高洋
- 作品数:8 被引量:10H指数:2
- 供职机构:中国人民解放军第一军医大学更多>>
- 发文基金:军队医药卫生科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 恶性疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其特性鉴定
- <正> 疟原虫乳酸脱氢酶(LDHp)具有种、属特异性,是检测疟原虫理想的靶抗原。本研究利用纯化的恶性疟原虫LDH(LDHpf)重组抗原免疫BALB/c 小鼠制备了五株单抗,2A5、1H10杂交瘤细胞分泌的单抗类型为IgG...
- 吴英松董文其李明高洋毕惠祥李英杰
- 文献传递
- 单克隆抗体3A3、2E7用于恶性疟Dipstick检测的初步研究被引量:4
- 2001年
- 目的 建立一种快速、简便 ,适用于基层的恶性疟免疫诊断方法。 方法 将抗恶性疟原虫 HRP- 的单克隆抗体 3A3、2 E7纯化后经配对筛选 ,利用 Dipstick-免疫胶体金技术 ,制成诊断恶性疟的 Dipstick层析条。用该层析条对 115份疟疾患者血样 ,2 0份非疟疾病人血样及 10份正常人血样进行检测 ,评价其敏感性和特异性 ,并对其稳定性、重复性等进行了初步研究。 结果 用该法检测 145份血样 ,其对恶性疟的敏感性和特异性分别为 83.1%及 97.5 % ,已包被抗原、抗体的 Dipstick条在 4℃及室温下可保存 3个月以上 ,对 30份血样重复检测 4次结果完全一致。 结论 Dipstick-免疫胶体金模式快速、简便 ,适用于基层应用 。
- 郝文波胡旭初李明毕惠祥王萍高洋
- 关键词:恶性疟原虫DIPSTICK单克隆抗体
- 恶性疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其特性鉴定
- 2000年
- 为制备抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDHp)单克隆抗体(McAb),并对其特异性进行鉴定,用纯化的LDHp重组抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,筛选出分泌高滴度McAb的杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,ELISA、Westen blotting试验分析其特导性。结果,制备出2A5和 1H10两株能稳定分泌抗LDHp McAb的杂交瘤细胞株,两株单抗均为IgG2b,2A5和1H10培养上清的ELISA效价分别为1:512和1:256,腹水效价分别为1:25600和1:12800,两株单抗与间日疟、红细胞、弓形虫、日本血吸虫等抗原均不发生交叉反应,能识别恶性疟原虫的33Kda虫源蛋白。证明制备的抗LDHp杂交瘤细胞株能分泌高滴度和高特异性的单抗。
- 高洋吴英松董文其李明毕惠祥李英杰
- 关键词:恶性疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体
- 恶性疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其鉴定被引量:4
- 2000年
- [目的 ]制备抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶 (LDHp)单克隆抗体 (McAb) ,并对其特异性进行鉴定。[方法 ]用纯化的LDHp重组抗原免疫BALB/c小鼠 ,采用杂交瘤技术制备McAb ,筛选分泌高滴度McAb的杂交瘤细胞株 ,测定其免疫球蛋白亚类及其效价 ,ELISA、Westernblot试验分析其特异性。 [结果 ]筛选出 2A5和1H10两株能稳定分泌抗LDHpMcAb的杂交瘤细胞株 ,两株单抗均为IgG2b,2A5和 1H10培养上清的ELISA效价分别为 1∶5 12和 1∶2 5 6 ,腹水效价分别为 1∶2 5 6 0 0和 1∶12 80 0 ,两株单抗与间日疟原虫、红细胞、弓形虫、日本血吸虫等抗原均不发生交叉反应 ,能识别恶性疟原虫 33kDa的虫源蛋白。 [结论
- 吴英松董文其李明高洋毕惠祥李英杰
- 关键词:恶性疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体
- 恶性疟多表位疫苗在鼠疟的保护性试验
- 2000年
- 为寻找恶性疟原虫基因工程多表位疫苗保护性评价的模型动物,利用鼠约氏疟原虫(Plasmodium yoelii)及伯氏疟原虫小鼠(Phasmodium bergher)模型对本实验室构建的恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)多表位基因工程候选疫苗进行了体内保护性及免疫模式试验。结果在约氏疟原虫,先用该疫苗基因的大肠杆菌表达蛋白免疫、后用含同一基因的重组痘苗病毒加强免疫组与野生型痘苗病毒免疫组及空白对照相比,小鼠的死亡时间延长(P<0.01)。结果初步显示,约氏疟原虫鼠模可用作该基因工程多表位恶性疟原虫候选疫苗的保护性评价。
- 毕惠祥董文其李明高洋
- 关键词:恶性疟原虫约氏疟原虫疫苗鼠疟
- Dipstick快速免疫诊断反应模式的实验研究被引量:2
- 2000年
- 对Dipstick快速免疫诊断技术的免疫层析条和免疫胶体金的制备方法、操作步骤及条件等进行了实验室探讨。该技术具有简便、快速的特点,特别适合于现场检测。
- 高洋胡旭初李明王萍毕惠祥李英杰
- 关键词:DIPSTICK热带病疟疾免疫
- 恶性疟Dipstick-免疫胶体金检测试纸条和ICT测试卡现场实验被引量:1
- 2001年
- 目的 现场评价自制的恶性疟Dipstick-免疫胶体金检测试纸条和商品疟疾IDCT测试卡的敏感性和特异性及稳定性。方法 以常规镜检法作为标准,用Dipstick条和ICT卡对镜检确认的疟疾和非疟发热病人血样平行检验。结果 Dipstick条恶性疟阳性的符合率为95%,特异性为100%,30℃以上活性保持时间为45天左右;ICT卡的恶性疟(含混合感染)阳性符合率为100%,单纯间日疟符合率为97%,特异性为100%,不能区分混分感染,稳定性超过Dipstick条。结论Dipstick条仍需改进完善。ICT卡敏感特异、简便快速,是替代传统镜检较好的一种方法。
- 胡旭初徐劲余新炳毕惠祥高洋
- 关键词:恶性疟
- 抗恶性疟原虫HRP-II单链抗体的筛选与特性分析
- 2002年
- 目的 筛选抗恶性疟原虫富含组氨酸蛋白 2 (HRP II)单链抗体 (ScFv)并对其进行鉴定。方法从抗恶性疟原虫HRP IIScFv库中 ,挑取单菌落鉴定重组噬粒 ,采用ELISA法筛选能与重组抗原HRP II结合的阳性克隆 ,并选其中 2株强阳性克隆进行序列分析。结果筛选到 8株具有HRP II结合活性的阳性克隆 ,所测 2株克隆的基因序列一致 ,其重链及轻链分别属于鼠抗体基因家族中第I及κVI亚群。结论从抗体库中成功地筛选出阳性克隆 。
- 侯云霞董文其王萍陈白虹高洋吴英松郝文波李明
- 关键词:噬菌体抗体库单链抗体恶性疟原虫