高春萍
- 作品数：14 被引量：37H指数：5
- 供职机构：清华大学深圳研究生院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学社会学经济管理更多>>
- 鱼类趋化因子在免疫系统中的作用机制
- 蔡中华宋林生邢克智高春萍乔之怡白东清杨广
- 趋化性因子作为炎症发生的始动因子，对调节机体的免疫防御反应有重要的作用。该研究采用分子克隆、重组表达和基因突变等手段，从核酸和蛋白水平研究鱼类趋化性因子在炎症反应及免疫系统中的网络调节作用，从细胞和分子水平阐明鱼类趋化性...
- 关键词：
- 关键词：鱼病防治免疫系统
- 鱼类炎性细胞因子在免疫系统中调节机制的研究
- 邢克智蔡中华王庆奎宋林生孙敬锋高春萍乔之怡白东清杨广
- 炎性细胞因子是机体免疫防卫和炎症反应的核心。研究鱼类细胞因子在免疫系统的调节机制，对完善鱼类免疫机理和鱼病防治有重要的意义。该研究利用已获得的鱼类细胞因子及其抗体，研究细胞因子间的相互作用及其对特异性和非特异性免疫的调节...
- 关键词：
- 关键词：炎性细胞因子免疫系统鱼病防治
- 鱼类细胞因子在免疫系统中的调节机制
- 邢克智蔡中华宋林生高春萍孙敬锋王庆奎白东清杨广乔之怡
- 鱼类免疫学研究已成为国际水产动物病害防治研究的主流。作为高等动物免疫调节系统核心的细胞因子是否在鱼类免疫调节系统中发挥核心作用，尚不清楚。该研究利用已获得的细胞因子基因及其重组表达产物研究鱼类细胞因子的生物学活性及其对机...
- 关键词：
- 关键词：水产健康养殖分子生物学
- 黑鲷肿瘤坏死因子α基因的重组表达方法
- 本发明涉及分子生物学技术领域，是黑鲷肿瘤坏死因子α(BS TNFα)基因的体外表达与纯化技术。本发明包括重组表达载体的构建、转化、转化子筛选和表达产物的分离纯化和鉴定等技术环节。其中重组体的构建是根据黑鲷肿瘤坏死因子α预...
- 宋林生蔡中华高春萍相建海
- 文献传递
- 鸡IFN-γ基因在大肠杆菌中的表达及表达产物对鸡的免疫保护被引量：6
- 2008年
- 将鸡干扰素-γ(ChIFN-γ)成熟肽基因编码区序列亚克隆到原核表达载体pQE30上,并转化大肠杆菌M15感受态细胞。经诱导后,以镍金属亲和层析法对表达蛋白进行纯化,采用SDS-PAGE与Western-blot对表达蛋白进行鉴定。结果显示,经诱导的转化子在体外获得了高效表达,表达蛋白约占菌体蛋白的23%。0.5ng/mL以上的重组ChIFN-γ(rChIFN-γ)能显著抑制鸡新城疫病毒对细胞的侵染与伤害;但是,细胞先感染病毒后,再以不同剂量rChIFN-γ作用于细胞,则不具有对细胞的保护作用,说明rChIFN-γ对细胞的保护是通过调节机体免疫能力、干扰病毒入侵实现的。1ng/mL的rChIFN-γ可显著提高新城疫疫苗的免疫效价,具有较强的免疫协同作用。表明,原核表达的rChIFN-γ具有显著的生物学活性。
- 王立红高春萍邢克智王红英郭永军
- 关键词：体外表达生物学活性
- 黑鲷转铁蛋白基因的分子特征研究被引量：1
- 2014年
- 目的:克隆黑鲷转铁蛋白全基因并分析其分子特征。方法:采用同源克隆的方法,对黑鲷转铁蛋白全基因编码序列进行克隆,在cDNA获得了部分转铁蛋白基因的同源片段。经RACE PCR方法,分别对该基因的3’和5’末端进行扩增,获得的扩增片段经拼接后得到全基因片段。结果:黑鲷转铁蛋白全长2431bp,可编码691个氨基酸,分子量(MW)约为74.3kDa,等电点(PI)为5.63。它与鱼类转铁蛋白的同源性最高,约为65%-89%>;与其它动物(哺乳类、两栖类等)也有一定的相识性。进化分析表明黑鲷转铁蛋白与其它鱼类和哺乳类的转铁蛋白是由早期转铁蛋白共同的祖先进化来的。结论:黑鲷转铁蛋白主要在肝脏中成组成型表达,在大脑等器官中也有少量表达。该基因的表达受病原刺激的影响,表现为经病原刺激后转铁蛋白基因的组织分布显著增多。
- 陈艳萍王立红高春萍晋慧周进
- 关键词：黑鲷转铁蛋白分子特征
- 黑鲷肿瘤坏死因子cDNA的克隆与体外表达的研究
- 肿瘤坏死因子/(TNF α/)是一种具有广谱生物学活性的细胞因子，在不影响正常细胞的前提下，于体内外均能杀伤肿瘤细胞并抑制肿瘤细胞的增殖；并且可以通过刺激T细胞，诱导MHC的表达，参与和调控机体的免疫应答、炎症及发热反应...
- 高春萍
- 关键词：分子克隆
- 文献传递
- 真鲷肿瘤坏死因子（TNFα）基因的体外重组与纯化研究被引量：2
- 2004年
- 将真鲷肿瘤坏死因子(TNFα)基因的成熟肽区域克隆到表达载体pQE30中，并转化到大肠杆菌XL-blue中进行表达。转化子经载体和基因特异性引物进行PCR双向筛选，并将筛选到的阳性克隆经质粒纯化后，进行序列测定。序列测定结果显示，该基因结构正确，且准确插入到表达载体启动子的下游，获得了结构和组成正确的重组子。重、组子经IPTG诱导后，以SDS-PAGE电泳鉴定，电泳结果表明，该基因在大肠杆菌XL-blue中实现了表达。通过对诱导条件的调整，在体外获得了高效表达的重组蛋白，高效表达的重组蛋白约占菌体蛋白的25％-30％。不同诱导时间对重组蛋白影响实验显示，随诱导时间的增加，重组蛋白产量逐渐增高，经4h诱导，其表达量可以达到平台期，过长时间的诱导，对表达产量没有影响。重组蛋白经镍金属亲和层析纯化，获得了纯度较高的重组蛋白。采用交换缓冲液的方法，用Sephadex G150，对重组蛋白进行脱盐复性，使重组蛋白得到了进一步纯化。
- 蔡中华宋林生高春萍吴龙涛邱丽华
- 关键词：真鲷肿瘤坏死因子基因重组体外重组纯化
- 大学生医疗保险过渡期存在的问题及建议——以北京、深圳两地大学生医疗保险为例被引量：2
- 2012年
- 2009年起全国18个省份先后开始大学生社会医疗保险的试点工作。各地大学生医疗保险主要是将大学生直接并入当地城镇少年儿童保险中,但是缺乏专门针对大学生群体的医疗保险制度。本文对2009-2011年北京、深圳大学生医疗保险的主要特点进行对比,分析了两地大学生医疗保险政策存在的不足,并从政府和高校两个方面提出了建议和对策。
- 高春萍杨瑞东张轩彭媛媛
- 关键词：大学生医疗保险
- 黑鲷(Acanthopagrus schlegeli)CXC型趋化因子的体外表达及其生物学活性被引量：2
- 2008年
- 采用 DNA 体外重组技术,将一个黑鲷 CXC 趋化因子基因亚克隆到 pQE30表达载体并转化到大肠杆菌(M15)中诱导表达后,利用 pn 递降的缓冲液从金属亲和柱洗脱含6xHis 标签蛋白的方法得以纯化,纯化产物的分子量约为8kDa,表达量约占蛋白总量的25%,以6xHis 单抗为一抗,采用 Western-blotting 方法鉴定获得的蛋白为目的蛋白。对表达产物进行生物活性鉴定表明,该蛋白具有显著的嗜中性粒细胞和巨噬细胞的趋化活性(P<0.01,P<0.05),它对嗜中性粒细胞和头肾巨噬细胞的趋化能力呈剂量依赖性,且对嗜中性粒细胞的趋化能力大于对头肾巨噬细胞的作用,还能诱导改变嗜中性粒细胞和巨噬细胞对细菌的吞噬活性,但对嗜中性粒细胞吞噬能力的改变小于巨噬细胞。该趋化性因子在结构和功能上属不完全 ELR+CXC 型趋化因子,兼具 ELR^+CXC 和 ELR^-CXC 趋化因子的活性,是一种不成熟 ELR+CXC 型趋化因子。
- 张勇蔡中华高春萍邢克智
- 关键词：黑鲷免疫应答
