马宏
- 作品数：59 被引量：336H指数：11
- 供职机构：河南省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目河南省科技攻关计划中澳卫生与艾滋病项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 实验室生物安全风险评估的现状与思考被引量：6
- 2020年
- 目的了解、分析实验室生物安全风险评估工作现状,对提高生物安全风险评估能力进行探索。方法对72家BSL-2(Biosafety Shelter Laboratory-2)实验室进行风险评估现状调查,定性和定量研究相结合,利用Excel 2007软件对数据进行统计描述。结果实验室生物安全风险评估认知方面,熟悉风险评估目的、明确风险评估内容、有规范风险评估报告的总体符合率分别为77.77%、63.88%和48.61%。生物安全风险点评估方面,配备生物安全柜、设立生物安全委员会和实验室建筑布局与流程符合率最高,危害评估体系、高压蒸汽灭菌器和生物安全柜的定期检测符合率最低。结论参与调研的实验室对生物安全风险评估已有一定的认识,但还需要在生物安全风险培训、规范管理、建立制度等方面不断加强,同时对生物安全风险评估的数字化进行探索。
- 胡凯马宏贾松树孙建伟赵二江梁淑英尹姗姗王莉郭永军
- 关键词：实验室生物安全风险评估
- 河南省首次恙虫病暴发疫情的实验室证实被引量：2
- 2006年
- 目的调查以发热、头痛、淋巴结肿大、皮疹为主要症状的不明疾病病因。方法对可疑病人进行流行病学调查,血用血清学、免疫学、套式PCR方法检测病人血清抗体滴度、血清型及立克次体特异性基因片段。结果对采集到20例病人进行血清外裴OXk凝集反应,阳性率达100%,11份二次血清OXk效价呈4倍升高;恙虫立克次体IFA检测lgM和lgG抗体,20份均为阳性,最高达到1:2560;恙虫病血清学分型G illiam 4例,Karp 6例,Kato 8例。套式PCR检测病人血结果3份扩增出R t特异性DNA片段。结论首次证实了河南省恙虫病暴发疫情。
- 夏胜利申晓靖邓文斌黄丽莉王建丽李林红马宏李孟磊许汴利
- 关键词：恙虫病立克次体套式PCR血清型流行病学
- 外斐氏OXk试验在恙虫病暴发调查的价值被引量：11
- 2006年
- 目的证实河南省发生的不明原因发热、头痛、皮疹病人的病因。方法对可疑病人进行流行病学调查、用血清学、套式PCR方法检测病人血清抗体滴度、血清型及立克次体特异性基因片段。结果恢复期病人血清外斐氏OXk阳性率100%。11例病人的双份血清抗体呈4倍升高;恙虫病立克次体IFA检测lgM和lgG抗体,20份均为阳性,最高达1∶2560;恙虫病血清学分型G illiam 4例,Karp 6例,Kato 8例。套式PCR检测病人血标本中特异性R tDNA片段,3份阳性;结论外斐氏OXk试验简便、易行,适用于暴发疫情的定性。值得注意的是病人第1周阳性率较低,对高度怀疑恙虫病患者在第1周内OXk阴性,在第(2、3)周再作OXk试验,可以得到明确诊断。
- 黄丽莉王建丽马宏申晓靖
- 关键词：恙虫病立克次体
- 伤寒沙门菌PFGE基因分型研究被引量：14
- 2006年
- 目的了解1979-2005年间河南省分离的伤寒沙门菌菌株的脉冲场凝胶电泳(PFGE)基因型,探讨河南省伤寒沙门菌的分布、流行及变异情况。方法伤寒沙门菌单个菌落增菌后定量,制备琼脂糖菌体包埋胶块,蛋白酶K等消化处理,限制性内切酶XbaΙ酶切,制备琼脂糖凝胶,脉冲场凝胶电泳获取菌株指纹图谱,图谱条带进行分子量标化,用统计软件进行聚类分析。结果以80%相似度为标准,235株伤寒沙门菌被分成69个不同的PFGE基因型。各地区间和不同年份间基因型既有交叉,又存在差异,2005年有新的基因型出现。结论PFGE基因分型技术在确定菌株之间的分子流行病学关系方面是一种有效、稳定的方法。河南省伤寒沙门菌PFGE基因型别呈现多样性,地区间存在差异。
- 马宏王建丽黄丽莉申晓靖谢志强马桂芳底秀娟
- 关键词：伤寒沙门菌PFGE基因分型
- 用于肠道病毒CoxB5的RT-LAMP检测试剂盒
- 本发明公开了一种用于肠道病毒CoxB5的RT?LAMP检测试剂盒，该试剂盒针对肠道病毒CoxB5 VP1基因设计了6种LAMP引物,配合LAMP反应液构成肠道病毒CoxB5的RT?LAMP检测体系。本发明试剂盒具有快速、...
- 黄学勇李幸乐胡小宁马红霞杜燕华马宏许汴利刘国华
- 文献传递
- 新布尼亚病毒IgG抗体间接免疫荧光检测方法的建立被引量：30
- 2012年
- 目的建立检测新布尼亚病毒IgG抗体的间接免疫荧光（IFA）方法。方法用分离到的5株新布尼亚病毒株感染非洲绿猴肾（Vero）细胞，制备抗原片，优化IFA工作条件，进行IFA法的特异度和敏感度评价，应用建立的IFA方法对2007—2011年在河南省信阳地区采集的126例发热伴血小板减少综合征患者急性期和恢复期双份血清标本进行检测，并与RT—PCR方法的检测结果进行比较。结果筛选出免疫荧光反应特异、稳定性较好的WZ69毒株作为建立新布尼亚病毒IFA检测方法的抗原种子株。IFA方法的最佳工作条件：一抗（患者血清）最适稀释度为1：40；二抗（异硫氰酸荧光素标记的羊抗人IgG抗体）最适稀释度为1：150；二抗中伊文思蓝最适稀释度为1：20000。在126例患者中，新布尼亚病毒IgG抗体阳性者96例，阴性者30例，抗体阳性率为76．19％，与RT—PCR的检测阳性率[72．22％（91／126）]差异无统计学意义（P〉0．05）。结论建立的新布尼亚病毒IgG抗体IFA检测方法敏感性高，特异性强，操作简单，可用于新布尼亚病毒致发热伴血小板减少综合征患者的实验室检测。
- 黄学勇杜燕华李幸乐马宏满瑞琴康锴唐晓燕陈豪敏刘国华许汴利
- 关键词：抗体血小板减少综合征
- 新布尼亚病毒在非洲绿猴肾细胞中的培养与分离鉴定被引量：19
- 2012年
- 目的应用非洲绿猴肾（Vero）细胞培养并分离鉴定新布尼亚病毒。方法在2009--2011年河南省信阳地区发热伴血小板、白细胞减少综合征病例的血清标本中，筛选出新布尼亚病毒RT—PCR检测阳性且保存质量较好的164份标本，在Vero细胞系中培养，观察细胞致病变效应，进行实时荧光RT—PCR、间接免疫荧光检测和电镜观察。选取10份PCR阳性产物进行测序，测序结果与GenBank公布序列进行比对。结果164份标本经Vero细胞培养，未观察到明显的特异性细胞病变；有67份实时荧光RT—PCR检测阳性，阳性率为40．85％。10份标本的核酸相似度在97．8％-100％之间，与新布尼亚病毒分离株（登录号HQ141600．1）相似度〉99％；67份实时荧光RT—PCR检测阳性标本中有58份间接免疫荧光检测可见特异性的荧光颗粒，对1份实时荧光RT—PCR和间接免疫荧光检测均为阳性的标本进行电镜观察，可见80—100nm的球形病毒颗粒。结论Vero细胞适用于新布尼亚病毒的培养、分离和鉴定。
- 杜燕华黄学勇邓文斌马红霞马宏满瑞琴康锴陈豪敏刘国华许汴利
- 关键词：病毒VERO细胞病毒培养
- 河南省新发传染病EHEC O157：H7监测研究被引量：9
- 2008年
- [目的]了解河南省肠出血性大肠杆菌(EHEC)感染性腹泻的发病情况、宿主带菌状况、食品污染程度及志贺毒素(stx)基因型,为制订有效的防治对策提供依据。[方法]采集河南省监测点腹泻病人、家畜、家禽粪便,水和肉食品等标本分离EHEC菌株,应用分子生物学技术检测分析菌株rfbO157、rfbO111、hlyA、eaeA、stx2和stx1等毒力基因和突变基因。[结果](1)从腹泻病人、家畜、家禽、食品、水、蜣螂和苍蝇中均分离出EHEC菌株共275株,总分离率7.88%;其中O157︰H7菌株为232株(84.36%),携带stx2基因EHECO157︰H7菌株88株(37.93%);非O157︰H7菌株43株(15.64%)。(2)宿主动物中羊带菌率最高(6.96%),是河南省EHEC最主要宿主动物;多重PCR检测出8种不同毒力基因组合型,主要为rfbO157+、hlyA+、eaeA+、stx2+组合。stx2变种毒素GK探针检测出3种毒素变种杂交带型,其中stx2原毒素+stx2vha型占7.4%,stx2vha型的占72.2%,未知新杂交带型占20.4%。(3)EHECO157︰H7菌株可分为9个PFGE型,自羊、牛、鸡和蜣螂和腹泻病患者中分离的携带stx2vha菌株同属一个PFGE型。(4)144株不携带志贺毒素的O157菌株中发现O157︰H38、O157︰H42和O157︰Hund(未确定型)新菌株。[结论]河南省家禽、家畜中普遍携带EHECO157︰H7大肠杆菌,羊是最主要的宿主动物;EHECO157︰H7为我省优势菌型,其毒素基因型为stx2-eaeA-hlyA并以stx2vha亚型为主。EHEC在外环境中污染严重并可在人与人、动物与人之间传播,家畜、家禽携带stx2 EHECO157︰H7率的高低与EHEC人群感染发病呈相关关系。
- 夏胜利沈刚健靳会娟马宏张锦
- 关键词：EHECO157:H7腹泻基因型PFGE
- 2005年河南省局部地区伤寒副伤寒沙门菌株脉冲场凝胶电泳分型研究
- 2011年
- 目的了解河南省伤寒、副伤寒沙门菌主要流行菌型。方法用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分型,NTSYSpc 2.1软件聚类分析。结果来自河南省两个监测点的伤寒、副伤寒沙门菌6株分离菌,根据XbaI酶切PFGE基因指纹图谱分析6,株菌出现5个PFGE基因型别:甲、乙副伤寒沙门菌,伤寒沙门菌3个PFGE型别。结论明确了2005年河南局部伤寒沙门菌流行菌型为X1、X2、X3三个基因型别,副伤寒沙门菌流行菌型有X4、X5基因型。
- 王建丽马宏许玉玲黄丽莉郭大城张爱梅张保华
- 关键词：脉冲场凝胶电泳伤寒分子分型
- EV71病毒核酸快速检测方法的比较被引量：7
- 2012年
- PCR方法检测肠道病毒71型(EV71)的分子诊断技术十分快速敏感。目前已有多篇文献报道了不同的检测EV71的PCR方法,但对不同方法检测结果的比较还少有报道。本研究将检测肠道病毒通用5'UTR基因的3种定量PCR(rRT-PCR)方法和1种普通PCR(cRT-PCR)方法和特异性检测EV71的2种rRT-PCR和1种cRT-PCR方法进行特异性和敏感性比较评估。所有试验方法都有较好的特异性,无交叉反应。核酸最低检测限值为从8.19×101～8.19×105个拷贝,rRT-PCR比cRT-PCR更敏感。所有的rRT-PCR方法检测50份临床标本时都较敏感。
- 卫海燕黄学勇许玉玲马宏陈豪敏许汴利
- 关键词：肠道病毒EV71定量PCR逆转录PCR
