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抗人转铁蛋白受体人源抗体及其应用: 本发明涉及抗人转铁蛋白受体人源抗体及其应用，属于分子生物学领域。抗人转铁蛋白受体人源抗体，具有序列表SEQ ID No.1所示的单链抗体(scFv)氨基酸序列。本发明的优点是：人源抗体解决了靶向抗体的免疫原性问题，使其能...; 颜冰黄培堂赵莉霞; 文献传递

转铁蛋白受体介导脑源性神经营养因子通过血脑屏障的研究: 蛋白质,多肽等大分子脑治疗药物因不能透过血脑屏障,无法进入脑中发挥疗效.利用血脑屏障上特异性富含转铁蛋白受体这一特点,在国内首次采用基因工程方法合成扩增了抗大鼠转铁蛋白受体的单链抗体基因（ox26-scFv),在大肠杆菌...; 颜冰; 关键词：血脑屏障转铁蛋白受体脑源性神经营养因子药物转运; 文献传递

转铁蛋白受体单链抗体与链亲和素融合基因的克隆及其在大肠杆菌中的可溶性表达被引量：4: 2006年; 目的:转铁蛋白受体特异性富含于血脑屏障和肿瘤细胞的表面,是当前中枢神经系统疾病和肿瘤治疗中定向转运的重要靶标。拟获得在大肠杆菌中能高效可溶表达的转铁蛋白受体单链抗体与链亲和素(SA)的重组融合蛋白。方法:根据GenBank数据库报道的SA的核苷酸序列分段合成基因,连接后经PCR获得完整的基因片段,插入pGEM-T载体中测序。将序列正确的SA基因与大鼠转铁蛋白受体单链抗体基因ox26-scFv分别插入原核表达载体pTIG-Trx中,构建重组表达克隆pTIG-Trx/scFv-SA,并在大肠杆菌中诱导表达。ELISA检测融合蛋白的生物学活性。结果:对pGEM-T/SA克隆的测序结果显示,合成的SA基因与文献报道相符。重组融合蛋白在大肠杆菌中获得了可溶性表达,约占菌体上清总蛋白量的30%;ELISA结果表明该融合蛋白具备与转铁蛋白受体和生物素的结合的双重活性。结论:有活性的重组融合蛋白的获得为构建一个通用性的以转铁蛋白受体介导的血脑屏障和肿瘤转运靶向载体打下了基础。; 颜冰赵莉霞黄培堂; 关键词：转铁蛋白受体单链抗体链亲和素转运

抗人转铁蛋白受体人源抗体及其应用: 本发明涉及抗人转铁蛋白受体人源抗体及其应用，属于分子生物学领域。抗人转铁蛋白受体人源抗体，具有序列表SEQ ID No.1所示的单链抗体(scFv)氨基酸序列。本发明的优点是：人源抗体解决了靶向抗体的免疫原性问题，使其能...; 颜冰黄培堂赵莉霞; 文献传递

抗转铁蛋白受体抗体的筛选和鉴定: 2006年; 目的:从全人源噬菌体抗体库中筛选抗转铁蛋白受体(TfR)的抗体。方法:从HeLa细胞中提取总RNA,分两段反转录TfR胞外区cDNA,经两轮PCR后,获得胞外区基因。测序正确后,将其插入表达载体pPROEXTMHTa中,并在E.coliBL21(DE3)中表达。目的蛋白通过NiNTA金属螯合层析柱进行纯化、复性。用复性的TfR包被免疫管,从库容为1013cfu/L的全合成人源噬菌体单链抗体库中,筛选抗TfR的抗体。结果:得到约1.9kb的TfR胞外区基因,该基因以包涵体的形式在大肠杆菌中表达;利用纯化、复性的TfR从抗体库中筛选到了8个可与人TfR特异性结合的单链抗体。结论:利用TfR在大肠杆菌表达的复性产物,可以筛选到与天然TfR特异性结合的单链抗体。; 赵莉霞颜冰朱恒奇许龙黄培堂; 关键词：噬菌体抗体库单链抗体

大鼠转铁蛋白受体单链抗体和芋螺毒素SO3的融合蛋白在大肠杆菌中的表达: 2005年; 人工合成了芋螺毒素SO3的基因片段,通过链延伸方法获得了SO3的全长基因。在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体的单链抗体基因的pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体和SO3融合基因的重组表达载体,转化大肠杆菌BL21穴DE3雪和Origmia穴DE3雪/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在。为进一步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运和治疗作用奠定了基础。; 蒋世卫周晓巍颜冰黄培堂; 关键词：转铁蛋白受体单链抗体血脑屏障融合蛋白包涵体镇痛药物

人转铁蛋白受体及其特异性抗体的制备: 2006年; 目的:从胎盘中提取转铁蛋白受体并获得抗转铁蛋白受体的抗体。方法:人新鲜胎盘组织被破碎后,用去污剂TritonX-100裂解细胞膜,释放膜蛋白。利用膜蛋白中的转铁蛋白受体能与铁-转铁蛋白复合物特异性结合的特性对其进行亲和纯化。对纯化得到的目的蛋白,经脱盐后进行ELISA及肽质量图谱分析,证明为所需的转铁蛋白受体后,以其包被免疫管,从全合成人源噬菌体抗体库中筛选抗体。结果:从人源噬菌体抗体库中筛选到5个能够与转铁蛋白受体特异性结合的噬菌体单链抗体。结论:以人源转铁蛋白受体为抗体,可从全人源噬菌体抗体库中筛选到其特异性的抗体。; 赵莉霞颜冰朱恒奇许龙黄培堂; 关键词：胎盘转铁蛋白受体噬菌体抗体库单链抗体

长链逆转录PCR的研究进展被引量：1: 1998年; 长链逆转录ＰＣＲ简称长链ＲＴＰＣＲ，是最近几年发展起来的一项新技术。通过采用无ＲＮａｓｅＨ活性的逆转录酶，引入具有３→５核酸外切活性的校正酶、优化缓冲液组分等方法，实现了大片段的扩增。在ＲＮＡ病毒基因组、基因作图、分离完整基因等方面的研究中发挥了重要作用。长链ＲＴＰＣＲ的原理。; 颜冰; 关键词：RT-PCR 影响因素

人源汉坦病毒H8205株M基因序列分析及其分类地位的研究: 汉坦病毒H8205株分离自中国牡丹江地区一肾综合征出血热患者的血液中,生物学和免疫学性状与76-118株差异较大.为进一步了解其分子生物学特性,该研究克隆测定了H8205株M基因全序列,并就其分类地位进行了探讨.; 颜冰; 关键词：汉坦病毒

人源汉坦病毒H8205株M基因序列分析及其分类地位的研究被引量：1: 2000年; 目的 :测定汉坦病毒H82 0 5株M基因全序列并对其分类地位进行探讨。方法 :从感染H82 0 5株病毒的鼠脑中提取RNA ,经RT PCR扩增M基因全序列 ,克隆到 pGEM TEasy载体中测序 ,与汉坦病毒属的各型标准株进行同源比较 ,构建系统进化树 ,并与汉滩型中已知的 7株病毒进一步比较 ,确定H82 0 5株的分类地位。结果 :H82 0 5株M基因由 36 15个核苷酸组成 ,编码1135个氨基酸 ;同源性分析显示该株病毒属于布尼亚病毒科汉坦病毒属中的汉滩型 (HTN) ,但与同型中其他毒株的亲缘关系较远。结论 :H82 0 5株是不同于已知汉滩型毒株的一个新亚型。; 颜冰李钟铎; 关键词：汉坦病毒 M基因

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