复兴
- 关键词：NK细胞表型
- 槲皮苷在制备人γδT细胞增殖剂中的应用
- 本发明公开了在制备人γδT细胞增殖剂中的应用，涉及医药技术领域。槲皮苷能够显著促进人γδT细胞的增殖，并能够促进其穿孔素和颗粒酶B的表达，具有一定的剂量依赖性；经槲皮苷处理后的γδT细胞，能够促进活性形式p-ERK1/2...
- 刘军权杨阳陈永强郑璐周忠海陈复兴吕小婷
- 文献传递
- TWS119对人NK细胞增殖和杀伤甲状腺癌BCPAP细胞的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨糖原合酶激酶-3β抑制剂TWS119对NK细胞增殖和杀伤功能的影响。方法从健康人外周血中分离单个核细胞（PBMCs）,加入到NK完全培养基培养,分别于第1d和第7d时,加入TWS119（0~8.0μmol/L）诱导培养。培养10 d后,用CCK-8法测定NK细胞增殖和杀伤甲状腺癌BCPAP细胞的能力;采用流式细胞术检测各组NK细胞纯度、颗粒酶和穿孔素的表达。结果培养10d后,第1天加入TWS119诱导组对NK细胞纯度和增殖呈现抑制作用;而第7天加入在一定浓度范围的TWS119诱导培养时能促进NK细胞的增殖和杀伤指标穿孔素的表达及对甲状腺癌BCPAP细胞的体外杀伤活性。结论 TWS119在一定浓度范围能促进γδT细胞增殖和增强对甲状腺癌BCPAP细胞的杀伤功能。
- 王海郑璐汤新星陈永强周忠海陈复兴
- 关键词：NK细胞细胞增殖穿孔素
- 槲皮苷在制备人γδT细胞增殖剂中的应用
- 本发明公开了在制备人γδT细胞增殖剂中的应用，涉及医药技术领域。槲皮苷能够显著促进人γδT细胞的增殖，并能够促进其穿孔素和颗粒酶B的表达，具有一定的剂量依赖性；经槲皮苷处理后的γδT细胞，能够促进活性形式p-ERK1/2...
- 刘军权杨阳陈永强郑璐周忠海陈复兴吕小婷
- 文献传递
